赵慧君:猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用论文

赵慧君:猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用论文

本文主要研究内容

作者赵慧君,赵旭阳,史西保,陈静,范小敏,司朝朝,王丽,李青梅,常晓博,李雪莹,付建蒙,徐雅甜,邓瑞广,张改平(2019)在《猪繁殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白1α多克隆抗体的制备及应用》一文中研究指出:以真核质粒pcDNA3.1-flag-nsp1α为模板,利用PCR扩增出nsp1α基因片段,构建原核重组载体pET32a-nsp1α,转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态,1 mmol/L IPTG在37℃诱导表达6 h,成功获得以包涵体形式存在的重组蛋白,能够与小鼠抗His标签单克隆抗体反应;包涵体复性后作为抗原免疫新西兰大白兔,3次免疫后20 d获得兔多抗血清。通过间接ELISA、Western blot、间接免疫荧光、免疫组化等试验获得了高效价的兔多抗血清,该血清能够特异性地识别真核质粒表达的nsp1α以及PRRSV BJ4株。该试验成功表达了pET32a-nsp1α重组蛋白,并制备了高效价、高特异性的兔抗nsp1α多克隆抗体。

Abstract

yi zhen he zhi li pcDNA3.1-flag-nsp1αwei mo ban ,li yong PCRkuo zeng chu nsp1αji yin pian duan ,gou jian yuan he chong zu zai ti pET32a-nsp1α,zhuai hua dao da chang gan jun BL21(DE3)gan shou tai ,1 mmol/L IPTGzai 37℃you dao biao da 6 h,cheng gong huo de yi bao han ti xing shi cun zai de chong zu dan bai ,neng gou yu xiao shu kang Hisbiao qian chan ke long kang ti fan ying ;bao han ti fu xing hou zuo wei kang yuan mian yi xin xi lan da bai tu ,3ci mian yi hou 20 dhuo de tu duo kang xie qing 。tong guo jian jie ELISA、Western blot、jian jie mian yi ying guang 、mian yi zu hua deng shi yan huo de le gao xiao jia de tu duo kang xie qing ,gai xie qing neng gou te yi xing de shi bie zhen he zhi li biao da de nsp1αyi ji PRRSV BJ4zhu 。gai shi yan cheng gong biao da le pET32a-nsp1αchong zu dan bai ,bing zhi bei le gao xiao jia 、gao te yi xing de tu kang nsp1αduo ke long kang ti 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自安徽农业科学的赵慧君,赵旭阳,史西保,陈静,范小敏,司朝朝,王丽,李青梅,常晓博,李雪莹,付建蒙,徐雅甜,邓瑞广,张改平,发表于刊物安徽农业科学2019年12期论文,是一篇关于多克隆抗体论文,安徽农业科学2019年12期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自安徽农业科学2019年12期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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