高健:风疹病毒结构蛋白多免疫显性区域诊断抗原的制备及其诊断效能评价论文

高健:风疹病毒结构蛋白多免疫显性区域诊断抗原的制备及其诊断效能评价论文

本文主要研究内容

作者高健,赵鼎(2019)在《风疹病毒结构蛋白多免疫显性区域诊断抗原的制备及其诊断效能评价》一文中研究指出:对串联风疹病毒(Rubella virus,RV) 3个结构蛋白6个免疫显性区域进行制备(命名为B103),并将其应用于血清学诊断中。选取RV C aa 1–30&aa 96–123、E2 aa 31–105和E1 aa 11–39&aa 154–277&aa 389–412等6个免疫显性区域,将其串联并基因合成;将此基因片段插入TRX和His标签之间构建表达质粒;蛋白B103在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并利用Streamline Chelating亲和层析和DEAE阴离子交换层析纯化目的蛋白,Sephadex G-25分子筛分析其折叠情况及均一性;利用免疫印迹技术对蛋白B103的抗原性进行鉴定,并建立RV-IgM抗体捕获法ELISA检测技术,初步评价此方法对阴阳血清样本的鉴别能力。蛋白B103以可溶性形式表达,其表达量约占菌体总蛋白的18.57%,经纯化后蛋白B103浓度为3.026 mg/mL,纯度为95.35%;免疫印迹实验表明蛋白B103能与RV急性期血清发生反应;对40份RV急性期血清及40份RV阴性血清进行检测发现可以很好地鉴别阴阳性血清标本;其灵敏度为92.50%,特异性为95.00%,阳性预测值为94.87%,阴性预测值为92.68%,符合率为93.75%,McNemer检验的结果提示与"金标准"诊断结果无差异,kappa=0.900,提示两种方法诊断结果一致性优异。原核表达与层析纯化可以获取抗原性优异的RV血清学诊断抗原,可以应用于RV早期诊断中。

Abstract

dui chuan lian feng zhen bing du (Rubella virus,RV) 3ge jie gou dan bai 6ge mian yi xian xing ou yu jin hang zhi bei (ming ming wei B103),bing jiang ji ying yong yu xie qing xue zhen duan zhong 。shua qu RV C aa 1–30&aa 96–123、E2 aa 31–105he E1 aa 11–39&aa 154–277&aa 389–412deng 6ge mian yi xian xing ou yu ,jiang ji chuan lian bing ji yin ge cheng ;jiang ci ji yin pian duan cha ru TRXhe Hisbiao qian zhi jian gou jian biao da zhi li ;dan bai B103zai da chang gan jun BL21(DE3)zhong you dao biao da ,bing li yong Streamline Chelatingqin he ceng xi he DEAEyin li zi jiao huan ceng xi chun hua mu de dan bai ,Sephadex G-25fen zi shai fen xi ji she die qing kuang ji jun yi xing ;li yong mian yi yin ji ji shu dui dan bai B103de kang yuan xing jin hang jian ding ,bing jian li RV-IgMkang ti bu huo fa ELISAjian ce ji shu ,chu bu ping jia ci fang fa dui yin yang xie qing yang ben de jian bie neng li 。dan bai B103yi ke rong xing xing shi biao da ,ji biao da liang yao zhan jun ti zong dan bai de 18.57%,jing chun hua hou dan bai B103nong du wei 3.026 mg/mL,chun du wei 95.35%;mian yi yin ji shi yan biao ming dan bai B103neng yu RVji xing ji xie qing fa sheng fan ying ;dui 40fen RVji xing ji xie qing ji 40fen RVyin xing xie qing jin hang jian ce fa xian ke yi hen hao de jian bie yin yang xing xie qing biao ben ;ji ling min du wei 92.50%,te yi xing wei 95.00%,yang xing yu ce zhi wei 94.87%,yin xing yu ce zhi wei 92.68%,fu ge lv wei 93.75%,McNemerjian yan de jie guo di shi yu "jin biao zhun "zhen duan jie guo mo cha yi ,kappa=0.900,di shi liang chong fang fa zhen duan jie guo yi zhi xing you yi 。yuan he biao da yu ceng xi chun hua ke yi huo qu kang yuan xing you yi de RVxie qing xue zhen duan kang yuan ,ke yi ying yong yu RVzao ji zhen duan zhong 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自生物工程学报的高健,赵鼎,发表于刊物生物工程学报2019年08期论文,是一篇关于免疫显性区域论文,风疹病毒论文,原核表达论文,层析纯化论文,血清学诊断论文,生物工程学报2019年08期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自生物工程学报2019年08期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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