阿魏酸羟基化酶论文-徐超

阿魏酸羟基化酶论文-徐超

导读:本文包含了阿魏酸羟基化酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:砀山酥梨,PbF5H,石细胞,木质素

阿魏酸羟基化酶论文文献综述

徐超[1](2015)在《砀山酥梨阿魏酸5-羟基化酶基因的克隆与表达分析》一文中研究指出砀山酥梨(Pyrus bretschneideri cv.Dangshan Su)属白梨(Pyrus bretshneider Rehd)系品种,是我国种植面积最广,产量最大的梨品种,经济价值突出。近几年来,由于气候变化、栽培管理粗放等原因,导致梨果实中石细胞含量增加、石细胞团增大,影响其食用品质和经济价值。石细胞是一种厚壁组织细胞,石细胞发育与木质素的合成、转运及沉积均密切相关。阿魏酸5-羟化酶(Ferulate 5-hydroxylase,F5H)是木质素合成的关键酶之一,主要调控S-木质素的合成,在苯丙烷代谢途径中催化阿魏酸、松柏醛、松柏醇生成5-羟基阿魏酸、5-羟基松柏醛和5-羟基松柏醇。本研究以砀山酥梨果实为材料,克隆PbF5H基因的全长cDNA,并对其进行生物信息学分析。通过在不同授粉品种砀山酥梨果实发育不同时期,研究PbF5H基因表达水平与石细胞发育的关系,并进一步对PbF5H基因的原核表达、亚细胞定位以及拟南芥的真核表达进行研究,为利用基因工程手段改造砀山酥梨的木质素含量提供了理论基础。主要结果如下:(1)克隆得到砀山酥梨阿魏酸5-羟基化酶基因PbF5H(Genbank登录号:KC852907)。其cDNA全长为1978 bp,包含一个1551 bp的开放阅读框,编码516个氨基酸,具有典型的P450家族保守结构域。推断PbF5H蛋白的相对分子量约为58.4 KD,等电点(PI)为6.49。分子式为C_(2614)H_(4128)N_(704)O_(747)S_(25)。(2)砀山酥梨PbF5H与其他物种F5H氨基酸序列具有很高的同源性,尤其与碧桃F5H同源性最高,达到90%。系统进化树分析与染色体定位分析表明,PbF5H基因可能是砀山酥梨中参与木质素生物合成的阿魏酸5-羟基化酶。(3)砀山酥梨果实石细胞发育的阶段性:15-39 d是石细胞发育初期,石细胞木质化程度较低,PbF5H出现第一个表达高峰,木质素主要由S单体组成;39-79 d是石细胞发育高峰期,砀山酥梨果实的石细胞含量和木质素含量都显着增加,且两者显着正相关,PbF5H出现第二个表达高峰;79-145 d是石细胞发育末期,这一时期石细胞发育基本停止,PbF5H表达量趋于稳定,木质素主要由G-木质素单体组成。(4)构建了原核表达载体pET-32a(+)-PbF5H,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达得到了80 kDa的PbF5H重组蛋白。(5)构建了真核表达载体pCambia1304-PbF5H-GFP。亚细胞定位表明PbF5H定位于烟草表皮细胞的细胞质膜上;进一步转化拟南芥fah1突变体,已初步筛选得到2株抗性拟南芥转基因植株。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2015-06-30)

陈雪,陈雪梅,盖颖[2](2015)在《毛白杨阿魏酸-5-羟基化酶对烟草木质素的影响》一文中研究指出为了研究阿魏酸-5-羟基化酶(F5H)在木质素合成途径中的调控作用,采用CTAB法提取毛白杨RNA,反转录得到c DNA并克隆出毛白杨F5H基因,将其以正义、反义、干涉的基因形式,使用农杆菌侵染法导入烟草基因组中。将得到的转基因植株茎段进行解剖分析,并测定其木质素细胞壁化学组成。转基因植株的木质素、纤维素总量和木质部解剖分析结果与野生型相比均为未表现出明显差异,植株正常生长。F5H的过量表达和基因沉默均不影响植株木质化和生长,可以说明它是木质素合成途径可供选择的一个很好的调控点。(本文来源于《广东农业科学》期刊2015年11期)

阿魏酸羟基化酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

为了研究阿魏酸-5-羟基化酶(F5H)在木质素合成途径中的调控作用,采用CTAB法提取毛白杨RNA,反转录得到c DNA并克隆出毛白杨F5H基因,将其以正义、反义、干涉的基因形式,使用农杆菌侵染法导入烟草基因组中。将得到的转基因植株茎段进行解剖分析,并测定其木质素细胞壁化学组成。转基因植株的木质素、纤维素总量和木质部解剖分析结果与野生型相比均为未表现出明显差异,植株正常生长。F5H的过量表达和基因沉默均不影响植株木质化和生长,可以说明它是木质素合成途径可供选择的一个很好的调控点。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

阿魏酸羟基化酶论文参考文献

[1].徐超.砀山酥梨阿魏酸5-羟基化酶基因的克隆与表达分析[D].安徽农业大学.2015

[2].陈雪,陈雪梅,盖颖.毛白杨阿魏酸-5-羟基化酶对烟草木质素的影响[J].广东农业科学.2015

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