本文主要研究内容
作者刘赛宝,李亚芳,王辉,王伟,冉多良,陈洪岩,孟庆文（2019）在《利用CRISPR/Cas9技术构建流感病毒高产细胞系MDCK-Tpl2-/-》一文中研究指出：Tpl2是调节I型（IFNα/β）和II型（IFNγ） IFN的关键调控因子,对病毒感染期间产生有效免疫应答至关重要。为了建立支持流感病毒高效繁殖的新型MDCK细胞系,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Tpl2基因敲除的MDCK细胞,绘制其细胞生长曲线;根据《中国药典》第三部,对细胞进行形态检查、内外源因子和致瘤性检测;流感病毒接种细胞（MOI=0. 1）,测定12h、24h、48h、72h细胞培养上清的血凝滴度及72h TCID50滴度。结果:靶基因组测序结果显示,获得一株稳定敲除Tpl2的MDCK细胞(MDCK-Tpl2-/-);其与亲本细胞生长速率无显著差异,均为贴壁、上皮样细胞形态;细胞内细菌、真菌、支原体、病毒及致瘤性检测均为阴性;病毒接种后12h、24h、48h、72h,MDCK-Tpl2-/-细胞培养上清的血凝效价提高了1. 78～2. 5倍。病毒接种后72h,MDCK-Tpl2-/-细胞培养上清病毒的TCID50滴度提高了2. 8倍。结果表明,利用Tpl2缺陷型MDCK细胞系可以提高流感病毒产量,为提升疫苗质量奠定基础。
Abstract
Tpl2shi diao jie Ixing （IFNα/β）he IIxing （IFNγ） IFNde guan jian diao kong yin zi ,dui bing du gan ran ji jian chan sheng you xiao mian yi ying da zhi guan chong yao 。wei le jian li zhi chi liu gan bing du gao xiao fan shi de xin xing MDCKxi bao ji ,li yong CRISPR/Cas9ji yin bian ji ji shu gou jian Tpl2ji yin qiao chu de MDCKxi bao ,hui zhi ji xi bao sheng chang qu xian ;gen ju 《zhong guo yao dian 》di san bu ,dui xi bao jin hang xing tai jian cha 、nei wai yuan yin zi he zhi liu xing jian ce ;liu gan bing du jie chong xi bao （MOI=0. 1）,ce ding 12h、24h、48h、72hxi bao pei yang shang qing de xie ning di du ji 72h TCID50di du 。jie guo :ba ji yin zu ce xu jie guo xian shi ,huo de yi zhu wen ding qiao chu Tpl2de MDCKxi bao (MDCK-Tpl2-/-);ji yu qin ben xi bao sheng chang su lv mo xian zhe cha yi ,jun wei tie bi 、shang pi yang xi bao xing tai ;xi bao nei xi jun 、zhen jun 、zhi yuan ti 、bing du ji zhi liu xing jian ce jun wei yin xing ;bing du jie chong hou 12h、24h、48h、72h,MDCK-Tpl2-/-xi bao pei yang shang qing de xie ning xiao jia di gao le 1. 78～2. 5bei 。bing du jie chong hou 72h,MDCK-Tpl2-/-xi bao pei yang shang qing bing du de TCID50di du di gao le 2. 8bei 。jie guo biao ming ,li yong Tpl2que xian xing MDCKxi bao ji ke yi di gao liu gan bing du chan liang ,wei di sheng yi miao zhi liang dian ding ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国生物工程杂志的刘赛宝,李亚芳,王辉,王伟,冉多良,陈洪岩,孟庆文，发表于刊物中国生物工程杂志2019年01期论文，是一篇关于细胞论文,细胞质控论文,禽流感病毒论文,中国生物工程杂志2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国生物工程杂志2019年01期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
标签：细胞论文; 细胞质控论文; 禽流感病毒论文; 中国生物工程杂志2019年01期论文;