本文主要研究内容
作者李梦桃（2019）在《转Bt cry2Ah-vp和bar基因抗虫耐除草剂玉米的研究》一文中研究指出：玉米是主要的粮食作物,也是饲料和工业重要的原料。害虫和杂草一直是限制玉米产量和品质的重要因素。为了降低害虫和杂草对玉米生长发育造成的危害,人们开始利用化学方法进行虫害草害治理,但是由此带来的弊端也逐渐增多。随着生物技术的发展,利用基因工程技术,向玉米中导入抗虫耐除草剂基因,培育出具有抗虫和耐除草剂性状的转基因玉米,它能有效的防治虫害和草害,且对环境、有益昆虫及人畜均无不良影响。Bt cry2Ah基因是从苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）菌株中克隆的,具有杀虫活性的蛋白基因。根据植物密码子偏好性,本实验室前期对Bt cry2Ah基因进行了密码子优化和改造,将改造后的基因Bt cry2Ah-vp和草铵膦抗性基因bar构建表达载体,用农杆菌介导的方法转入玉米自交系B104,获得了T0代转基因玉米,通过草铵膦筛选,获得了一个高抗草铵膦的株系命名为VP1-5,并对其进行了分子检测和抗虫性筛选。本研究对转Bt cry2Ah-vp基因玉米VP1-5进行了分子水平检测和农艺性状调查。采用PCR、Southern blot、RT-PCR、荧光定量PCR（qPCR）、酶联免疫吸附测定（ELISA）等方法对cry2Ah-vp基因的转入情况、拷贝数、转录水平、蛋白表达量等方面进行了检测。室内和室外生物活性检测分析转基因玉米VP1-5对粘虫和玉米螟的抗虫性。农艺性状主要考察了转基因玉米VP1-5的生育期、株高、产量等。通过PCR和Southern blot检测结果,表明cry2Ah-vp基因是以单拷贝的形式插入玉米基因组中的,而且可以稳定遗传;RT-PCR和qPCR检测结果表明cry2Ah-vp基因在VP1-5的不同组织中均可以正常转录,抽雄期cry2Ah-vp基因的相对表达量为叶>花丝>心叶>根>雄穗>苞叶>茎。ELISA结果表明,玉米6叶期时Cry2Ah-vp蛋白在根、茎、叶中的表达量均较高,叶片中表达量最高为2155±529.58 ng/g FW（鲜重）。生物活性检测实验结果表明,VP1-5转基因玉米对粘虫有很好的杀虫活性,接虫3d后粘虫幼虫的死亡率达到100%,对亚洲玉米螟幼虫也有明显的生长抑制作用,对小地老虎的杀虫作用不明显。比较转基因玉米VP1-5和栽培品种郑58的农艺性状,发现转基因玉米的物候期及穗行数、穗长、千粒重等性状均无显著差异。本研究获得的VP1-5转基因玉米为抗虫玉米育种提供了优良的种质材料,未来会有很好的商业化前景。
Abstract
yu mi shi zhu yao de liang shi zuo wu ,ye shi si liao he gong ye chong yao de yuan liao 。hai chong he za cao yi zhi shi xian zhi yu mi chan liang he pin zhi de chong yao yin su 。wei le jiang di hai chong he za cao dui yu mi sheng chang fa yo zao cheng de wei hai ,ren men kai shi li yong hua xue fang fa jin hang chong hai cao hai zhi li ,dan shi you ci dai lai de bi duan ye zhu jian zeng duo 。sui zhao sheng wu ji shu de fa zhan ,li yong ji yin gong cheng ji shu ,xiang yu mi zhong dao ru kang chong nai chu cao ji ji yin ,pei yo chu ju you kang chong he nai chu cao ji xing zhuang de zhuai ji yin yu mi ,ta neng you xiao de fang zhi chong hai he cao hai ,ju dui huan jing 、you yi kun chong ji ren chu jun mo bu liang ying xiang 。Bt cry2Ahji yin shi cong su yun jin ya bao gan jun （Bacillus thuringiensis,Bt）jun zhu zhong ke long de ,ju you sha chong huo xing de dan bai ji yin 。gen ju zhi wu mi ma zi pian hao xing ,ben shi yan shi qian ji dui Bt cry2Ahji yin jin hang le mi ma zi you hua he gai zao ,jiang gai zao hou de ji yin Bt cry2Ah-vphe cao an lin kang xing ji yin bargou jian biao da zai ti ,yong nong gan jun jie dao de fang fa zhuai ru yu mi zi jiao ji B104,huo de le T0dai zhuai ji yin yu mi ,tong guo cao an lin shai shua ,huo de le yi ge gao kang cao an lin de zhu ji ming ming wei VP1-5,bing dui ji jin hang le fen zi jian ce he kang chong xing shai shua 。ben yan jiu dui zhuai Bt cry2Ah-vpji yin yu mi VP1-5jin hang le fen zi shui ping jian ce he nong yi xing zhuang diao cha 。cai yong PCR、Southern blot、RT-PCR、ying guang ding liang PCR（qPCR）、mei lian mian yi xi fu ce ding （ELISA）deng fang fa dui cry2Ah-vpji yin de zhuai ru qing kuang 、kao bei shu 、zhuai lu shui ping 、dan bai biao da liang deng fang mian jin hang le jian ce 。shi nei he shi wai sheng wu huo xing jian ce fen xi zhuai ji yin yu mi VP1-5dui nian chong he yu mi ming de kang chong xing 。nong yi xing zhuang zhu yao kao cha le zhuai ji yin yu mi VP1-5de sheng yo ji 、zhu gao 、chan liang deng 。tong guo PCRhe Southern blotjian ce jie guo ,biao ming cry2Ah-vpji yin shi yi chan kao bei de xing shi cha ru yu mi ji yin zu zhong de ,er ju ke yi wen ding wei chuan ;RT-PCRhe qPCRjian ce jie guo biao ming cry2Ah-vpji yin zai VP1-5de bu tong zu zhi zhong jun ke yi zheng chang zhuai lu ,chou xiong ji cry2Ah-vpji yin de xiang dui biao da liang wei xie >hua si >xin xie >gen >xiong sui >bao xie >jing 。ELISAjie guo biao ming ,yu mi 6xie ji shi Cry2Ah-vpdan bai zai gen 、jing 、xie zhong de biao da liang jun jiao gao ,xie pian zhong biao da liang zui gao wei 2155±529.58 ng/g FW（xian chong ）。sheng wu huo xing jian ce shi yan jie guo biao ming ,VP1-5zhuai ji yin yu mi dui nian chong you hen hao de sha chong huo xing ,jie chong 3dhou nian chong you chong de si wang lv da dao 100%,dui ya zhou yu mi ming you chong ye you ming xian de sheng chang yi zhi zuo yong ,dui xiao de lao hu de sha chong zuo yong bu ming xian 。bi jiao zhuai ji yin yu mi VP1-5he zai pei pin chong zheng 58de nong yi xing zhuang ,fa xian zhuai ji yin yu mi de wu hou ji ji sui hang shu 、sui chang 、qian li chong deng xing zhuang jun mo xian zhe cha yi 。ben yan jiu huo de de VP1-5zhuai ji yin yu mi wei kang chong yu mi yo chong di gong le you liang de chong zhi cai liao ,wei lai hui you hen hao de shang ye hua qian jing 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自东北农业大学的李梦桃，发表于刊物东北农业大学2019-08-27论文，是一篇关于苏云金芽胞杆菌论文,转基因玉米论文,基因论文,粘虫论文,害虫防治论文,东北农业大学2019-08-27论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自东北农业大学2019-08-27论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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