一、动物模型SAM小鼠及其在老年医学研究中的应用（论文文献综述）
朱国涛[1]（2021）在《从PI3K/AKT信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清对C2C12成肌细胞增殖及分化的机制》文中指出目的探讨龟鹿二仙胶含药血清通过调控PI3K/AKT信号通路影响下游指标caspase9干预C2C12成肌细胞增殖及分化的机制并探讨与细胞凋亡的相关性。方法（1）配制龟鹿二仙胶以制备含药血清。选用8月龄SPF级SD大鼠60只制备龟鹿二仙胶含药血清,雌雄各半,体质量360-400 g并分别进行同样剂量的龟鹿二线胶及生理盐水的灌胃,后进行腹主动脉采血经离心、灭活操作后得到含药血清及空白血清。（2）实验室培养成肌细胞C2C12并探索其生长曲线,在其对数生长期用不同浓度的含药血清进行干预,同时观测其增殖。（3）设置对照组,空白血清组及含药血清组干预后进行流式细胞仪检测细胞凋亡情况（4）诱导成肌肉细胞C2C12分化,待其分化后检测目标myod、myog及caspase9的m RNA表达和myod、myog、p-akt、caspase9蛋白的表达情况。结果（1）10%龟鹿二仙胶含药血清相比空白血清及普通组促进成肌细胞增殖,各组间数据具有统计学意义（P<0.01）（2）流式细胞仪结果显示10%含药血清对比普通组有效抑制细胞凋亡,但是和10%空白血清组相比,没有统计学意义。（3）RT-PCR结果显示,与普通组相比较,空白血清组myod m RNA表达降低（P<0.01）、myog及caspase9m RNA表达升高（P<0.01或P<0.05）,龟鹿二仙胶含药血清组myod、myog及caspase9m RNA明显升高（P<0.01或P<0.05）。与空白血清组比,龟鹿二仙胶含药血清组myod及myog m RNA表达较高（P<0.01）、caspase9 m RNA表达较低（P<0.01）。（4）WB结果显示,与普通组相比较,空白血清组及龟鹿二仙胶含药血清组myod、myog、p-akt蛋白表达升高（P<0.01或P<0.05）、caspase9蛋白表达降低（P<0.01或P<0.05）。与空白血清组比,龟鹿二仙胶含药血清组myod、myog、p-akt蛋白表达较高（P<0.01或P<0.05）、caspase9蛋白表达较低（P<0.05）。结论1.龟鹿二仙胶含药血清对小鼠成肌细胞有明显的促进增殖及分化作用;2.龟鹿二仙胶含药血清可能通过激活小鼠成肌细胞的PI3K/AKT通路,活化AKT的表达,进而抑制凋亡相关基因caspase 9的表达,减少成肌细胞凋亡,从而产生影响。
张雅丹[2]（2021）在《米糠提取物对模型小鼠学习记忆的改善作用及机理研究》文中认为阿尔茨海默症（Alzheimerdisease,AD）是一种在老年人中发病率较高的神经退行性疾病,其主要临床表现为学习、记忆能力的退化。AD的发病机制暂不明确,目前被广泛接受的β-淀粉样蛋白（Amyloid beta peptide,Aβ）假说认为Aβ错误折叠形成的毒性聚集物（如可溶性的寡聚体、纤维等）可以破坏神经细胞的细胞膜,诱导氧化应激、磷酸化Tau蛋白缠结等一系列发病级联,从而导致神经元凋亡,进而引发AD。本论文以稻谷加工过程中产生的副产物米糠为原材料,深入探究米糠乙醇提取物（Rice Bran Ethanol Extract,RBEE）、米糠油（Rice bran oil,RBO）和对羟基肉桂酸（p-Hydroxycinnamic Acid,p-HCA）对 D-半乳糖（D-Galactose,D-gal）模型小鼠学习、记忆能力的改善作用及其对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用。本论文的主要研究内容如下:1、通过定位航行、空间探索和新物体识别实验发现RBEE具有改善小鼠空间学习、记忆和新物体识别能力的作用;通过免疫组化实验发现RBEE可以降低小鼠脑组织海马区中AD病发的标志物Aβ、Tau的表达量,并降低胶质纤维酸性蛋白（Glial Fibrillary Acidic Protein,GFAP）的阳性表达;通过免疫印迹（Western blotting,WB）实验发现,RBEE可以通过上调p-AKT和下调Tau、糖基化晚期终产物受体（Receptor for Advanced Glycation Endproducts,RAGE）、β-分泌酶（Beta-site APP cleaving enzyme I,Bace-1）、GFAP 和凋亡介质 Caspase-3（cleaved）的表达来减轻D-gal诱导的学习、记忆障碍,达到神经保护的作用,起到缓解AD的功能。同时,为了探究RBEE对Aβ（1-42）毒性聚集物的影响,首先通过噻唑蓝（3-（4,5-Dimethyl-2-Thiazolyl）-2,5-Diphenyl Tetrazolium Bromide,MTT）实验,证明RBEE可以抑制Aβ（1-42）诱导的神经细胞SH-SY5Y的凋亡,具有一定的神经保护作用;通过硫黄素T（Thioflavin T,ThT）和原子力显微镜（Atomic Force Microscope,AFM）实验发现,RBEE 可以抑制 Aβ（1-42）的聚集。因此RBEE可能是通过激活AKT,使得p-AKT的表达上调,导致其下游底物糖原合酶激酶-3β（Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）的磷酸化水平提高,从而降低了 GSK-3β的活性,使得Tau蛋白的磷酸化水平降低,通过下调RAGE、Bace-1和GFAP使得Aβ毒性聚集物的减少,从而减少凋亡介质Caspase-3（cleaved）的表达,多靶点多角度协同作用,从而改善模型小鼠的学习、记忆能力。最后,利用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱的方法分析RBEE,分析出可能含有的化学物质有1040个,我们对其进行筛选后,选出了一种可能具有抑制AD的活性成分—对羟基肉桂酸,对其抑制Aβ（1-42）诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡作用进行研究。2、通过对小鼠进行定位航行、空间探索和新物体识别实验,结果发现RBO具有改善小鼠空间学习、记忆和新物体识别能力的功能;通过对小鼠海马区脑切片进行免疫组化实验,结果发现RBO可以降低AD发病的标志物Aβ、Tau的表达量并降低GFAP的阳性表达;通过WB实验发现RBO对于小鼠空间学习、记忆和新物体识别能力的改善可能与其下调脑组织中海马区的RAGE、Bace-1、GFAP、Tau和凋亡介质Caspase-3（cleaved）的表达有关。因此,RBO可能是通过下调RAGE和GFAP使得Tau蛋白的磷酸化水平降低,下调RAGE、GFAP和Bace-1使得Aβ毒性聚集物的减少,从而改善小鼠的学习记忆功能。最后,我们对RBO进行了气相色谱-飞行时间质谱实验,分析出其可能包含88种化学物质,我们对这些物质进行筛选后,选出了一种可能具有抗AD活性的成分—对羟基肉桂酸,对其抑制Aβ（1-42）诱导的SH-SY5Y细胞的凋亡作用进行后续验证。3、选取由RBEE及RBO中筛选出的单体p-HCA进行实验,主要验证其对Aβ（1-42）诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用。首先利用超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱实验,对p-HCA在RBEE及RBO中的含量进行定量,结果证明,RBEE和RBO中均含有p-HCA,且其含量分别为664.09 ng/g和13943.46 ng/L;通过MTT实验,发现p-HCA对Aβ（1-42）诱导的SH-SY5Y细胞凋亡具有抑制作用;通过WB实验发现,p-HCA可以下调p-p38和Caspase-3（cleaved）的表达而起到抑制Aβ（1-42）诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的作用;通过ThT和AFM实验发现,p-HCA对Aβ（1-42）的聚集也具有一定的阻断作用,因此,p-HCA可能是通过抑制Aβ（1-42）毒性聚集物的产生,从而发挥其对神经细胞的保护作用。综上所述,本论文主要研究了三种米糠提取物对D-半乳糖模型小鼠学习、记忆能力的改善作用以及对Aβ诱导的SH-SY5Y细胞凋亡的抑制作用,并初步探讨其机理,以期为AD的研究提供方向,并为米糠相关产品的开发提供依据。
张经纬[3]（2020）在《基于功能磁共振成像对快速老化模型小鼠功能连接的研究》文中提出阿尔茨海默病是一种复杂的神经系统退行性疾病,其病因尚不清楚,快速老化模型小鼠作为阿尔茨海默病的主要研究模型,在行为学和神经病理学方面已得到广泛研究。然而,目前仍然缺乏对快速老化模型小鼠脑功能连接模式方面的研究。本研究的目的是（1）基于功能磁共振成像技术研究快速老化模型小鼠海马亚区功能连接的分布模式和变化模式,（2）随着疾病进展,快速老化模型小鼠海马亚区功能连接的变化规律,（3）结合行为学实验和蛋白含量检测,研究功能连接-行为、功能连接-蛋白之间的关系。本课题采集不同月龄（3-6、9-12、15-18月龄）快速老化模型小鼠和其对照组抗快速老化模型小鼠的静息态功能性磁共振成像数据,利用功能连接分析方法,得到两组小鼠左、右侧CA1亚区和左、右侧CA3/DG亚区的功能连接。首先对不同月龄的两组小鼠海马亚区功能连接分别进行组内单样本t检验,并对其分别进行单因素（月龄）方差分析,比较月龄分别对两组小鼠海马亚区功能连接的影响;对两组小鼠进行穿梭箱实验以及用ELISA试剂盒检测海马中与记忆相关蛋白的含量;并对同月龄的两组小鼠进行双因素（疾病×半球）方差分析,研究疾病和半球的交互效应。首先我们得到两组小鼠海马亚区功能连接随月龄变化的分布模式;然后我们发现在3-6月龄阶段,相对于对照组,快速老化模型小鼠右侧CA3/DG亚区和前扣带回/前额叶之间的功能连接显着下降;随着月龄的增加,快速老化模型小鼠与其同龄的对照组右侧CA3/DG亚区和前扣带回/前额叶之间功能连接的差异逐渐缩小。月龄对对照组行为学指标、蛋白水平的影响极其显着,且对照组小鼠右侧CA3/DG亚区与前扣带回/前额叶之间的功能连接与行为学指标、蛋白水平具有显着相关性,而这种相关性在快速老化模型小鼠上并不存在。综上本文首次发现了快速老化模型小鼠海马亚区功能连接模式的分布异常,以及其随疾病进展的变化规律,并将海马亚区功能连接与学习记忆行为实验和记忆相关蛋白结合,揭示两组小鼠功能连接与行为学指标、蛋白含量之间的关系。本研究不仅为理解阿尔茨海默病疾病进程的病理生理机制提供新的视角,而且为阿尔茨海默病的早期临床诊断和疾病进程监控提供新的手段。
王慧婵[4]（2020）在《龟龄集对AD认知功能的疗效评价及突触和髓鞘相关作用研究》文中进行了进一步梳理阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是痴呆最常见的类型,全球患病人数呈现迅速增长,给社会和家庭带来沉重的经济负担。但目前现代医学对AD的治疗效果并不理想。然而,中药复方具有多种活性成分,其治疗AD具有多途径、多靶点、协同增效的特点,可发挥整体调节的作用。龟龄集是补肾抗衰老复方,探索其在AD中的作用及可能的机制具有重要的应用价值。目的:评价龟龄集治疗AD的临床疗效,探讨龟龄集对SAMP8小鼠学习记忆能力和突触髓鞘相关蛋白表达的影响,为龟龄集治疗AD的临床应用提供科学依据。方法:1临床研究:采用随机、双盲、对照试验,一共纳入AD肾虚髓减型患者60例,随机分为试验组和对照组,试验组给予龟龄集胶囊治疗,对照组给予银杏叶片治疗,疗程24周。观察治疗前后患者的ADAS-cog、MMSE、ADL和中医证候积分变化情况和安全性。2实验研究:64只SPF级SAMP8小鼠随机分为模型组（Model）、龟龄集低剂量组（GLJ-L）、龟龄集高剂量组（GLJ-H）和银杏叶组（YXY）,以SAMR1为正常对照（Control）,每组16只。GLJ-L、GLJ-H、YXY组分别给予龟龄集低剂量、龟龄集高剂量和银杏叶片,模型与对照组给予等体积蒸馏水,灌胃12周。通过新物体识别和Morris水迷宫实验,观察药物干预对SAMP8小鼠认知能力的影响;HE染色和尼氏染色观察脑组织病理形态和尼氏小体数量变化;Western blot和荧光定量PCR分别检测海马组织GAP43、SYP、MBP、BDNF、TrkB 蛋白和 mRNA 表达水平。结果:1临床研究结果:（1）神经心理测评量表评分变化:与治疗前比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组ADAS-cog评分均明显下降（P<0.01或P<0.05）,组间比较,治疗12周和治疗24周,两组ADAS-cog评分无统计学差异（P>0.05）。与治疗前比,治疗12周和治疗24周试验组和对照组MMSE评分均明显上升（P<0.01）,组间比较,治疗12周和治疗24周两组MMSE评分无统计学差异（P>0.05）。（2）日常生活能力得分变化:与治疗前比,试验组和对照组ADL量表积分未见明显变化（P>0.05）。（3）中医证候积分变化,与治疗前比,治疗24周后试验组和对照组积分明显下降（P<0.01）,试验组中腰膝酸软、倦怠思卧有效率明显高于对照组（P<0.01）。试验组中医证候总有效率为59.26%,对照组总有效率为19.05%,差异有统计学意义（P<0.01）。（4）安全性评价:两组患者在治疗期间未出现严重不良反应,治疗期间两组患者血、尿常规、肝（ALT、AST）肾（UREA、CRE）功能、心电图未见明显异常变化。2实验研究结果:（1）龟龄集对SAMP8小鼠识别记忆能力的影响与对照组比,模型组SAMP8小鼠辨别指数有下降趋势,差异无统计学意义（P>0.05）;与模型组比,GLJ-L、GLJ-H和YXY组SAMP8小鼠辨别指数有升高趋势,无统计学意义（P>0.05）。（2）龟龄集对SAMP8小鼠空间学习记忆力的影响定位航行训练结果显示:各组小鼠潜伏期随训练天数逐渐缩短。与对照组比,模型组逃避潜伏期明显延长（P<0.01）。与模型组比,GLJ-L、GLJ-H组和YXY组潜伏期明显缩短（P<0.01）。组内比较,与第一天潜伏期比较,对照组、GLJ-L、GLJ-H组第3天表现出明显的学习能力,潜伏期短于第一天（P<0.05,P<0.05,P<0.01）,但GLJ-L、GLJ-H组潜伏期长于对照组;YXY组小鼠学习能力改善出现在第2天（P<0.05）,潜伏期长于对照组。同一天内,与对照组比,模型组潜伏期均较长（P<0.05,P<0.01）。与模型组比,GLJ-H和YXY组潜伏期第2-5明显缩短（P<0.01）,GLJ-L组潜伏期第5天明显缩短（P<0.05）。空间探索结果显示:与对照组比,模型组穿台次数、在目标象限停留时间比和目标象限游泳路程比均明显减少（P<0.01,P<0.01,P<0.05）。与模型组比,GLJ-L和GLJ-H组穿台次数增加有统计学意义（P<0.05）;GLJ-L、GLJ-H和YXY组目标象限游泳时间比增加有统计学意义（P<0.05）;GLJ-H组目标象限游泳路程比增加有统计学意义（P<0.01）。（3）龟龄集对SAMP8小鼠海马病理形态的影响对照组小鼠海马CA1区细胞排列紧密、整齐有序,形态规则,轮廓清晰,层次明显,核仁清晰,尼氏小体数量较多。模型组海马CA1区细胞数量减少、排列无序,轮廓不清,核固缩或消失,尼氏小体数量明显减少。与模型组相比,YXY、GLJ-L、GLJ-H组小鼠海马CA1区病理形态得到改善,细胞排列有层次而紧密,细胞数量和层数增加,尼氏小体数量较多。（4）龟龄集对SAMP8小鼠突触、髓鞘相关蛋白的表达的影响与对照组比,模型组GAP43、MBP的蛋白和mRNA表达水平下降（P<0.01）,SYP mRNA表达水平明显下降（P<0.01）。GLJ-L、GLJ-H组GAP43、MBP的蛋白和mRNA表达显着增加（P<0.05或P<0.01）、SYP mRNA表达水平也明显升高（P<0.01）。（5）龟龄集对BDNF/TrkB信号通路的影响与对照组比,模型组BDNF蛋白和mRNA表达水平显着降低（P<0.01）。TrkB蛋白表达量降低无统计学意义（P>0.05）。与模型组比,GLJ-H组BDNF、TrkB蛋白表达水平显着升高（P<0.01,P<0.05）,mRNA表达量也显着升高（P<0.01）。结论:1临床研究结论:龟龄集可以降低轻中度AD患者的ADAS-cog评分和中医证候积分,增加MMSE评分,改善认知功能,治疗期间无严重不良反应。2实验研究结论:龟龄集改善SAMP8小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与增加海马CA1区神经元数量,调节BDNF/TrkB信号通路,促进突触、髓鞘相关蛋白表达有关。
韩诚[5]（2019）在《从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退的脑功能失衡机制》文中研究指明目的:研究衰老状态下学习记忆功能减退在脑不同层次阴阳失衡的表现和发生机制,初步阐明地黄饮子对衰老模型小鼠海马突触可塑性的作用机制,为补肾健脑法提供现代生物学依据。方法:采用理论探讨与实验研究相结合的方法。1、理论探讨:系统梳理中医学和现代医学对衰老及学习认知的认识,探讨从肾论治衰老学习记忆功能减退的可能性。2、实验研究:（1）实验分组:设正常对照组、衰老模型组、地黄饮子（低、中、高剂量）组和盐酸美金刚阳性药物组共计6组。其中,以6月龄雄性SAMP8小鼠作为衰老动物模型,以同月龄雄性SAMR1小鼠为正常对照,其他各组采用同月龄雄性SAMP8小鼠并给予药物干预。（2）给药干预:各组动物正常饮食条件喂养至5月龄后,从第6个月开始地黄饮子（低、中、高剂量）组小鼠分别每天灌胃不同浓度的地黄饮子水煎液（7.51g/kg·d、15.02g/kg·d、30.04g/kg·d）,盐酸美金刚组小鼠灌胃盐酸美金刚混悬液（3.03mg/kg·d）,正常对照组和衰老模型组动物小鼠灌胃等量溶媒。各组动物每天灌胃给药1次,连续1个月后,进行如下指标检测。（3）学习记忆能力评价:采用Morris水迷宫和新物体识别实验方法评价各组小鼠的空间学习能力、空间参考记忆力和新物体识别能力。（4）突触结构可塑性检测:采用透射电镜技术观察各组小鼠神经元和突触结构的形态变化。（5）突触功能可塑性检测:对各组小鼠海马内“schaffer侧枝-CA1区”突触回路进行在体场电位记录实验,观察LTP和LTD现象,评价突触传递效率。（6）海马神经递质检测:采用酶联免疫吸附实验方法检测各组小鼠海马组织谷氨酸和γ-氨基丁酸含量的差异。（7）谷氨酸受体和钙调素依赖性蛋白激酶II的检测:采用蛋白免疫印迹法检测各组小鼠海马组织AMPAR2、NMDAR1、pNMDAR1、NMDA2A、pNMDA2A、NMDA2B、pNMDA2B、CaMKII、pCaMKII共9个蛋白的含量和磷酸化水平。结果:1.理论研究结果:基于“肾脑相关”理论,从经络联系、精髓关系、元神、肾志与脑神的关系,以及阴阳变化5个方面探讨了从肾论治衰老学习记忆功能减退的可能性;并且基于阴阳学说理论,认为现代脑科学相关研究成果都是阴阳之象,是对中医阴阳理论的丰富和扩展,用阴阳的思维模式去认识脑具有可行性。2.实验研究结果:（1）行为学检测结果:Morris水迷宫检测结果显示,与正常对照组相比较,衰老模型组小鼠空间学习记忆能力显着下降（P<0.05）;与衰老模型组相比,地黄饮子高剂量可以有效提升小鼠空间辨识和记忆提取能力,减少空间搜索时间（P<0.05）;新物体识别显示,与正常对照组相比较,衰老模型组小鼠记忆力受损（P<0.05）;与衰老模型组相比,地黄饮子高、中剂量均能使小鼠准确区分被更换的物体（P<0.05）,并增加其对新物体辨识的时间（P<0.01）。（2）在体场电位记录结果:快速老化的SAMP8小鼠的兴奋性突触后电位经过200Hz的高频刺激后增幅不明显,LTP效应明显低于相同月龄的抗老化SAMR1小鼠（P<0.001）,给予地黄饮子治疗后,则可以有效增强模型小鼠的LTP效应（P<0.05）。而在2Hz的低频刺激下,各组小鼠LTD的易化效应和EPSP的抑制程度具有明显的差异。与6月龄的快速老化SAMP8小鼠相比,相同月龄的抗老化SAMR1小鼠LTD效应仅在低频刺激后的小段时间内受到强化,随着时间流逝,其LTD易化现象逐渐恢复,突触后的兴奋性电位逐渐恢复正常（P<0.001）;给予地黄饮子治疗后,地黄饮子高剂量组小鼠的LTD效应也得到一定程度的恢复（P<0.05）。（3）透射电镜检测结果:通过透射电镜我们可以观察到,模型组小鼠的海马CA1区神经元细胞损伤、突触间隙增大或消失,突触前、后膜不清晰,突触小泡减少,突触后致密物质变薄;线粒体结构崩解,嵴断裂或溶解。给予地黄饮子灌胃治疗后,神经元细胞器损伤减少,突触结构得到修复。（4）ELISA检测结果:衰老模型组小鼠海马内Glu与GABA含量显着增加（P<0.001）,经过药物治疗后,各组小鼠海马内Glu与GABA含量均有所降低,尤其是地黄饮子高剂量组的Glu与GABA含量降低最明显（P<0.01）。（5）WB检测结果:SAMP8模型小鼠海马内AMPAR2、NMDAR1和NMDA2B的含量升高（P<0.05）,CaMKII含量降低（P<0.05）,pNMDAR1、pNMDA2A和pNMDA2B的含量增高（P<0.05）,pCaMKII含量降低（P<0.05）。运用地黄饮子治疗后,中剂量地黄饮子可以有效降低NMDAR1的蛋白含量（P<0.01）;高剂量地黄饮子可以有效增加CaMKII的蛋白含量和磷酸化程度（P<0.05）,降低AMPAR2、NMDA2B和pNMDA2B的异常表达（P<0.05）。结论:1.海马组织Glu和GABA含量增高、代谢失衡与衰老状态小鼠学习记忆功能减退有关;2.海马“schaffer侧枝-CA1区”突触回路的LTP/LTD效应失衡是衰老状态下学习记忆功能减退的脑电生理层面阴阳失衡的机制;3.海马神经细胞内钙离子超载是衰老状态下脑电生理和氨基酸神经递质层面阴阳失衡的关键因素。4.补肾方剂地黄饮子可通过调节神经细胞内钙离子浓度,抑制钙内流而易化神经突触可塑性,从而改善衰老小鼠的学习记忆功能。
夏玉英[6]（2018）在《裸花紫珠对认知障碍的干预作用及机制研究》文中提出南药“裸花紫珠”为马鞭草科植物裸花紫珠（Callicarpa nudiflora Hook.et Arn.）的干燥叶,在中国南方特别是岭南地区广泛用于抗炎和止血。现代药理研究表明,裸花紫珠主要药效成分类群——苯乙醇苷类成分（phenylethanoid glycosides,Ph Gs）,具有神经保护、抗炎、抗氧化等活性,部分Ph Gs可穿过血脑屏障靶向分布于脑组织中,从而表现出良好的改善认知障碍活性。在大量文献报道的基础上,同时结合本实验室前期研究,发现异毛蕊花糖苷是多种苯乙醇苷类成分在体内的重要代谢产物,且在裸花紫珠提取物中含量较高,提示其可能是裸花紫珠的主要活性成分和体内重要存在形式,但对异毛蕊花糖苷的药理活性及作用机制报道较少。因此,本实验将从抗炎、抗氧化方面探究裸花紫珠提取物（CNEs）改善认知障碍的作用及其机制,并通过异毛蕊花糖苷对快速老化（SAM）小鼠认知障碍的改善作用,初步阐述裸花紫珠抗老年痴呆的药效物质。目的:评价裸花紫珠对认知障碍的改善作用及其机制,并初步阐明其药效物质基础。方法:1. 采用大鼠双侧海马注射Aβ制备大鼠认知障碍模型,灌胃给予CNEs高、中、低剂量（300,150,75 mg/kg）。Morris水迷宫行为学测试检测大鼠的空间探索和定位航行能力;化学法或Elisa法检测血清或海马组织中ROS、SOD、MDA、Ach E、TNF-α、IL-1β和TGF-β1的水平;脑组织石蜡切片HE染色观察海马组织病理变化和透射电镜观察海马CA1区神经细胞超微结构的变化。采用Western blot、RT-q PCR法检测海马内Aβ1-42和RAGE的蛋白、基因表达;Western blot检测海马内NF-κBp65、p-NF-κBp65、IκBα、p-IκBα和TNF-α的蛋白表达以及NF-κBp65的核转位情况;RT-q PCR法检测大鼠海马内NF-κBp65、IκBα和TNF-α的基因表达以及免疫组化法检测海马内NF-κBp65和IκBα的蛋白表达;Western blot和RT-q PCR法检测大鼠海马内NADPH酶的膜亚基gp91phox、胞浆亚基p47phox和i NOS的蛋白和基因表达水平。从NF-κB炎症信号通路和NADPH氧化应激信号通路探究CNEs改善认知障碍作用的作用机制。2.采用具备稳定老化特征的快速老化（SAM）小鼠,研究异毛蕊花糖苷改善认知障碍作用及其机制,并阐明裸花紫珠改善认知障碍作用的药效成分。灌胃给予SAM小鼠异毛蕊花糖苷高、中、低剂量（200,100,50 mg/kg）。Morris水迷宫行为学测试检测SAM小鼠的空间探索和定位航行能力;化学法或Elisa法检测SAM小鼠血清或海马组织中ROS、SOD、MDA、Ach E、TNF-α、IL-1β和TGF-β1的水平;脑组织石蜡切片HE染色观察海马组织病理变化和透射电镜观察海马CA1区神经细胞超微结构的变化。采用Western blot、RT-q PCR法检测海马内Aβ1-42和RAGE的蛋白、基因表达;Western blot检测海马内NF-κBp65、p-NF-κBp65、IκBα、p-IκBα和TNF-α的蛋白表达以及NF-κBp65的核转位情况,RT-q PCR法检测海马内NF-κBp65、IκBα和TNF-α的基因表达以及免疫组化法检测NF-κBp65和IκBα的蛋白表达;Western blot和RT-q PCR法检测海马内gp91phox、p47phox和i NOS的蛋白和基因表达水平。成果:1.Morris水迷宫行为学测试表明CNEs可以明显改善模型大鼠的认知障碍。血清和海马组织中炎症因子和氧化因子水平测试结果显示,CNEs可以显着降低模型大鼠海马组织中ROS的水平、血清和海马组织中MDA、Ach E、TNF-α和IL-1β的水平,显着增加血清和海马组织中SOD活性和TGF-β1的水平,从而表现出抗炎、抗氧化作用。此外,通过对HE染色的脑组织病理切片和海马CA1区超微结构的观察发现,CNEs亦可以明显减轻海马组织及神经细胞的损伤。2. CNEs可以明显降低Aβ1-42和RAGE的蛋白或基因的表达,减缓Aβ在大鼠海马组织内的蓄积。显着降低NF-κBp65、p-NF-κBp65、p-IκBα和TNF-α的蛋白或基因的表达,提高IκBα蛋白和基因的表达,抑制NF-κBp65的核转位,从而抑制NF-κB炎症信号通路的激活。降低gp91phox、p47phox和i NOS的蛋白和基因表达水平,一方面可以抑制NADPH-ROS氧化应激信号通路的激活,另一方面可以减轻ROS对NF-κB炎症信号通路的激活。上述结果表明,CNEs可以显着减缓大鼠海马内Aβ的蓄积、炎症反应和氧化应激反应,从而减轻神经元的损伤。3. SAM小鼠行为学实验结果表明异毛蕊花糖苷具有显着改善认知障碍的作用。从血清和海马组织中炎症因子和氧化因子测定结果,提示异毛蕊花糖苷具有显着抗炎和抗氧化活性。同时,从HE染色的脑组织病理切片和海马CA1区超微结构的观察发现,异毛蕊花糖苷可以减轻海马组织及神经细胞的损伤。4. 异毛蕊花糖苷可以显着降低SAMP8小鼠海马内Aβ1-42和RAGE的蛋白或基因的表达,抑制NF-κB炎症信号通路和NADPH-ROS氧化应激信号通路的激活。异毛蕊花糖苷是多种苯乙醇苷类成分在体内的重要代谢产物,且在裸花紫珠中的含量较高,提示裸花紫珠改善认知障碍的作用可能是通过以异毛蕊花糖苷为代表的苯乙醇苷类成分抗炎、抗氧化起效的。结论:裸花紫珠可通过减轻海马内炎症反应和氧化应激反应,抵抗海马神经元损伤发挥改善认知障碍作用。裸花紫珠改善认知障碍作用的药效物质是以异毛蕊花糖苷为代表的苯乙醇苷类成分。
罗纳川[7]（2018）在《补肾益智方提取物对AD模型小鼠学习记忆和突触蛋白表达的影响》文中提出目的:探讨补肾益智方提取物（BSYZ）对阿尔兹海默病（AD）模型小鼠学习记忆及脑内突触蛋白突触素（SYN）、突触后致密蛋白95（PSD95）和突触后致密蛋白93（PSD93）表达的影响。方法:1.选用7月龄清洁级雄性快速老化亚系SAMP8小鼠61只,随机分为模型组、阳性药组、BSYZ低剂量组、BSYZ中剂量组、BSYZ高剂量组,使用相月龄雄性抗快速老化亚系SAMR1小鼠13只作为对照组。2.BSYZ低、中、高剂量每天给药剂量分别为2.92g/kg、5.84g/kg、11.68g/kg。阳性对照药组按每天3mg/kg给药;对照组和模型组给予等量体积蒸馏水灌胃,每天1次,给药共4周。3.检测指标（1）用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力（2）用Western blotting法检测小鼠脑内突触蛋白的表达量（3）用HE染色法检测小鼠海马CAl区形态结果:（1）Morris水迷宫结果提示:与对照组比较,模型组AD小鼠逃避潜伏期时间延长,与模型组比较,补肾益智方提取物中剂量组小鼠逃避潜伏期时间缩短。（2）Western blotting结果提示:与对照组比较,模型组脑组织SYN、PSD95及PSD93蛋白水平下降,与模型组比较,各治疗组脑组织SYN、PSD95及PSD93蛋白水平不同程度提高。（3）HE染色结果提示:与对照组比较,模型组脑组织海马区神经元损伤较为明显,与模型组比较,各治疗组海马区神经元损伤情况有所改善。结论:（1）补肾益智方提取物能改善AD模型小鼠学习记忆能力。（2）补肾益智方提取物能提高AD模型小鼠脑内SYN、PSD95、PSD93蛋白水平。（3）补肾益智方提取物能改善AD模型小鼠海马区神经元损伤。
黄飞娟,程德金,吴正治,秦鉴[8]（2017）在《阿尔茨海默病病理鼠模型研究进展》文中研究说明阿尔茨海默病（AD）是一种以智能减退为主要特征的中枢神经系统疾病。AD危害极大,但病因复杂,病理不明,治疗方法不足。合适的AD鼠模型不仅能为富有科学价值的研究提供良好的实验研究材料,对于明确AD的病因、发病机制及在此基础上探索AD的预防、诊断及治疗等各方面也均发挥关键的作用。根据AD发病机制的假说:脑衰老、β淀粉样蛋白神经毒性学说、Tau蛋白异常磷酸化学说、铝中毒学说、胆碱能障碍学说及遗传基因突变学说等,AD鼠模型经历了从单一假说基础上的单一因素到多假说多因素造模的发展。AD模型鼠的发展为AD病理和诊治研究提供了研究的手段和途径。
秦卓[9]（2016）在《电针三阴交对雌性痴呆模型小鼠HPO轴影响的实验研究》文中研究说明随着全球人口老龄化的不断发展,阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease,AD）的发病率在逐年升高,年龄一直是AD发病的首要影响因素,但是近年来有学者发现,女性阿尔茨海默病的患病率远高于男性,且女性患AD的原因主要与围绝经期女性卵巢功能下降所导致的下丘脑垂体卵巢轴（hypothalamus-pituitary-ovary axis,HPOA）相关激素水平紊乱相关。从更年期与AD发病时间关系分析,AD拥有漫长的潜伏期,一般为几年,有的甚至可达几十年,而这段时间恰恰与更年期综合征发病的时间相吻合。三阴交穴为足三阴之交会,属足太阴脾经,是治疗妇科疾病之要穴,亦是临床治疗围绝经期综合征的常用穴位。实验研究表明电针三阴交对围绝经期动物模型的HPO轴相关激素水平具有良性的调节作用。所以揭示电针三阴交对AD的影响及其作用机制的前提在于观察电针三阴交是否可以对雌性痴呆模型小鼠HPO轴起到良性调节作用。本实验选择具有更年期综合征与AD病理特点的9月龄SAMP8雌性小鼠为实验对象,通过电针三阴交（SP6）,观察其对9月龄SAMP8雌性小鼠HPO轴的调节作用。方法：选用9月龄月龄的SAMP8雌性小鼠16只,随机分为模型组和电针组各8只,选用SAMR1小鼠8只,作为空白对照组。采用Morris水迷宫定位航行实验比较模型组与空白对照组的潜伏期差异。电针组选去两侧三阴交穴做电针,每次20分钟,隔日一次,共治疗15次,观察各组小鼠的精神状况、毛发色泽及排便情况。每组随机选取6只小鼠取材,采用酶联免疫吸附法,采用酶联免疫吸附法,测定各组小鼠下丘脑中促性腺激素释放激素（GnRH）,垂体中卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）和卵巢中雌二醇（E2）的含量,并用SPSS20.0统计软件进行统计学处理。结果：1、一般情况1)精神状况：在清醒状态下,空白对照组小鼠精神饱满,反应敏捷；模型组小鼠则出现精神萎靡,神情呆滞,反应迟钝,活动减少；电针组表现较模型组轻。2)皮毛色泽：空白对照组毛色白而光亮。模型组毛色发黄暗淡,有不同程度脱毛。电针组毛色发黄但光泽尚可,亦有脱毛,但后期脱毛现象缓解。3)便质：空白对照组便质可。模型组便质较干硬。电针组便质较软。2、Morris水迷宫实验第一天到第五天模型组逃避潜伏期都高于空白对照组,且存在显着性差异（P<0.01）。3、对下丘脑垂体卵巢轴及卵巢重量的影响1)与空白对照组相比,模型组E2水平显着降低（P<0.05）, FSH、LH、GnRH水平均显着升高（P<0.05）,卵巢重量明显降低（P<0.01）。2)与模型组相比,电针组E2水平显着升高（P<0.05）, FSH、LH、GnRH水平均显着降低（P<0.05）,卵巢重量明显升高（P<0.05）。结论：1、Morris水迷宫提示造模成功,电针三阴交可缓解SAMP8雌性小鼠精神萎靡,神情呆滞的表现,改善毛发色泽、便质及其生长情况。2、电针三阴交能够有效提高SAMP8雌性小鼠卵巢重量及卵巢中雌激素的水平,抑制亢进的下丘脑和垂体激素分泌,对SAMP8雌性小鼠紊乱的HPO轴及卵巢功能可以起到良性调节作用。
邱守涛[10]（2015）在《不同强度耐力训练对SAMP6小鼠AMPK/Sirt1信号轴及骨骼肌质量的影响》文中认为Sarcopenia,即骨骼肌衰减,指随年龄增加机体骨骼肌质量、力量及功能逐渐下降的现象,它的发生增加了老年人的健康维护成本,给其家庭及社会带来沉重的经济负担。Sarcopenia的病理生理过程非常复杂,涉及细胞凋亡、氧化应激、蛋白质合成减少、骨骼肌废用、炎症反应、线粒体功能障碍等,并与骨骼肌质量控制（蛋白质质量控制和肌纤维数目控制）失衡密切相关。AMPK、Sirt1是体内重要的能量代谢感受器,可感知机体的能量代谢状态,通过改变下游分子的基因表达或活性调节机体能量代谢过程。AMPK/Sirt1信号轴通过对细胞自噬、细胞凋亡、细胞增殖与分化、骨骼肌蛋白合成与降解、炎症反应等过程的调控影响骨骼肌质量与功能,可能与机体衰老过程中Sarcopenia的发生、发展及转归密切相关。研究表明,运动可促进骨骼肌蛋白质合成、增加机体的瘦体重,达到预防和治疗Sarcopenia的目的,但运动所引起的AMPK/Sirt1信号轴及其调控的下游细胞事件的适应性改变与Sarcopenia的内在联系尚不明确,不同耐力训练方案对骨骼肌质量的重塑效果尚待进一步研究。本研究通过对AMPK/Sirt1信号轴与骨骼肌蛋白合成、降解（细胞自噬、泛素-蛋白酶体途径）和细胞凋亡等信号通路的关系及其运动调控展开研究,以期深入了解运动、AMPK/Sirt1信号轴与Sarcopenia的内在关系,旨为Sarcopenia的运动防治提供新思路。目的：探究不同方案耐力训练对SAMP6快速老化小鼠AMPK/Sirt1信号轴及与其相关的下游骨骼肌质量控制机制的影响。首先,通过与SAMR1小鼠对比,探讨SAMP6快速老化小鼠衰老进程中AMPK/Sirt1信号轴及与其相关的下游骨骼肌质量控制机制（包括蛋白合成、细胞自噬、泛素-蛋白酶体系统、细胞凋亡等）的变化,并分别观察了SAMP6小鼠骨骼肌衰减的性别特征与时相差异,以期为揭示机体衰老过程中Sarcopeinia发生、发展及转归的内在分子机制提供新思路；其次,设计不同训练持续时间、不同强度的跑台耐力训练方案对SAMP6小鼠进行运动干预,观察其骨骼朋AMPK/Sirt1信号轴及与其相关的下游骨骼肌质量控制机制的适应性变化,旨为骨骼肌衰减的运动防治提供数据支持；此外,鉴于细胞自噬在骨骼肌质量控制中的重要作用,本研究采用AMPK及Sirtl相应的激动剂AICAR及RSV,利用细胞模型验证AMPK/Sirtl信号轴与细胞自噬的上、下游调控机制。方法：3月龄清洁级SAMP6快速老化小鼠88只（P组）,SAMR1小鼠20只作为青年对照组（R组）,雌（m）雄（f）各半,按体重分层分为两个大组,即1组（运动组进行为期1个月的耐力训练）和2组（运动组进行为期2个月的耐力训练）,其中每个大组又各自分为青年对照组（Rlm组,n=5；R1f组,n=5；R2m组,n=5；R2f组,n=5）、快速老化安静对照组（Plm组,n=5；P1f组,n=5；P2m组,n=5；P2f组,n=5）、高强度耐力训练组（Hlm组,n=6；H1f组,11=6；H2m组,n=6；H2f组,n=6）、中强度耐力训练组（Mlm组,n=5；M1f组,n=5；M2m组,n=6；M2f组,n=6）和低强度耐力训练组（Llm组,n=5；L1f组,n=5；L2m组,n=6；L2f组,n=6）。自然光照,正常摄食、饮水。运动组根据各自运动方案进行跑台耐力训练,高、中、低强度相应跑台速度分别为28、18、8m/min,坡度为5。,持续50min,每周运动6天,周日休息。1组、2组分别于干预4周、8周后颈椎脱臼处死、取样,具体检测指标如下：（1）衰老及耐力训练后小鼠骨骼肌体重及骨骼肌质量的变化：体重及骨骼肌湿重。（2）衰老及耐力训练后小鼠骨骼朋AMPK/Sirtl信号轴相关基因表达的变化：Real-time PCR （RT-PCR）技术检测AMPKα1、AMPKa2、NAMPT、SIRT mRNA相对含量；Western blot （WB）技术检测.AMPK、Sirtl总蛋白含量,检测p-AMPK、ac-p53蛋白含量反映AMPK/Sirtl信号轴的激活水平；Real-time PCR及Western blot技术检测AMPK/Sirt1信号轴上游激酶信号FYN、LKB1 mRNA表达及p-LKB1/LKB1比值。（3）衰老及耐力训练后小鼠骨骼肌蛋白合成的变化：Real-time PCR技术检测IGF-1、PI3K、PDK1、AKT、mTOR、GSK3β、4E-BP1、S6K1、MyOD、MSTN、 MHC1、MHC2A、MHC2B、 MHC2X mRNA相对含量；Western blot技术检测IGF-1、PI3K、AKT、MSTN、MHC1、MHC2a、p-Foxos蛋白含量；HE染色并采用IPP软件计算肌纤维横截面积。（4）衰老及耐力训练后小鼠骨骼肌细胞自噬水平的变化：Real-time PCR技术检测ULK1、BECN1、ATG7、LC3、ATG13、BNIP3、SQSMT1/P62、LAMP2 mRNA相对含量；Western blot技术检测p62蛋白含量及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值；复苏C2C12细胞系,诱导其分化为肌管细胞并采用.AMPK、Sirtl激动剂AICAR及RSV干预处理12h,免疫荧光技术观察LC3在肌管细胞的表达。（5）衰老及耐力训练后小鼠骨骼肌蛋白酶体系统的变化：Real-time PCR技术检测FOXO1、FOXO3a、UBC、PSMC、ATROGIN-1、MURF1 mRNA相对含量；Western blot技术检测Atrogin-1、MuRF1蛋白含量及p-Foxol/p-Foxo3a,总磷酸化水平。（6）衰老及耐力训练后小鼠骨骼肌细胞凋亡的变化：Real-time PCR技术检测P53、KU70、BAX、BCL-2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA相对含量；Western blot技术检测1p53、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白含量及Bcl-2/Bax比值。结果：（1）与相应的R组小鼠相比,P2m组小鼠骨骼肌质量指数呈下降趋势,且低于R2m组1SD；Plf、P2fN小鼠体重显着增加（P<0.01）,而骨骼肌质量指数均显着下降（P<0.05）,且低于青年对照组2SD。与相应的P组相比,H2m、M2m、L2m组小鼠体重显着降低（P<0.01）,骨骼肌质量指数呈增加趋势；H2f、M2f、L2f组小鼠体重无显着变化,骨骼肌质量显着增加（P<0.05）,且H组小鼠骨骼肌质量指数增加幅度最大。（2）与相应的R组小鼠相比,P组小鼠骨骼肌AMPK及Sirtl蛋白含量无显着变化,而P2m、P1f、P2f组小鼠骨骼肌p-AMPK/AMPK比值显着下降（P<0.05）,P1m、P2m、P2f组小鼠骨骼肌ac-p53蛋白水平显着升高（P<0.05）。与相应的P组相比,H2m组小鼠骨骼肌AMPK蛋白含量及p-AMPK/AMPK比值均显着升高（P<0.01）,H2f,,M2f及L2f组小鼠骨骼肌p-AMPK/AMPK比值显着升高（P<0.05）；H2f组小鼠骨骼肌Sirtl蛋白含量显着增加（P<0.05）; H2m/f、M2m/f级L2m/f组小鼠骨骼肌ac-p53蛋白水平显着下降（P<0.05）。（3）与相应的R组小鼠相比,P1f、P2f组小鼠肌纤维横截面积显着下降（P<0.01）,P2m、P2f组小鼠骨骼肌IGF-1及AKT蛋白表达均显着下调（P<0.01）,P2m组小鼠骨骼P13K蛋白含量显着下降（P<0.05）,P2m、P1f,P2f组小鼠骨骼肌MHC1蛋白含量均显着降低（P<0.01）。与相应的P组相比,H2f、M2f组小鼠肌纤维横截面积显着增加（P<0.05）；H2m、M2m及L2m组小鼠骨骼肌IGF-1及AKT蛋白表达显着上调（P<0.05）,M2f组小鼠骨骼肌IGF-1蛋白表达显着上调（P<0.05）、H2f组小鼠骨骼肌AKT蛋白表达显着上调（P<0.05）; H2f、M2f、L2f组小鼠骨骼肌MSTN蛋白表达均显着下调（P<0.05）; H2m/f、M2m/.及L2m/f组小鼠骨骼肌MHC1蛋白水平显着增加（P<0.05）。（4）与相应的R组小鼠相比,P1m、P2f组小鼠骨骼肌LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显着下降（P<0.05）,P2f组小鼠骨骼肌LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值仅有下降趋势；P2m组小鼠骨骼肌p62蛋白水平显着升高（P<0.01）,P1f、P2f组小鼠骨骼肌p62蛋白水平呈增加趋势。与相应的P组小鼠相比,H2m/f、M2m/f及L2m组小鼠骨骼肌LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显着升高（P<0.05）,H2m/f、M2m/f,及L2f组小鼠骨骼肌p62蛋白含量显着下降（P<0.05）。（5）与相应的R组相比,P2m、P2f组小鼠骨骼肌p-Foxol、p-Foxo3a及Atrogin-1蛋白含量显着上调（P<0.05）,P2f组小鼠骨骼肌MuRF1蛋白含量显着增加（P<0.05）。与相应的P组小鼠相比,H1f, M1f、L1f、H2m/f、M2m/f)及L2m/f组小鼠骨骼肌p-Foxo、p-Foxo3a蛋白含量显着下降（P<0.05）；H2f、M2f、L2f组小鼠骨骼肌Atrogin-1蛋白表达显着下降（P<0.01）。（6）与相应的R组相比,P1m、P2m、P1f及P2f组小鼠骨骼肌p53蛋白水平均显着升高（P<0.05）；P2m、P2f组小鼠骨骼肌Bax及Caspase-3蛋白表达均显着上调（P<0.05）,且Bcl-2蛋白含量及Bcl-2/Bax比值显着下降（P<0.05）。与相应的P组相比,H2m组小鼠骨骼肌p53蛋白水平显着升高（P<0.05）；H2m、M2m、L2m组小鼠骨骼肌Bax蛋白表达显着下调（P<0.01）,H2m/f、M2m、L2m组小鼠骨骼肌Bcl-2蛋白表达显着上调（P<0.05）,且H2m/f及M2m组小鼠骨骼肌Bcl-2/Bax比值显着升高（P<0.05）；H2m/f、M2m/f、L2m组小鼠骨骼肌Caspase-3蛋白含量显着下降（P<0.05）。结论：（1）4、5月龄SAMP6雌性小鼠骨骼肌质量指数均显着下降,且低于青年对照组2SD,表明其发生Sarcopenia,可作为Sarcopenia研究的实验动物模型；雄性小鼠虽无显着下降,5月龄小鼠骨骼肌质量指数已低于青年对照组1SD,提示雄性SAMP6小鼠具有发生Sarcopenia的风险；持续2个月的耐力训练尤其是高强度耐力训练可提高小鼠骨骼肌质量指数具有防治Sarcopenia的作用。（2）衰老降低了不同性别SAMP6小鼠骨骼朋p-AMPK/AMPK的比值,提高了ac-p53的蛋白含量,提示衰老通过降低AMPK及Sirtl的活性而抑制AMPK/Sirtl信号轴活性。为期2个月耐力训练尤其是高强度耐力训练可提高AMPK、Sirtl活性逆转衰老引起的AMPK/Sirtl信号轴活性下降。（3）衰老降低了蛋白合成信号通路IGF-1/PI3K/AKT的蛋白表达,MSTN表达增加进一步抑制该信号通路,最终导致MHC蛋白表达下降引起Sarcopenia的发生。耐力训练可通过促进衰老机体骨骼肌IGF-1、PI3K、AKT蛋白表达,并降低MSTN蛋白表达解除后者对AKT/mTOR信号通路的抑制作用,上调骨骼肌MHC1及MHC2A的蛋白合成,达到防治Sarcopenia的目的。（4）衰老进程中,5月龄SAMP6雄性、雌性小鼠骨骼肌细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值下降,p62蛋白水平增高导致自噬水平下降,可能使细胞凋亡增加参与Sarcopenia的发生。持续2个月的高、中强度耐力训练可提高SAMP6小鼠骨骼肌细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值,降低p62蛋白含量恢复自噬水平,可能通过减少细胞凋亡防止Sarcopenia的发生。（5）衰老进程中,5月龄SAMP6雄性、雌性小鼠骨骼肌Atrogin-1及MuRF1蛋白表达增加,可能增加了泛素-蛋白酶体活性促进蛋白质的降解,参与衰老过程中Sarcopenia的发生。持续2个月的不同强度耐力训练可抑制衰老引起的SAMP6雌性小鼠Atrogin1表达升高,从而参与Sarcopenia的运动防治分子机制。（6）衰老导致4、5月龄尤其是5月龄SAMP6小鼠骨骼肌p53的蛋白水平及活性增加,继而促进Bax表达并抑制Bcl-2基因表达,可能导致线粒体介导的细胞凋亡发生；2个月的不同强度耐力训练通过激活AMPK/Sirt1信号通路,抑制了p53的转录活性,逆转了衰老导致的骨骼肌细胞凋亡信号的激活,对于Sarcopenia的防治具有重要意义。
二、动物模型SAM小鼠及其在老年医学研究中的应用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、动物模型SAM小鼠及其在老年医学研究中的应用（论文提纲范文）
（1）从PI3K/AKT信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清对C2C12成肌细胞增殖及分化的机制（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 实验材料 |
| 1 实验动物及细胞 |
| 2 实验药品 |
| 3 实验仪器 |
| 4 实验试剂 |
| 实验方法 |
| 1 实验药物及试剂制备 |
| 1.1 龟鹿二仙胶药液的制备 |
| 1.2 龟鹿二仙胶含药血清的制备 |
| 1.3 完全培养基以及分化培养基的配置 |
| 2 小鼠成肌细胞的培养及生长曲线绘制 |
| 2.1 小鼠C2C12 成肌细胞的培养 |
| 2.2 生长曲线的绘制 |
| 3 对成肌细胞进行干预 |
| 3.1 龟鹿二仙胶对成肌细胞增殖的干预 |
| 3.2 龟鹿二仙胶对成肌肉细胞分化的干预 |
| 4 含药血清对小鼠C2C12 成肌细胞凋亡率的影响 |
| 5 相关指标检测 |
| 5.1 成肌细胞C2C12 在空白血清、含药血清干预后分化的形态图的采集 |
| 5.2 成肌细胞 C2C12 中 myod、myog、caspase9 mRNA 表达检测 |
| 5.3 C2C12 成肌细胞中 Myod、Myog、Caspase9、P-akt 蛋白表达的检测 |
| 6 统计方法 |
| 实验结果 |
| 1 小鼠 C2C12 成肌细胞的生长曲线结果 |
| 2 不同浓度的含药血清对成肌细胞增殖的影响 |
| 3 龟鹿二仙胶含药血清组、空白血清组和普通组中小鼠 C2C12 成肌细胞凋亡的流式细胞仪结果 |
| 4 龟鹿二仙胶含药血清对小鼠成肌细胞 PI3K/AKT 通路关键节点 mRNA表达的影响 |
| 5 龟鹿二仙胶含药血清对小鼠成肌细胞PI3K/AKT通路相关蛋白表达的影响 |
| 6 成肌细胞C2C12 在空白血清、含药血清干预后分化的形态图的采集 |
| 讨论 |
| 1 现代医学对肌少症的认识 |
| 1.1 肌少症的病因与发病机制 |
| 1.2 肌少症与凋亡 |
| 2 肌少症与中医学认识 |
| 2.1 补肾抗衰,养元壮骨 |
| 2.2 健脾益气,补益气血 |
| 2.3 辨证论治,补虚泻实 |
| 3 PI3K/AKT信号通路与肌少症的关联 |
| 4 成肌细胞C2C12 与肌少症 |
| 5 龟鹿二仙胶的前期研究基础 |
| 6 从整体观念的角度探讨肌肉-骨骼系统 |
| 7 龟鹿二仙胶含药血清对C2C12中PI3K/AKT信号通路的影响 |
| 结论 |
| 不足与展望 |
| 参考文献 |
| 文献综述 关于肌肉减少症并骨质疏松症动物模型的选用及治疗研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简历 |
（2）米糠提取物对模型小鼠学习记忆的改善作用及机理研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 1 绪论 |
| 1.1 阿尔茨海默症的现状 |
| 1.2 阿尔茨海默病的致病假说 |
| 1.2.1 胆碱能异常假说 |
| 1.2.2 脑内慢性炎症假说 |
| 1.2.3 氧化应激假说 |
| 1.2.4 Tau蛋白磷酸化假说 |
| 1.2.5 淀粉样假说 |
| 1.3 β-淀粉样蛋白 |
| 1.3.1 Aβ的形成 |
| 1.3.2 Aβ的聚集过程 |
| 1.3.3 Aβ及其聚集物毒性 |
| 1.4 常见的阿尔茨海默病动物模型 |
| 1.4.1 自然衰老动物模型 |
| 1.4.2 SAMP8快速老化模型 |
| 1.4.3 胆碱能系统损伤动物模型 |
| 1.4.4 转基因动物模型 |
| 1.4.5 注射Aβ动物模型 |
| 1.4.6 铝中毒诱导动物模型 |
| 1.4.7 D-半乳糖动物模型 |
| 1.5 米糠提取物研究现状 |
| 1.6 米糠油研究现状 |
| 1.7 对羟基肉桂酸研究现状 |
| 1.8 研究目的及内容 |
| 1.8.1 研究目的和意义 |
| 1.8.2 主要研究内容 |
| 2 米糠乙醇提取物对D-半乳糖模型小鼠学习记忆的改善作用及对Aβ诱导的SH-SY5Y凋亡的抑制作用研究 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料和方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 实验试剂 |
| 2.2.3 实验仪器 |
| 2.2.4 实验方法 |
| 2.2.5 统计学分析 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 RBEE对D-半乳糖小鼠学习记忆的影响研究 |
| 2.3.2 RBEE对Aβ毒性聚集物影响的研究 |
| 2.3.3 RBEE成分分析 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 米糠油对D-半乳糖模型小鼠学习记忆的改善作用研究 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料和方法 |
| 3.2.1 实验材料 |
| 3.2.2 实验试剂 |
| 3.2.3 实验仪器 |
| 3.2.4 实验方法 |
| 3.2.5 统计学分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 RBO对D-半乳糖小鼠学习记忆的影响研究 |
| 3.3.2 RBO成分分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 本章小结 |
| 4 对羟基肉桂酸对Aβ(1-42)诱导的SH-SY5Y凋亡的抑制作用研究 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 材料和方法 |
| 4.2.1 实验材料 |
| 4.2.2 实验试剂 |
| 4.2.3 实验仪器 |
| 4.2.4 实验方法 |
| 4.2.5 统计学分析 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 p-HCA在RBEE及RBO中的定量分析 |
| 4.3.2 p-HCA对Aβ毒性聚集物影响的研究 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 本章小结 |
| 5 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 展望 |
| 5.3 创新点 |
| 参考文献 |
| 附录A 英语缩写词表 |
| 附录B UHPLC-QTOF-MS测得米糠乙醇提取物中的化学成分 |
| 附录C GC-TOF-MS测得米糠油中的化学成分 |
| 附录D 攻读学位期间的研究成果 |
| 致谢 |
（3）基于功能磁共振成像对快速老化模型小鼠功能连接的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 研究背景和意义 |
| 1.2 国内外研究进展分析 |
| 1.2.1 SAMP8小鼠的认知功能损伤表现和神经病理学特征 |
| 1.2.2 功能磁共振影像技术简介 |
| 1.2.3 基于功能磁共振成像技术对AD海马区功能连接异常模式的研究现状 |
| 1.2.4 基于磁共振成像技术对AD海马局部损伤的研究现状 |
| 1.2.5 AD疾病进展的研究现状 |
| 1.3 本文的主要研究内容 |
| 第2章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 fMRI扫描 |
| 2.3 行为实验 |
| 2.3.1 实验原理 |
| 2.3.2 实验设备 |
| 2.3.3 实验流程 |
| 2.3.4 观测指标 |
| 2.4 蛋白含量检测 |
| 2.4.1 检测原理 |
| 2.4.2 检测步骤 |
| 2.4.2.1 取海马组织匀浆 |
| 2.4.2.2 ELISA操作步骤 |
| 2.5 数据处理与分析 |
| 2.5.1 数据预处理 |
| 2.5.2 功能连接分析 |
| 2.5.3 统计分析 |
| 第3章 SAM小鼠海马亚区的功能连接模式 |
| 3.1 SAMP8与SAMR1小鼠海马亚区的功能连接分布模式 |
| 3.2 SAMP8与SAMR1小鼠海马亚区功能连接随月龄的变化模式 |
| 3.3 SAM小鼠行为学指标随月龄的变化规律 |
| 3.4 SAM小鼠蛋白水平随月龄的变化规律 |
| 3.5 本章小结 |
| 第4章 SAMP8小鼠海马亚区的功能连接异常变化研究 |
| 4.1 SAMP8小鼠海马亚区功能连接异常变化模式 |
| 4.2 SAMP8小鼠海马亚区功能连接的异常变化随月龄进展情况 |
| 4.3 SAM小鼠海马亚区功能连接与行为指标和蛋白水平的相关性 |
| 4.3.1 SAM小鼠右侧CA3/DG亚区功能连接与行为指标的相关性 |
| 4.3.2 SAM小鼠右侧CA3/DG亚区功能连接与蛋白水平的相关性 |
| 4.4 本章小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）龟龄集对AD认知功能的疗效评价及突触和髓鞘相关作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 从肾论治阿尔茨海默病中医研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 BDNF在阿尔茨海默病中的作用 |
| 参考文献 |
| 第一章 龟龄集对AD认知功能的疗效评价 |
| 前言 |
| 一、研究对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 病例选择 |
| 3 研究方法 |
| 二、研究结果 |
| 1 纳入病例情况 |
| 2 基线资料分析 |
| 3 治疗后疗效比较 |
| 4 安全性和不良反应分析 |
| 三、讨论 |
| 四、小结 |
| 参考文献 |
| 第二章 龟龄集对SAMP8小鼠认知功能的影响及机制研究 |
| 一、材料和方法 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 二、研究结果 |
| 1 新物体识别实验检测龟龄集对SAMP8小鼠识别记忆能力的影响 |
| 2 Morris水迷宫检测龟龄集对SAMP8小鼠空间学习记忆能力的影响 |
| 3 龟龄集对SAMP8小鼠海马病理形态的影响 |
| 4 龟龄集对SAMP8小鼠突触、髓鞘相关蛋白的影响 |
| 5 龟龄集对SAMP8小鼠海马BDNF/TrkB信号通路的影响 |
| 三、讨论 |
| 四、小结 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 致谢 |
| 附录 |
| 个人简历 |
（5）从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退的脑功能失衡机制（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 理论探讨 |
| 一、中医学对学习记忆功能的认识 |
| (一)“神”乃精神意识思维活动 |
| (二)五脏藏神协调认知过程 |
| (三)脑主元神启发灵机神明 |
| 二、中医学对衰老的认识 |
| (一)阴阳失衡而衰 |
| (二)五脏衰而寿尽 |
| (三)肾乃寿夭关键 |
| 三、从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退 |
| (一)经络不通,肾脑失联 |
| (二)肾精不足,脑髓不满 |
| (三)元气衰竭,神去机息 |
| (四)志无所藏,神无所化 |
| (五)阴阳失调,迷惑健忘 |
| 四、现代医学对学习记忆功能的认识 |
| (一)学习记忆活动的行为模式 |
| (二)学习记忆活动的结构基础 |
| (三)学习记忆活动的物质基础 |
| 五、现代医学对衰老的认识 |
| (一)基因功能紊乱与衰老 |
| (二)细胞自噬与衰老 |
| (三)氧化应激-炎症-免疫与衰老 |
| (四)与衰老相关的其他学说及认识 |
| 六、衰老与学习记忆功能的关系 |
| (一)相关脑区突触可塑性的改变 |
| (二)中枢神经递质的改变 |
| (三)离子通道通透性与功能的改变 |
| (四)激素水平的改变 |
| 七、从肾论治衰老肾虚状态下学习记忆功能减退 |
| (一)基于阴阳失衡探究学习记忆功能减退 |
| (二)运用地黄饮子从肾论治学习记忆功能减退 |
| 实验研究 |
| 实验一 地黄饮子对SAM小鼠学习记忆功能的影响 |
| 一、实验材料 |
| (一)实验动物 |
| (二)实验仪器 |
| (三)药品与试剂 |
| 二、实验方法 |
| (一)实验设计 |
| (二)主要试剂及药品配制备 |
| (三)行为学实验检测 |
| (四)在体海马场电位记录 |
| (五)海马组织样本采集、固定与制片方法 |
| (六)统计方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)地黄饮子对SAM小鼠空间学习记忆能力下降的改善作用 |
| (二)地黄饮子对SAM小鼠短期学习记忆能力下降的改善作用 |
| (三)地黄饮子对SAM小鼠海马突触结构可塑性的改善作用 |
| (四)地黄饮子对SAM小鼠海马突触功能可塑性的改善作用 |
| 四、讨论 |
| (一)地黄饮子参与调节学习记忆 |
| (二)地黄饮子参与调节海马突触可塑性 |
| (三)LTP/LTD效应失衡是衰老肾虚证脑电生理阴阳失衡的表现之一 |
| 五、小结 |
| 实验二 地黄饮子对SAM小鼠海马突触可塑性的作用机制研究 |
| 一、实验材料 |
| (一)实验动物 |
| (二)实验仪器 |
| (三)药品与试剂 |
| 二、实验方法 |
| (一)实验设计、分组情况及实验流程 |
| (二)主要试剂及药品配制 |
| (三)待测样本的收集与检测 |
| (六)统计方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)酶联免疫法检测海马内Glu、GABA含量 |
| (二)Western blot检测海马内谷氨酸受体、CaMKII的表达 |
| 四、讨论 |
| (一)兴奋性与抑制性氨基酸神经递质代谢失衡是脑内神经递质阴阳失衡的表现之一 |
| (二)衰老状态下脑不同层次阴阳失衡的关键在于钙离子代谢异常 |
| (三)地黄饮子可以有效调节衰老状态下的学习记忆能力下降 |
| 五、小结 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录1.Master8 刺激器各阶段刺激模式程序 |
| 附录2.fEPSPs计算公式 |
| 附录3.各组小鼠海马透射电镜观察结果 |
| 致谢 |
| 查新报告 |
| 论文着作 |
（6）裸花紫珠对认知障碍的干预作用及机制研究（论文提纲范文）
| 博士在读期间参与课题情况 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 一、阿尔茨海默症(AD)的发病机制及其治疗药物 |
| 二、β淀粉样蛋白的生成、分布、功能及其与AD的关系 |
| 三、β淀粉样蛋白与RAGE |
| 四、认知障碍与炎症 |
| 五、认知障碍与氧化应激 |
| 六、认知障碍的病理模型 |
| 七、裸花紫珠的药理活性研究 |
| 八、苯乙醇苷类化合物的生物活性研究 |
| 第二章 CNEs对 Aβ_(1-42)致认知障碍大鼠的干预作用及作用机制 |
| 第一节 对认知障碍大鼠干预作用的系统药效学研究 |
| 一、对实验动物行为学的干预作用 |
| 二、对实验动物抗炎能力的影响 |
| 三、对实验动物抗氧化能力的影响 |
| 四、对实验动物脑组织病理变化的影响 |
| 第二节 对认知障碍大鼠干预作用的机制研究 |
| 一、对实验动物海马内Aβ表达的影响 |
| 二、对实验动物海马NF-κB炎症信号通路的影响 |
| 三、对实验动物海马NADPH氧化酶-ROS氧化应激信号通路的影响 |
| 第三节 本章讨论 |
| 第三章 异毛蕊花糖苷对快速老化小鼠认知障碍的干预作用及作用机制 |
| 第一节 对SAM小鼠认知障碍的干预作用 |
| 一、对快速老化小鼠(SAM小鼠)行为学的干预作用 |
| 二、对SAM小鼠抗炎能力的影响 |
| 三、对SAM小鼠抗氧化能力的影响 |
| 四、对SAM小鼠脑组织病理变化的影响 |
| 第二节 对SAM小鼠认知障碍干预作用的机制研究 |
| 一、对SAM小鼠海马内Aβ表达的影响 |
| 二、对SAM小鼠海马NF-κB炎症信号通路的影响 |
| 三、对SAM小鼠海马NADPH氧化酶-ROS氧化应激信号通路的影响 |
| 第三节 本章讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 致谢 |
| 附件 |
（7）补肾益智方提取物对AD模型小鼠学习记忆和突触蛋白表达的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 AD概述 |
| 一、AD发病机制及其研究现状 |
| 二、AD与突触功能 |
| 第二节 AD动物模型研究进展 |
| 一、老化致痴呆模型 |
| 二、胆碱能损伤致痴呆模型 |
| 三、A β致AD模型 |
| 四、Tau蛋白过度磷酸化的动物模型 |
| 五、金属元素AD模型 |
| 六、自身免疫动物模型 |
| 七、与糖尿病相关的动物模型 |
| 八、慢性脑缺血动物模型 |
| 九、转基因AD动物模型 |
| 十、复合型动物模型 |
| 第三节 中医药治疗(补肾益智方)AD补肾益智方研究进展 |
| 一、中医药与AD |
| 二、补肾益智方组方及单味药治疗AD的药理作用 |
| 三、关于补肾益智方的前期研究 |
| 第二章 实验研究 |
| 第一节 补肾益智方提取物对AD小鼠学习记忆的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第二节 补肾益智方提取物对AD小鼠突触蛋白表达的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 二、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第三节 补肾益智方提取物对AD小鼠海马CA1区形态学的影响 |
| 一、实验材料 |
| 二、实验方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 在校期间发表论文和参与科研情况 |
| 致谢 |
| 统计学审核证明 |
（8）阿尔茨海默病病理鼠模型研究进展（论文提纲范文）
| 1 单因素造模 |
| 1.1 老化致AD模型 |
| 1.2 Aβ致AD模型 |
| 1.3 Tau蛋白致AD模型 |
| 1.4 胆碱能损伤致AD模型 |
| 1.5 金属元素AD模型 |
| 2 多因素复合AD模型 |
| 2.1 多基因AD模型 |
| 2.2 基因多重因素AD模型 |
| 2.3 非基因多重因素AD模型 |
| 3 AD模型鼠的比较 |
| 4 结语 |
（9）电针三阴交对雌性痴呆模型小鼠HPO轴影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 阿尔茨海默病的研究现状 |
| 1 阿尔茨海默病研究概述 |
| 2 阿尔茨海默病的诊断 |
| 3 阿尔茨海默病的发病机制 |
| 4 阿尔茨海默病的治疗现状 |
| 综述一 参考文献 |
| 综述二 下丘脑-垂体-卵巢轴与阿尔茨海默病相关性的研究进展 |
| 1 下丘脑-垂体-卵巢轴与AD相关性概述及研究背景 |
| 2 雌激素与AD的相关性研究 |
| 3 黄体生成素与AD的相关性研究 |
| 4 促卵泡激素与AD的相关性研究 |
| 5 促性腺激素释放激素与AD的相关性研究 |
| 6 SAMP8雌性小鼠HPO轴及动情周期变化规律的研究进展 |
| 综述二 参考文献 |
| 综述三 针刺三阴交对HPO轴影响的研究进展 |
| 1 三阴交的古今研究 |
| 2 三阴交对HPO轴调节的实验研究进展 |
| 综述三 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 动物模型 |
| 1.2 主要仪器与试剂 |
| 2 方法 |
| 2.1 实验动物分组 |
| 2.2 行为学观察 |
| 2.3 电针三阴交穴 |
| 2.4 取材方法 |
| 2.5 指标检测 |
| 2.6 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 水迷宫定位航行实验 |
| 3.2 一般情况观察 |
| 3.3 电针三阴交对SAMP8雌性小鼠HPO轴相关激素的影响 |
| 3.4 电针三阴交对SAMP8雌性小鼠卵巢重量的影响 |
| 4 小结 |
| 5 讨论 |
| 5.1 模型的选择 |
| 5.2 穴位的选择 |
| 5.3 实验指标结果分析 |
| 结语 |
| 1 论文总结 |
| 2 不足与展望 |
| 实验部分参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）不同强度耐力训练对SAMP6小鼠AMPK/Sirt1信号轴及骨骼肌质量的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| abstract |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 Sarcopenia |
| 前言 |
| 第一节 Sarcopenia概述 |
| 1 Sarcopenia的概念 |
| 2 Sarcopenia诊断标准 |
| 2.1 检查方法 |
| 2.2 诊断标准 |
| 3 流行病学 |
| 4 Sarcopenia的危害 |
| 第二节 Sarcopenia的发生机制 |
| 1 激素及其介质变化与Sarcopenia |
| 2 炎症与Sarcopenia |
| 3 线粒体功能障碍与Sarcopenia |
| 4 退行性变化与Sarcopenia |
| 第三节 Sarcopenia的防治措施 |
| 1 激素替代疗法 |
| 2 饮食营养干预 |
| 3 运动干预 |
| 第二章 AMPK/Sirt1信号轴与骨骼肌质量 |
| 第一节 AMPK/Sirt1信号轴 |
| 1 AMPK结构、功能及调节 |
| 2 Sirtl结构、功能及其调节 |
| 3 AMPK/Sirt1信号轴 |
| 第二节 AMPK/Sirt1信号轴与骨骼肌蛋白合成 |
| 1 骨骼肌蛋白质合成相关信号通路 |
| 2 AMPK/Sirt1信号轴对蛋白合成的调控作用 |
| 第三节 AMPK/Sirt1信号轴与骨骼肌蛋白降解 |
| 1 AMPK/Sirt1信号轴与泛素-蛋白酶体系统 |
| 1.1 泛素-蛋白酶体系统 |
| 1.2 AMPK/Sirt1信号轴与泛素-蛋白酶体系统 |
| 2 AMPK/Sirt1信号轴与细胞自噬 |
| 2.1 细胞自噬及分类 |
| 2.2 细胞自噬相关信号通路 |
| 2.3 AMPK/Sirt1信号轴对细胞自噬的调节及其与骨骼肌质量 |
| 第四节 AMPK/Sirt1信号轴与细胞凋亡 |
| 1 细胞凋亡 |
| 2 AMPK/Sirt1信号轴与细胞凋亡 |
| 第三章 衰老及运动对AMPK/Sirt1信号轴的影响及其与骨骼肌质量的关系 |
| 1 衰老对AMPK/Sirt1信号轴的影响及其运动调控 |
| 2 衰老对机体蛋白合成的影响及其运动调控 |
| 3 衰老对机体蛋白降解的影响及其运动调控 |
| 4 衰老对机体细胞凋亡的影响及其运动调控 |
| 第二篇 研究报告 |
| 第一章 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌质量及AMPK/Sirt1信号轴的影响 |
| 第一节 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌质量的影响 |
| 1 实验对象及方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 运动训练方案 |
| 1.3 小鼠取材方法 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 衰老进程中SAMP6小鼠体重及骨骼肌质量指数的变化 |
| 2.2 耐力训练后SAMP6小鼠体重及骨骼肌质量指数的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 衰老对小鼠体重及骨骼肌质量的影响 |
| 3.2 耐力训练对小鼠体重及骨骼肌质量的影响 |
| 4 小结 |
| 第二节 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 运动方案与取材 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 主要实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 研究结果 |
| 2.1 衰老进程中小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.2 衰老进程中小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴相关基因蛋白表达的变化 |
| 2.3 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.4 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴相关基因蛋白表达的变化 |
| 2.5 衰老进程中小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴上游信号分子基因表达变化 |
| 2.6 耐力训练后小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴上游信号分子基因表达变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 衰老与耐力训练对小鼠骨骼肌AMPK/Sirt1信号轴相关基因表达及活性的影响 |
| 3.2 衰老及耐力训练对小鼠骨骼肌MPK/Sirt1信号轴上游信号分子基因表达的影响 |
| 4 小结 |
| 第二章 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌蛋白合成的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 运动方案与取材 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 主要实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 HE染色结果 |
| 2.2 衰老进程中对小鼠骨骼肌质量相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.3 衰老进程中小鼠骨骼肌质量相关蛋白表达的变化 |
| 2.4 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌质量相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.5 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌质量相关蛋白表达的变化 |
| 2.6 衰老进程中小鼠骨骼肌蛋白合成信号通路相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.7 衰老进程中小鼠骨骼肌蛋白合成信号通路相关基因蛋白表达的变化 |
| 2.8 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌蛋白合成信号通路相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.9 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌蛋白合成信号通路相关基因蛋白表达的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 衰老对小鼠骨骼肌蛋白合成信号通路相关基因表达的影响 |
| 3.2 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌蛋白合成的影响 |
| 4 小结 |
| 第三章 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌细胞自噬的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 细胞实验 |
| 1.2 动物实验 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 主要实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 AMPK/Sirt1激动剂对C2C12肌管细胞自噬的影响 |
| 2.2 衰老进程中及耐力训练后小鼠骨骼肌自噬相关基因表达的变化 |
| 3讨论 |
| 3.1 衰老对小鼠骨骼肌细胞自噬的影响 |
| 3.2 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌细胞自噬的影响 |
| 4 小结 |
| 第四章 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌蛋白酶体系统的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 运动方案与取材 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 主要实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 衰老进程中小鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体系统相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.2 衰老进程中小鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体系统相关蛋白表达的变化 |
| 2.3 衰老进程中小鼠骨骼肌p-Foxo1、p-Foxo3a蛋白水平的变化 |
| 2.4 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体系统相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.5 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体系统相关蛋白表达的变化 |
| 2.6 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌p-Foxo1、p-Foxo3a蛋白水平的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 衰老对小鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体系统相关基因表达的影响 |
| 3.2 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌泛素-蛋白酶体系统相关基因表达的影响 |
| 4 小结 |
| 第五章 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌细胞凋亡的影响 |
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 运动方案与取材 |
| 1.3 主要试剂及仪器 |
| 1.4 主要实验方法 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 衰老进程中小鼠骨骼肌细胞凋亡相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.2 衰老进程中小鼠骨骼肌细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化 |
| 2.3 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌细胞凋亡相关基因mRNA表达的变化 |
| 2.4 耐力训练后SAMP6小鼠骨骼肌细胞凋亡相关基因蛋白表达的变化 |
| 3 讨论 |
| 3.1 衰老对小鼠骨骼肌细胞凋亡相关基因表达的影响 |
| 3.2 耐力训练对SAMP6小鼠骨骼肌细胞凋亡相关基因表达的影响 |
| 4 小结 |
| 第三篇 研究总结 |
| 1 主要结果与结论 |
| 2 主要创新之处 |
| 3 主要缺陷与不足 |
| 4 研究展望 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 后记 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 |
四、动物模型SAM小鼠及其在老年医学研究中的应用（论文参考文献）
- [1]从PI3K/AKT信号通路探讨龟鹿二仙胶含药血清对C2C12成肌细胞增殖及分化的机制[D]. 朱国涛. 福建中医药大学, 2021(09)
- [2]米糠提取物对模型小鼠学习记忆的改善作用及机理研究[D]. 张雅丹. 中南林业科技大学, 2021(02)
- [3]基于功能磁共振成像对快速老化模型小鼠功能连接的研究[D]. 张经纬. 哈尔滨工业大学, 2020(01)
- [4]龟龄集对AD认知功能的疗效评价及突触和髓鞘相关作用研究[D]. 王慧婵. 北京中医药大学, 2020(04)
- [5]从“肾脑相关”论衰老学习记忆功能减退的脑功能失衡机制[D]. 韩诚. 山东中医药大学, 2019(05)
- [6]裸花紫珠对认知障碍的干预作用及机制研究[D]. 夏玉英. 广州中医药大学, 2018(02)
- [7]补肾益智方提取物对AD模型小鼠学习记忆和突触蛋白表达的影响[D]. 罗纳川. 广州中医药大学, 2018(01)
- [8]阿尔茨海默病病理鼠模型研究进展[J]. 黄飞娟,程德金,吴正治,秦鉴. 医学综述, 2017(24)
- [9]电针三阴交对雌性痴呆模型小鼠HPO轴影响的实验研究[D]. 秦卓. 北京中医药大学, 2016(08)
- [10]不同强度耐力训练对SAMP6小鼠AMPK/Sirt1信号轴及骨骼肌质量的影响[D]. 邱守涛. 华东师范大学, 2015(12)