陆寒茵1陆萍2
(1上海市长宁区精神卫生中心检验科200335)
(2上海市中医药大学附属岳阳中西医结合医院200437)
【摘要】目的：探讨血清葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)和类风湿因子(RF)联合检测在类风湿关节炎(RA)中的临床意义。方法：用酶联免疫吸附试验(ELISA)双抗体夹心法检测GPI抗原，用免疫散射比浊法检测类风湿因子(RF)。结果：①RA患者血清中GPI浓度明显高于其他风湿病组和健康组(P<0.01)②GPI和RF两者联合检验，敏感性虽有所下降，但特异性却有了很大的提高。③GPI与RF之间存在显著相关性。结论：葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)和类风湿因子(RF)联合检测，可明显提高对类风湿关节炎诊断的特异性，有助于类风湿关节炎的诊断治疗。
【关键词】葡萄糖-6-磷酸异构酶类风湿因子类风湿关节炎联合检测
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）08-0021-02
引言：类风湿关节炎(RheumatoidArthritis，RA)是一种常见的以关节慢性炎症为主要表现的系统性风湿性疾病。RA的早期诊断及研判病情发展趋势有利于对病情的控制。目前广泛应用的诊断标准(1987年美国风湿病协会分类标准)中血清学诊断指标只有类风湿因子(RF)，RF虽然敏感性高，但其特异性相对较低，给临床诊断带来一定困难。近来试验已经证实RA患者的发病与多种自身抗原及相关抗体有关，且已证实RA患者血清及关节液中葡萄糖-6-磷酸异构酶(GPI)的浓度高于健康人群及其他风湿病患者，GPI有可能是诊断RA的又一个实验室指标[1,2]。本课题主要研究探讨联合检测GPI和RF两项血清学指标对RA的诊断意义。
1.对象与方法
1.1研究对象：
1.1.1RA患者组：选择住院及门诊RA患者120例，患者均符合1987年美国风湿病学会(ACR)修订的RA分类标准。
1.1.2其他风湿性疾病组：选择同期门诊及住院的其他风湿病患者58例，患者均符合国际及国内诊断标准。
1.1.3健康对照组：40例
1.2实验方法：
1.2.1标本采集：所有标本均在实验前采集静脉血3ml，收集血清标本，所有标本-70℃保存至实验时，一次冻融后测定。
1.2.2RF检测方法：
试剂盒和标准品均由美国贝克曼试剂公司提供，仪器：贝克曼IMMAGE800特定蛋白仪。操作按仪器及试剂说明书进行。用免疫散射比浊法测得。RF>20U/ml为阳性。
1.3统计学分析：
采用四格表计算GPI和RF的敏感性、特异性。采用SPSS13.0统计软件进行组内或组间比较，计量资料用t检验，计数资料用χ2检验。GPI与RF的关系经Kendall′sTau-b相关分析检验计算相关系数。
2.结果
2.1各组血清GPI及RF检测结果比较：GPI及RF检测的阳性率在RA组较高，分别是63.33﹪和77.50﹪。二者比较差异有统计学意义，(X2=5.780，P<0.05)，且明显高于其他风湿病组和健康组（见表1）二者检测的敏感度分别是63.33﹪和77.50﹪，特异度分别是84.69﹪和85.71﹪（见表2）
2.2GPI与RF的相关性分析：在120例RA患者中，GPI与RF检测均为阳性的61例，均为阴性的12例，二者检测一致率为60.8%，经Kendall′sTau-b相关分析检验计算其相关系数，r=0.533,P<0.01,且显著相关，（见表3）
GPI与RF的相关分析(表3)
两者相关比较：aP<0.01
3.讨论
3.1葡萄糖-6-磷酸异构酶(Glucose-6-phosphateIsomeras，GPI)广泛存在于各种细胞胞质内，其主要功能是催化葡萄糖-6-磷酸与果糖-6-磷酸之间的转化，在糖酵解和糖异生中起着非常重要的作用，并可作为一种细胞因子或生长因子分泌于细胞外，诱导髓样干细胞向单核细胞以及B细胞向成熟抗体分泌细胞的转化[6]。近年来，人们逐渐认识到GPI是一种自身抗原，与自身免疫性疾病，尤其是RA关系密切[7,8]。Kasbahs等[3]在RA患者的的血清和关节液中发现高浓度的GPI及其免疫复合物，并认为GPI是通过内皮细胞或者滑膜液中的可溶性蛋白递呈给免疫系统，抗GPI抗体在RA病理过程中起着重要作用。GPI是一种在所有细胞广泛表达的抗原，Kouskoff等[4]研究发现K/BxN小鼠模型中GPI抗原作为一种自身抗原诱导T淋巴细胞和B淋巴细胞产生抗GPI自身抗体，被动转移抗GPI抗体可引起接种动物的关节炎。Schaller等[1]认为GPI抗原是RA的一种自身抗原，存在于大部分RA患者中。在后来的研究中[5]，通过检测RA血清和关节液GPI浓度发现，与非免疫性炎症关节炎或健康对照组相比，免疫性炎症关节炎患者血清和关节液内都发现了极高的GPI酶活性和浓度，并提出GPI抗原是RA的一种自身抗原，可能作为诊断RA的一种新的指标。鲍春德等[7]就GPI抗原对RA患者是否有临床意义进行了初步的临床观察，认为血清中GPI抗原升高在部分RA患者有一定的特异性，而且与关节炎症状有一定相关性。何东仪等[9]研究发现在多种自身免疫性疾病中，RA病例的血清GPI升高最明显，检测血清GPI可作为RA的诊断指标，有较好的敏感性和特异性。
3.2本研究采用ELISA法检测120例RA患者血清，发现：GPI及RF检测的阳性率在RA组较高，且明显高于其他风湿病组和健康组。提出GPI和RF均是诊断RA的良好指标，二者敏感度分别是63.33%和77.50%，特异度分别是84.69%和85.71%，与文献报道一致[5,7,9]。
3.3本研究120例RA患者中，GPI与RF检测均为阳性的61例，均为阴性的12例，二者检测一致率为60.83%。经Kendall′sTau-b相关分析检验，二者呈显著相关(r=0.533，P<0.01)，此结果与董建玲等[10]的研究结果相一致。27例RF阴性患者中有15例GPI阳性(55.56%)，44例GPI阴性患者中有32例RF阳性(72.73%)，提示RF检测阴性的RA患者可通过同时检测GPI而得到弥补，避免因RF检测阴性而漏诊。GPI与RF联合检测特异性得到了提高（至95.42%）。
3.4通过研究显示，GPI对RA的诊断有较好的敏感度和特异度，能在一定程度上反应RA的疾病活动情况，对于判断预后有一定的指导意义，并可作为RA血清学诊断的有益补充。联合检测GPI和RF可以提高RA的诊断率，有较好的临床应用和研究价值。
参考文献
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[3]KassahnD,KolbC,SolmonS,etal.FewhumanautoimmuneseradetectGPI[J].NatImmumol,2002,3(5):411.
[4]KouskoffV,KorganowAS,DuchatelleV,etal.Organ-specificdiseaseprovokedbysystemicautoimmunity[J].Cell,1996,87(5):811.
[5]SchallerM,StohlW,BenoitV,etal.Patientswithinflammationarthriticdiseasesharborelevatedserumandsynovialfluidleveloffreeandimmune-complexedglucose-6-phosphatedisomerase(G6PI)[J].BiochemBiophyResCommun,2006,349(2):838.
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[7]鲍春德,叶萍,陈晓翔,等.血清中6-磷酸葡萄糖异构酶抗原在类风湿性关节炎中的意义探讨[J].中华风湿病学杂志,2005,9(5):277.
[8]卿之驹，贾凯，秦立新.葡萄糖-6-磷酸异构酶在类风湿性关节炎中的诊断意义[J].实用预防医学,2005,12(3):481-482.
[9]何东仪,钟丽民,沈杰,等.葡萄糖6-磷酸异构酶检测在类风湿关节炎中的意义[J].现代免疫学,2008,28(4):326.
[10]董建玲,杨南萍,张杰,等.葡萄糖-6-磷酸异构酶抗原对类风湿关节炎诊断的意义[J].中华风湿病学杂志,2009,13(4):263.