导读:本文包含了钠氢转运蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:钠,氢逆向转运蛋白,膜蛋白,功能鉴定,YdjM超家族
钠氢转运蛋白论文文献综述
王艳红,刘艳双,石德喜,朱保国,吕保磊[1]（2018）在《新型YdjM超家族成员的钠/氢逆向转运蛋白功能鉴定》一文中研究指出在原核生物中,钠/氢逆向转运蛋白具有催化细胞内的Na~+、Li~+或K~+等碱基阳离子的排出,换取外部质子,以降低有毒碱性金属阳离子的细胞质浓度和维持细胞内pH稳态起到了至关重要的作用。为了进一步挖掘中度嗜盐菌Halobacillus Y5中具有盐碱耐受性的钠/氢逆向转运蛋白基因并对其功能进行鉴定,我们首先提取该菌的基因组DNA,然后采用Sau3AI随机酶切及功能互补的方法获得了一个新型的钠/氢逆向转运蛋白基因Ha_ydjM。生物信息学分析表明,该基因属于YdjM超家族成员,是一个未知功能的膜蛋白,系统发育分析证实,其与来自Halobacillus sp. Marseille-P 3789的YdjM(蛋白登录号WP_101846656. 1)家族成员聚在一起但形成独立分支。研究发现,该基因能够恢复大肠杆菌突变株KNabc对0. 2mol/L NaCl和5mmol/L Li Cl的耐受特性,并且耐受碱性pH 8. 0。功能分析显示,该蛋白呈现pH依赖的钠/氢逆向转运蛋白活性,转运动力学分析表明,Na~+、K~+、Li~+在KNabc中K_m值分别是0. 43±0. 05mmol/L、0. 49±0. 06mmol/L、0. 64±0. 06mmol/L,即对Na~+、K~+、Li~+的亲和力分别是Na~+> K~+> Li~+。综上所述,Ha_ydjM代表了一种新型的钠/氢逆向转运蛋白,这丰富了YdjM超家族成员,并为其他未知膜蛋白功能分析提供依据。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年12期）
曹博宁,龙定沛,张梦,刘长英,向仲怀[2]（2017）在《桑树钠氢反转运蛋白(NHX)基因家族分子特性和表达分析》一文中研究指出植物钠氢反转运蛋白(NHX)在植物钠钾离子平衡、细胞pH调节中起着重要的作用。桑树是一种传统的经济树种,其桑叶是家蚕的主要饲料来源,然而它也可以适应多种不同的极端环境,如高盐环境。然而,目前对桑树NHX基因的功能还知之甚少。本研究,我们克隆和鉴定到了7个桑树NHX基因,通过对其进化和基因结构分析表明,桑树NHX基因家族主要分为3个亚家族。对其表达模式分析发现MaNHX基因在策沙和粤桑这两个不同的桑树品种中有着不同的表达模式。MaNHX基因家族成员在粤桑的不同组织中能够响应不同的胁迫和信号分子处理,包括盐胁迫、干旱胁迫、脱落酸、茉莉酸甲酯、双氧水、水杨酸等。以上结果表明植物钠氢反转运蛋白不仅能作用于对盐胁迫的响应,还参与了植物不同的生理途径,为今后进一步研究桑树NHX基因的功能奠定了良好的基础。(本文来源于《全国桑树产业发展学术研讨会论文集》期刊2017-08-21）
宋娜[3]（2017）在《嗜碱盐单胞菌中新型的NhaD型钠/氢逆向转运蛋白基因的克隆与功能分析》一文中研究指出嗜碱盐单胞菌(Halomonas alkaliphila)DSM 16354T是一株可生长在10%的NaCl及p H 9.0碱性环境中的一种中度嗜盐和嗜碱菌。中度嗜盐菌指的是在0.1%-32.5%Na Cl环境中能够正常生长,代谢的微生物类群。它作为细菌耐盐碱机制的重要研究对象,基因的类别有很多且耐盐机制也很复杂。对中度嗜盐菌的耐盐碱基因资源进行挖掘,是深入研究微生物盐适应机制和开发利用微生物资源的重要前提。它与一般的非嗜盐菌相比,具有相对独特的生理生化结构、代谢途径、以及遗传学特性等。本研究利用基因文库与大肠杆菌(Escherichia coli)钠/氢逆向转运蛋白缺陷株KNabc(Δnha A、Δnha B、Δcha A)功能互补相结合的方法,从Halomonas alkaliphila DSM 16354T中克隆获得一个重组质粒p UC-SN11。它编码钠/氢逆向转运蛋白(Na~+/H~+antiporter)。耐盐碱实验表明,KNabc/p UC-SN11能在含0.2 M Na Cl的LBK培养基中生长。并初步预测该质粒包含的序列可能编码Na~+/H~+逆向转运蛋白。序列分析发现pUC-SN11携带的DNA片段长5662 bp,有3个完整的阅读框(ORF)。经过比对,ORF1(1-1324 bp)与盐单胞菌属(Halomonas campaniensis)中的TRAP dicarboxylate transporter subunit Dct M同源性最高可达99%。ORF2(1414-2389 bp)与盐单胞菌属(Halomonas campaniensis)中TRAP ABC transporter substrate-binding protein同源性最高可达99%。ORF3(2833-4309 bp)与盐单胞菌属(Halomonas campaniensis)中的sodium:proton antiporter(NhaD)的同源性最高可达99%。由于ORF3编码一个单亚基的钠/氢逆向转运蛋白,因此推测起作用的阅读框是ORF3。所以本研究直接对ORF3进行亚克隆。因其来自嗜碱盐单胞菌(Halomonas alkaliphila)DSM 16354T而被定名为Ha_nhaD。将Ha_NhaD与已鉴定的NhaD型钠/氢逆向转运蛋白进行氨基酸序列比对,比对的蛋白分别是Ha_NhaD2(来自Halomonas sp.Y2)、Aa_NhaD(来自Alkalimonas amylolytica)、Ha_NhaD1(来自Halomonas sp.Y2)、He_NhaD(来自Halomonas elongata)、Vc_NhaD(来自Vibrio cholerae)、Vp_NhaD(来自Vibrio parahaemolyticus)、Dl_NhaD(来自the metagenome of halophilic bacteria in Daban Salt Lake)和Dw_NhaD(来自the metagenome of halophilic bacteria in Dagong Ancient Brine Well),比对结果同源性依次为91%、72%、70%、64%、60%、56%、17%和11%。为了证明它是否是一个新型的NhaD型钠/氢逆向转运蛋白,采用邻接法构建系统发育树。此发育树包括7个最近的同系物,同源性在76%-99%之间,7个较近的同系物同源性在50%-75%之间和7个较远的同系物同源性在20%-49%之间,同时包括8个已经鉴定的钠/氢逆向转运蛋白。结果表明,它与其同系物聚在一起并形成了自己独立的分支。所以我们认为Ha_NhaD是一个新型的NhaD型钠/氢逆向转运蛋白。耐盐碱测试表明,含有重组质粒pUC-nhaD的大肠杆菌(E.coli)KNabc(Δnha A、Δnha B、Δcha A)能在0.6 M Na Cl、0.2 M Li Cl及p H 8.0的碱性环境中生长。拓扑异构学结构分析显示,Ha_NhaD含有12个TMS的跨膜蛋白,表明蛋白是一个低极性的跨膜蛋白。本研究测试了含有nhaD基因的重组质粒pUC-nhaD的大肠杆菌(E.coli)KNabc转化子的阳离子/H~+逆向转运蛋白活性。结果证实了KNabc/p UC-nhaD具有Na~+(Li~+)/H~+逆向转运活性。进一步测定了不同pH值对NhaD的阳离子/H~+逆向转运蛋白活性的影响,结果显示Ha_NhaD逆向转运蛋白活性在p H 6.5-9.5范围内表现出p H依赖性。为了确定Ha_NhaD对阳离子的亲和力,测定了KNabc/p UC-nhaD反转膜在最适pH条件下Ha_NhaD蛋白对Na~+、Li~+的K0.5值,测定结果显示NhaD蛋白的底物亲和性为:Na~+>Li~+。综上所述,Ha_nhaD基因编码一个新型的NhaD型Na~+/H~+逆向转运蛋白。(本文来源于《东北农业大学》期刊2017-06-01）
黄晓斌,仲蕾蕾[4]（2012）在《破骨细胞钠氢转运蛋白关键位点研究》一文中研究指出目的在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白2,对其关键氨基酸保守位点进行突变分析,鉴定其作为盐离子载体转运Na+的功能。方法采用突变试剂盒依次把此蛋白的D278和D279 2个位点的天冬氨酸中1个氨基酸突变成半胱氨酸,得到2个不同位点突变的定点突变体;构建酵母双基因表达载体,通过电穿孔的方式转入到酵母菌株中;Western印迹检测2个定点突变基因在酵母菌株的表达;通过NaCl选择压力显示2个突变体在高盐环境中的相互作用,观察菌株的抗盐生长表型。结果成功获得适合转化酵母的多个载体;在固体和液体培养基中,经半乳糖诱导后,各个载体均可使酵母异源表达钠氢转运蛋白2;生长曲线显示2个突变体可相互作用,部分恢复酵母菌株的抗盐能力。结论钠氢转运蛋白2通过关键位点D278和D279 2,以形成二聚体的方式在细胞中发挥着钠离子转运功能。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2012年13期）
黄晓斌,仲蕾蕾[5]（2012）在《钠氢转运蛋白2敲出小鼠破骨细胞分化研究》一文中研究指出目的建立NHA2基因敲出小鼠模型,观察NHA2-/-小鼠骨髓细胞分化为破骨细胞的能力及生长表型变化。方法首先用NHA2+/-杂合子小鼠繁殖得到NHA2-/-纯合子小鼠;以小鼠尾巴为材料做普通PCR鉴定其基因型;用RT-PCR检测基因敲出小鼠NHA2转录情况;从小鼠中取出骨髓进行破骨细胞诱导,观察其分化能力。结果 NHA2-/-小鼠骨髓细胞体外诱导成成熟破骨细胞能力减弱;但小鼠生长表型无明显变化。结论 NHA2作为盐离子载体在体外对破骨细胞的成熟分化有一定影响,在小鼠体内可能与其它离子载体共同调节盐平衡系统。(本文来源于《中国骨质疏松杂志》期刊2012年05期）
黄晓斌,仲蕾蕾[6]（2012）在《破骨细胞钠氢转运蛋白集中于线粒体中表达》一文中研究指出目的:把RAW264.7和人外周血CD14+诱导成破骨样细胞,检测破骨细胞在成熟过程中钠氢转运蛋白2(Na+-H+An-tiporter 2,NHA2)的转录表达情况,并定位其表达位置。方法:细胞因子RANKL、M-CSF在体外诱导RAW264.7和人外周血CD14+细胞发育成破骨样细胞;RT-PCR检测NHA2在诱导过程中转录水平上所发生的变化;Western blot检测诱导前后此蛋白表达情况;细胞原位荧光染色对其表达进行细胞精确定位。结果:RAW264.7和人外周血CD14+细胞被RANKL、M-CSF诱导成破骨样细胞;RT-PCR结果显示NHA2随着破骨细胞的分化成熟转录水平不断加强;Western blot结果显示此蛋白只表达于成熟的破骨细胞中;细胞原位荧光染色结果显示这个蛋白主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中。结论:NHA2作为盐离子载体主要表达于成熟破骨细胞的线粒体中,通过控制线粒体盐离子的代谢平衡来影响破骨细胞的发育分化。(本文来源于《重庆医科大学学报》期刊2012年02期）
黄晓斌,仲蕾蕾[7]（2012）在《在酵母中异源表达人破骨细胞钠氢转运蛋白》一文中研究指出目的在酿酒酵母中异源表达人破骨细胞分化成熟潜在因子钠氢转运蛋白2(HsNHA2),鉴定其作为盐离子载体转运Na+的功能,并对其在细胞中的表达进行初步定位分析。方法采用高保真PCR试剂盒扩增出HsNHA2;构建酵母表达载体,通过电穿孔的方式转入到酿酒酵母菌株中;Western印迹检测其在酵母菌株的表达;通过NaCl选择压力观察菌株在高盐环境中的生长表型,并用根皮素抑制HsNHA2观察其抗盐功能;最后用细胞原位荧光染色确定HsNHA2在细胞中的表达位置。结果 Western印迹证实HsNHA2在酵母菌株中正常表达;生长曲线显示HsNHA2可使菌株在高盐环境中生长,根皮素抑制HsNHA2表达后菌株不能在0.2mol/L NaCl培养基中生长;免疫荧光染色初步证明HsNHA2表达在细胞膜上。结论 HsNHA2作为盐离子载体在酵母细胞中主要表达在细胞膜上行使转运Na+的功能,以维持细胞正常生长。(本文来源于《中国骨质疏松杂志》期刊2012年01期）
钠氢转运蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
植物钠氢反转运蛋白(NHX)在植物钠钾离子平衡、细胞pH调节中起着重要的作用。桑树是一种传统的经济树种,其桑叶是家蚕的主要饲料来源,然而它也可以适应多种不同的极端环境,如高盐环境。然而,目前对桑树NHX基因的功能还知之甚少。本研究,我们克隆和鉴定到了7个桑树NHX基因,通过对其进化和基因结构分析表明,桑树NHX基因家族主要分为3个亚家族。对其表达模式分析发现MaNHX基因在策沙和粤桑这两个不同的桑树品种中有着不同的表达模式。MaNHX基因家族成员在粤桑的不同组织中能够响应不同的胁迫和信号分子处理,包括盐胁迫、干旱胁迫、脱落酸、茉莉酸甲酯、双氧水、水杨酸等。以上结果表明植物钠氢反转运蛋白不仅能作用于对盐胁迫的响应,还参与了植物不同的生理途径,为今后进一步研究桑树NHX基因的功能奠定了良好的基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
钠氢转运蛋白论文参考文献
[1].王艳红,刘艳双,石德喜,朱保国,吕保磊.新型YdjM超家族成员的钠/氢逆向转运蛋白功能鉴定[J].中国生物工程杂志.2018
[2].曹博宁,龙定沛,张梦,刘长英,向仲怀.桑树钠氢反转运蛋白(NHX)基因家族分子特性和表达分析[C].全国桑树产业发展学术研讨会论文集.2017
[3].宋娜.嗜碱盐单胞菌中新型的NhaD型钠/氢逆向转运蛋白基因的克隆与功能分析[D].东北农业大学.2017
[4].黄晓斌,仲蕾蕾.破骨细胞钠氢转运蛋白关键位点研究[J].第叁军医大学学报.2012
[5].黄晓斌,仲蕾蕾.钠氢转运蛋白2敲出小鼠破骨细胞分化研究[J].中国骨质疏松杂志.2012
[6].黄晓斌,仲蕾蕾.破骨细胞钠氢转运蛋白集中于线粒体中表达[J].重庆医科大学学报.2012
[7].黄晓斌,仲蕾蕾.在酵母中异源表达人破骨细胞钠氢转运蛋白[J].中国骨质疏松杂志.2012