野苋菜凝集素基因论文-邓智年

野苋菜凝集素基因论文-邓智年

导读:本文包含了野苋菜凝集素基因论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:野苋菜凝集素基因,豇豆胰蛋白酶抑制剂,MAR序列,白菜

野苋菜凝集素基因论文文献综述

邓智年[1](2007)在《野苋菜凝集素基因的克隆及转基因研究》一文中研究指出蚜虫属同翅目昆虫,种类繁多,侵害目标广泛。它通过口器深入植物的韧皮部吸收营养,并携带和传播病毒,造成农作物的产量和品质的下降。植物抗虫基因工程为控制害虫的危害提供了新的途径。随着越来越多的抗虫基因被导入植物以提高植物的抗虫能力,人们发现:寻找新的高效抗虫基因,仍是现阶段抗虫基因工程的关键;对植物抗虫能力的提高不能单单依靠某个抗虫基因的转入就能实现;抗虫基因在转基因植物体内表达不稳定甚至出现转基因沉默;等等。基因融合可以使多个抗虫基因协同作用,提高植物的抗虫能力和抗虫谱并实现基因同步表达,并以完全独立的不同的杀虫蛋白的形式发挥活性,因此在植物抗虫基因工程中有很高的利用价值。此外,利用MARs序列(Matrix attachment regios,MARs)是在染色体水平克服外源基因失活的一种有效策略。本研究采用同源扩增PCR技术,从苋属的野苋菜中分离和克隆新的苋菜凝集素家族基因,并对这个基因的结构与功能进行研究,阐明在现代分子遗传育种中引入该基因的可能途径和重要意义。通过构建杀虫融合蛋白基因,即将两个抗虫基因编码序列通过接头连接在一起,构成可同时表达两种抗虫活性的融合蛋白,以期能延缓昆虫抗性的发生,而且也增强了杀虫活性。另外,在减少基因沉默的措施上,在目的基因的两侧增加基质结合序列(MARs),以增强基因的表达能力。本研究取得的主要结果如下:1.利用同源克隆的方法从野苋菜Amaranthus viridis L.中克隆到野苋菜凝集素基因(Amaranthus viridis aggllutinin,AVA)。转基因烟草植株的抗蚜分析表明,表达野苋莱凝集素的转基因烟草植株都不同程度地抑制了蚜虫群体发展的速度,转AVA和AVAc基因植株平均抑蚜率分别约为60.181%和50.63%。转含有内含子的AVA基因比不含内含子的编码区基因AVAc有更好的抗蚜性。AVA基因是苋菜凝集素基因家族的新成员,是一个有应用前景的新的抗虫基因。2.本研究从叁个不同品种的豌豆中分离到3个具有MARs序列特征的DNA片段MMAR.DMAR,HMAR。利用GenBank同源性搜寻发现它们是新的未注册的DNA序列。经转化烟草对GUS活性测定发现,两侧顺式重复连接MAR对外源基因表达的增强作用很明显,MMAR、HMAR和DMAR都不同程度的提高了GUS的表达,分别为载体对照植株的4.16、3.66和2.08倍。但不同个体间表达水平差异仍然比较明显。3.通过构建MAR-AVA-MAR植物表达载体,利用农杆菌介导法转化白菜,获得抗蚜转化植株。含有AVA基因的白菜植株对桃蚜的群体发展有一定的抑制作用,在接种12天后的平均抑制桃蚜密度达55.8%;在转基因抗性植株上观察到有少量桃蚜若虫死亡的现象。无MAR的转基因植株平均桃蚜抑制率为34.3%。但含MAR的转基因单株之间基因表达也仍存在一定的差异。从总体上来说含有MAR的转基因白菜植株较不含MAR的转化植株对桃蚜具有更明显的抑制作用,且抗性程度与AVA基因的表达量呈正相关。4.根据豇豆胰蛋白酶抑制剂CpTl和野苋菜凝集素AVAc的抗虫特性,利用豌豆MMAR,成功构建了pC2MAR-AVAc/CpTI植物表达载体。以甘蔗ROC25胚性愈伤组织为转化受体材料,建立了一个高效而又简便的农杆菌介导的甘蔗遗传转化体系,成功地实现了MAR序列介导杀虫融合基因(AVAc+CpTI)在甘蔗中转化。(本文来源于《广西大学》期刊2007-05-01)

邓智年,魏源文,吕维莉,李杨瑞[2](2007)在《MAR序列介导野苋菜凝集素基因在白菜中的表达》一文中研究指出以‘丰顺’白菜带柄子叶为转化受体,用带有MAR(Matrix Attachment Region)和不带MAR的两种植物表达载体进行农杆菌介导转化野苋菜凝集素基因(Amaranthus viridisL.agglutinin,AVA)获得转基因的抗蚜小白菜。分析MAR序列介导对转基因表达的影响。表明利用MAR序列介导AVA基因表达,获得转基因植株的数量比对照提高29.63%;转AVA基因白菜对桃蚜(Myzus persicae)的群体发展有一定的抑制作用,平均抑制率为55.8%;MAR序列介导AVA基因表达的转基因植株中,该基因的表达水平比对照高,并且不同转基因单株间AVA基因表达差异比对照小。(本文来源于《园艺学报》期刊2007年02期)

邓智年,李楠,魏源文,吕维莉,李杨瑞[3](2007)在《野苋菜凝集素基因的克隆及抗蚜性》一文中研究指出通过PCR从苋科植物野苋菜Amaranthus viridis L.基因组DNA中扩增出野苋菜凝集素的核基因片段AVA。序列分析结果表明该基因为1831 bp,含有一个922 bp的内含子和两个分别为212 bp和697 bp的外显子。采用反向PCR技术获得了该基因的编码区克隆。分别构建含有内含子和不含内含子的AVA基因植物表达载体pBI121AVA-GUS和pBI121AVAc-GUS,通过根癌农杆菌介导法转化烟草。PCR、GUS检测结果均表明AVA基因不仅已整合到烟草基因组DNA中,而且初步表明转基因烟草有AVA蛋白表达。抗蚜实验表明含内含子和无内含子的AVA基因在转基因烟草中的抗蚜能力不同,转AVA和AVAc烟草对蚜虫的抑制率分别为60.81%和50.63%,有的植株高达97%。实验结果表明所克隆的AVA基因是具有抗蚜能力的苋菜凝集素基因家族中的新成员。(本文来源于《广西师范大学学报(自然科学版)》期刊2007年01期)

野苋菜凝集素基因论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

以‘丰顺’白菜带柄子叶为转化受体,用带有MAR(Matrix Attachment Region)和不带MAR的两种植物表达载体进行农杆菌介导转化野苋菜凝集素基因(Amaranthus viridisL.agglutinin,AVA)获得转基因的抗蚜小白菜。分析MAR序列介导对转基因表达的影响。表明利用MAR序列介导AVA基因表达,获得转基因植株的数量比对照提高29.63%;转AVA基因白菜对桃蚜(Myzus persicae)的群体发展有一定的抑制作用,平均抑制率为55.8%;MAR序列介导AVA基因表达的转基因植株中,该基因的表达水平比对照高,并且不同转基因单株间AVA基因表达差异比对照小。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

野苋菜凝集素基因论文参考文献

[1].邓智年.野苋菜凝集素基因的克隆及转基因研究[D].广西大学.2007

[2].邓智年,魏源文,吕维莉,李杨瑞.MAR序列介导野苋菜凝集素基因在白菜中的表达[J].园艺学报.2007

[3].邓智年,李楠,魏源文,吕维莉,李杨瑞.野苋菜凝集素基因的克隆及抗蚜性[J].广西师范大学学报(自然科学版).2007

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