导读:本文包含了稳定流行论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:乙型肝炎病毒,基因型,模型,动物
稳定流行论文文献综述
杨悦,高俪,许智慧,余双庆,李瑞生[1]（2016）在《中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立》一文中研究指出目的构建稳定复制中国流行株C基因型HBV的小鼠模型。方法将携带1.3倍C基因型HBV基因组(adr血清型)的重组腺相关病毒r AAV8-1.3HBV-C转导人肝癌细胞Hu H7,采用ELISA法评估HBV抗原(HBs Ag、HBe Ag)在肝癌细胞中的表达。筛选高表达的重组病毒,经尾静脉注射入6~8周龄C57BL/6小鼠体内,建立HBV-C复制小鼠模型(实验组,n=8);同时建立文献已报道HBV-D复制小鼠模型(对照组,n=7,r AAV8-1.3HBV-D,ayw血清型)。动态监测两组小鼠血清(眼底静脉丛采血)HBV DNA载量和HBs Ag、HBe Ag的抗原表达量;于第9周处死小鼠,HE染色观察肝组织病理改变,免疫组化染色分析HBs Ag和HBc Ag的表达。结果重组病毒r AAV8-1.3HBV-C体外转导人肝癌细胞Hu H7,72h后细胞上清中可检测到HBs Ag和HBe Ag的表达。小鼠注射重组病毒后第2、3、5、7、9周,血清HBV DNA存在稳定复制,血清HBe Ag表达水平较稳定,但血清HBs Ag表达存在波动。两组小鼠肝组织未见明显的炎性细胞浸润及组织结构异常,但可检测到HBs Ag和HBc Ag蛋白。结论利用高嗜肝性重组8型腺相关病毒载体携带1.3倍C基因型HBV基因组体内转导C57BL/6小鼠,成功地建立了稳定复制并持续表达C基因型HBV的小鼠模型。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2016年10期）
周庆玲,于晶,谢英林,李春艳,韩云飞[2]（2015）在《大流行流感疫苗稳定剂的筛选》一文中研究指出目的筛选大流行流感疫苗的稳定剂。方法将流感病毒株Influenza A/Vietnam/1194/2004(H5N1)接种Vero细胞制备5批疫苗原液,加入Al(OH)3吸附制备成品疫苗。取同一批疫苗原液,分成5份,分别加入吐温-80(20μg/ml)及0.5%、1%和2%人血白蛋白稳定剂,以不加入稳定剂的疫苗原液作为空白对照,于37℃放置4周,检测流感病毒的血凝滴度,筛选疫苗的稳定剂;将加入筛选出的稳定剂的5批疫苗原液及3批成品疫苗于37℃放置不同时间,检测血凝素(hemagglutinin,HA)含量。结果不加入稳定剂的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度明显下降;加入20μg/ml吐温-80和0.5%人血白蛋白的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度亦明显下降;而加入1%和2%人血白蛋白的疫苗原液于37℃放置4周,血凝滴度仍未下降,后续试验选择1%人血白蛋白作为疫苗稳定剂。加入1%人血白蛋白的5批疫苗原液于37℃放置1~4周与放置前比较,HA含量差异均无统计学意义(P>0.05);加入1%人血白蛋白的3批成品疫苗37℃放置6周,疫苗HA含量有下降趋势,37℃放置1~5周,相邻两周间HA含量差异无统计学意义(P>0.05),放置5周,HA含量下降幅度≤1μg/ml。结论 1%人血白蛋白对流感病毒具有良好的稳定作用。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2015年04期）
张婷玉[3]（2015）在《乙型肝炎病毒中国流行株C基因型稳定转染细胞模型的评价与应用》一文中研究指出乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)感染及其引起的一系列相关疾病是一种严重影响人类健康的全球性疾病,世界各国的科学家们从不同的方面对HBV感染的有效防治进行了大量的相关研究、探索和尝试。乙肝疫苗、干扰素(Interferon,INF)和核苷(酸)类似物(Nucleotide analogues,Nas)是现阶段防治慢性乙型肝炎病毒感染有效的主要手段,乙肝疫苗虽然可起到预防作用,但对已感染者、免疫耐受者和病毒逃逸株无效,而现阶段使用的抗病毒药物,存在副作用较大(干扰素)、易产生耐药(核苷类药物)、抗原血清转换率低等诸多缺点。建立细胞模型是研究病毒感染史、生物学特性、评价药物疗效、优化治疗方案、研究高效疫苗和开发新产品高效便捷的技术手段。现有的细胞模型包括病毒感染细胞模型、病毒瞬时转染细胞模型和病毒稳定转染细胞模型。对于病毒感染细胞模型,虽然近年发现了HBV的受体分子钠离子一牛磺胆酸共转运蛋白(Sodium taurocholate co-transporting polypeptide,NTCP),但其感染效率仍然较低并且操作复杂,另外由于HBV严格的物种和组织特异性属性,限制了此种细胞模型的应用,病毒的瞬时转染系统在肝癌细胞中的病毒复制很难长期保持稳定,不适合实验的标准化的需要,如药物敏感试验。20余年来国内外已经建立了可以复制和分泌HBV病毒颗粒的稳定细胞系,如国际上公认的Hep G2.2.15细胞和Hep AD38细胞。其他实验室为了满足抗病毒耐药变异研究的需求,也相继建立起了耐药突变的HBV稳定复制细胞株,但仍然缺少我国流行的(B和C基因型)HBV毒株稳定复制细胞系和多重耐药细胞株;另外一些细胞株人为诱导的HBV突变细胞株,不能反映出病毒的自然遗传特征。因此,建立HBV中国流行株B和C基因型稳定复制细胞模型,符合我国临床实际,对于抗病毒药物的评价及乙肝防治方案的本土化具有积极作用。本实验室在前期的工作中通过联合应用PB转座子及其他技术构建了中国流行株C基因型野生株和耐药株的稳定转染细胞,本研究旨在对此稳转细胞的各项指标进行分析,并将其初步应用在体外抗HBV药效学评价上,期望该稳转细胞能够为抗HBV新药药效评价提供理想的细胞模型。目的:检测分析本实验室前期构建的HBV中国流行株C基因型稳转细胞:Hep G2.CW和Hep G2.LER细胞系的各项复制指标,评价该稳转细胞特性与经典HBV稳转细胞模型的差异;用临床常用核苷类药物来评价稳转细胞系用于药物评价的可靠性;设计用于表达新型小发卡rna(shorthairpinrna,shrna)的慢病毒载体,并考察其用于抗乙型肝炎病毒的可行性。方法:1、hbv稳定转染细胞特征分析:1)化学发光法定量检测hepg2.cw和hepg2.ler细胞上清hbv表面抗原(hepatitisbvirussurfaceantigen,hbsag)的表达和e抗原(hepatitisbviruseantigen,hbeag)的表达;2)荧光定量rcr法检测hepg2.cw和hepg2.ler细胞上清hbvdna的含量;3)酶联免疫吸附法定性检测胞内乙型肝炎病毒表面抗原和e抗原的表达;4)间接免疫荧光法检测胞内乙型肝炎病毒表面抗原的表达;5)间接免疫荧光法检测胞内乙型肝炎病毒核心抗原的表达;6)酶联免疫吸附法定性检测hepg2.cw和hepg2.ler细胞系细胞上清乙型肝炎病毒前s1抗原(hbvpres1)的表达。2、用临床常用核苷类药物来评价hepg2.cw和hepg2.ler细胞系用于药物评价的可靠性:选用我国叁种临床常用核苷类药物:拉米夫定(lam)、恩替卡韦(etv)、阿德福韦酯(adv),稀释为0、0.001、0.01、0.1、1、10、100μm的一系列的浓度梯度,分别作用于hepad38(阳性对照)、hepg2.cw和hepg2.ler叁种细胞系,连续正常培养九天后用荧光定量rcr法检测叁种细胞上清乙型肝炎病毒dna的含量。3、新型小发卡rna慢病毒表达载体的构建及抗乙型肝炎病毒应用评价:对慢病毒载体骨架sapi位点进行突变,并将用于表达新型小发卡rna的结构亚克隆到改造后的慢病毒载体;设计靶向hbv保守序列的shrna并克隆到该慢病毒载体,包装含有shrna序列的重组慢病毒并进行定量,考察单个及多个shrna结构串联对慢病毒滴度的影响;将重组慢病毒感染hbv稳定转染肝细胞系hepg2.cw(moi=3),用氲稻霉素(blasticidin)筛选稳定克隆1周后,将其重新消化,并以1×105/孔接种于24孔板中,于铺板96h后取细胞上清检测hbsag、hbeag表达水平和hbvdna的含量。结果:1、稳定转染细胞特征分析结果:1)阳性对照hepg2.2.15细胞上清hbsag表达水平约为79ng/ml,hepg2.cw和hepg2.ler细胞上清hbsag表达水平约为85ng/ml和8ng/ml;2)阳性对照的hepg2.2.15细胞上清hbeag表达水平约为63ncu/ml,hepg2.cw和hepg2.ler细胞上清hbeag表达水平约为78ncu/ml和70ncu/ml;3)hepg2.cw和hepg2.ler细胞的hbvdna的含量均比阳性对照细胞hepg2.2.15高;4)hepg2.cw细胞胞内hbsag的表达水平比阳性对照hepad38细胞高,而hbeag的表达水平就比阳性对照hepad38细胞低;hepg2.ler细胞胞内hbsag和hbeag的表达水平均比阳性对照hepad38细胞低;5)hepg2.cw和hepg2.ler两种细胞系均有较好的表面抗原表达;6)hepg2.cw和hepg2.ler两种细胞系均有较好的核心抗原表达;7)阳性对照Hep AD38细胞上清HBV Pre S1表达水平OD值约为2.5,Hep G2.CW和Hep G2.LER细胞上清HBV Pre S1表达水平OD值约为3.5和0.8。2、用临床常用核苷类药物来评价Hep G2.CW和Hep G2.LER细胞系用于药物评价的可靠性,发现随着药物浓度的增加,阳性对照细胞Hep AD38和待评价细胞Hep G2.CW细胞上清HBV DNA的量均出现均匀的下降趋势;而Hep G2.LER细胞上清HBV DNA对LAM和ETV敏感度下降,ETV的作用也仅在药物浓度1μM之后对HBV DNA的量有一定抑制趋势,ADV在药物浓度0.1μM时即对HBV DNA的量有明显的抑制。3、构建了一种用于表达新型小发卡RNA的慢病毒载体,通过设计靶向HBV保守序列的sh RNA实现了HBV复制的高效抑制,发现两个和叁个sh RNA串联效果优于单个sh RNA。结论:1、两种稳转细胞系Hep G2.CW和Hep G2.LER细胞能够稳定支持HBV的复制和表达;2、Hep G2.CW对叁种临床常用抗乙肝核苷类药物均敏,Hep G2.LER细胞株对LAM和ETV敏感度下降;3、本文构建的新型sh RNA慢病毒表达载体可作为防治慢性病毒感染如HBV感染的潜在有效手段之一。(本文来源于《河南中医学院》期刊2015-04-30）
王琳[4]（2013）在《我国流行C基因型野生和耐药HBV稳定复制细胞系的建立及应用》一文中研究指出研究背景乙型肝炎病毒（hepatitis B virus, HBV）感染呈世界性流行，不同地区流行强度不同，近30年来预防性乙肝疫苗的广泛使用使得我国成为HBV中度流行性区，但是对于约9300万感染者含2000万慢性乙型肝炎患者的现状，治疗方面仍然面临严峻的挑战。由于乙肝病毒基因组序列的高度异质性，可将其分为9种主要基因型（A-I），各类基因型病毒的生物学特性、对药物的反应性、疾病进展和临床转归都不同，我国最常见的是基因型B和C，是我国HBV患者易进展成为肝纤维化、肝衰竭和罹患肝细胞癌的原因之一。当前，慢乙肝治疗的总体目标是：最大限度地长期抑制HBV，减轻炎症和纤维化，延缓疾病进展及并发症的发生。核苷（酸）类药物（NAs）是临床最常用的抗HBV感染治疗药物，拉米夫定（lamivudine, LAM）、恩替卡韦（entecavir, ETV）、替比夫定（tebivudine, LdT）和阿德福韦酯（adefovir dipivoxil, ADV）四种已在我国上市，替诺福韦酯（tenofovir disoproxil fumarate, TDF）仍处于临床实验阶段，它们直接作用于HBV的逆转录酶（RT）区，可显着抑制病毒的复制却无法清除肝细胞内的共价闭合环状D(covalently closed circular DNA, cccDNA)。因此，长期抗病毒治疗虽然抑制了病毒复制，但预存于准种群中的极少量变异株在药物压力下获得选择性扩增引起病毒突破，导致治疗失败。建立细胞模型是研究病毒感染史、生物学特性，评价药物疗效，优化治疗方案，研发新药疫苗高效便捷的技术手段。病毒感染类细胞模型，由于HBV种属和组织特异性要求严格，培养条件苛刻，对病毒敏感度低，应用受限。以肝癌细胞系为基础的病毒瞬时转染系统难以维持病毒稳定长期的复制，不适于需要标准化的实验，如药敏实验。20余年来国内外建立了一些可以复制和分泌HBV病毒颗粒的稳定细胞系，如世界公认的HepG2.2.15细胞；其他一些实验室为满足抗病毒耐药变异研究的需求，相继建立了耐药突变HBV稳定复制细胞株。但是现有成熟细胞模型存在一些问题：首先是稳定性不高，同时难以模拟自然复制状态；其次缺少我国流行的B和C基因型毒株稳定复制细胞系；另外人为诱导突变细胞株，不能反应病毒的自然遗传特征。直接从中国乙肝患者血清分离克隆野生型或者含有耐药突变位点的HBV全长基因组序列，建立中国流行的基因型稳定复制细胞模型，对于抗病毒药物评价及防治方案的本土化具有积极作用。本研究旨在建立我国流行HBV稳定复制细胞模型，基因来源于中国患者流行的C基因型HBV分离株，利用病毒与HepG2肝癌细胞系基因整合方法获得具有代表性的不同耐药形式的稳定复制细胞系，期望能够用于各种核苷和核苷酸类似物的药敏实验分析，为抗HBV新药药效评价提供理想的细胞模型。目的建立中国患者流行的C基因型野生、恩替卡韦耐药变异和多重耐药变异HBV稳定复制细胞系，能够支持HBV长期高水平复制并稳定表达病毒抗原和分泌完整病毒颗粒，并应用于药物体外抑制HBV作用评价。方法(1)本研究血清样本来源于解放军第302医院确诊的慢性乙型肝炎患者，提取HBVDNA，对逆转录酶区（RT）/表面抗原（S）区进行聚合酶链式反应（PCR）和双向测序分析，根据RT/S区序列应用MEGA4软件进行分子进化树分析并分型，对其中3例具有代表性的C基因型HBV（野生株wt、恩替卡韦耐药株ETVr、多重耐药株MDR）进行全长基因扩增、测序和全长克隆，根据病毒序列特征设计引物，逐步克隆至pCDNA3.1(+)以及pTriEx-mod真核表达载体上，得到1.38倍体及1.1倍体HBV重组复制子，转染HepG2细胞。以新霉素G418筛选具有抗性的阳性细胞克隆，对分泌到上清中的HBV DNA进行全长PCR鉴定。(2)检测分泌上清中HBV表面抗原（HBsAg）和e抗原（HBeAg）以及HBV DNA，保留高表达细胞株，将其有限稀释以获得单一细胞来源的稳定复制细胞系。通过ELISA、免疫组化方法检测病毒主要抗原水平；通过Southern印迹、实时荧光定量PCR检测细胞HBV复制中间体核心颗粒DNA和培养上清中分泌的病毒DNA载量；以滚环扩增结合跨缺口实时荧光定量PCR检测细胞内HBV cccDNA，评估稳定细胞克隆的复制表达情况；通过透射电镜观察证实细胞分泌乙肝病毒颗粒。(3)用目前常见核苷（酸）类似物： LAM、ETV、ADV及TDF四种药物进行药物敏感性实验，评价各细胞株实际应用效果。结果(1)构建C基因型1.38倍HBV野生株以及1.1倍ETVr和MDR表达载体分别为pN31-51-6-1、pTriEX-1.1-63-2、pTriEX-1.1-37-17，经过转染筛选和亚克隆，获得相应的稳定复制细胞克隆分别命名为HepG2.51-6-1、HepG2.A64和HepG2.1403F，培养上清全长PCR产物测序结果与原病毒序列完全一致。(2) HepG2.51-6-1（1.38wt）、HepG2.A64（1.1ETVr）、HepG2.1403F（1.1MDR）建系后具有高抗原表达和稳定复制能力，分别传代60代（29个月）、400代（44个月）和260代（29个月）；平均HBsAg/HBeAg吸光度值为3.25±0.41/3.13±0.47、1.83±0.78/1.32±0.63和2.24±0.74/1.0~8±0.26；免疫组化染色直观可见细胞内病毒蛋白的表达。平均HBV DNA复制水平（分泌上清/核心颗粒）分别为4.53×10~5/4.57×10~7拷贝/ml、1.77×10~5/7.41×10~7拷贝/ml和2.63×10~5/2.34×10~8拷贝/ml；cccDNA分别为9.6、22和6.8个/细胞；Southern blot结果显示存在病毒复制中间体的松弛环状DNA(relaxed circular DNA, rcDNA)、双链DNA(double strands DNA，dsDNA)和单链DNA（single strand，ssDNA）叁条清晰显影带。透射电镜下观察可见到42nm左右大颗粒和20nm左右小球型颗粒。(3)细胞株HepG2.51-6-1对于四种药物均敏感；HepG2.A64对ETV具有高水平的耐药性，同时存在LAM交叉耐药，对ADV和TDF仍然敏感；HepG2.1403F对LAM、ETV和ADV耐药，对TDF敏感。表型耐药分析符合耐药特征。结论成功建立了中国患者流行的C基因型野生、恩替卡韦耐药变异和多重耐药变异HBV稳定复制细胞系HepG2.51-6-1、HepG2.A64和HepG2.1403F，能够支持HBV长期高水平复制并稳定表达病毒抗原和分泌完整病毒颗粒。我们建立的细胞模型改变了一直依赖国外建立的D基因型HepG2.2.15细胞的局面，这些细胞系为我国HBV病毒学及抗病毒研究提供新的工具。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2013-06-05）
王琳,刘文,刘妍,纪冬,思兰兰[5]（2012）在《我国流行的C基因型HBV稳定复制表达细胞系的建立》一文中研究指出目的建立针对中国流行的C基因型HBV稳定复制表达细胞系。方法从1例慢性乙肝患者血清中分离克隆得到1株C基因型病毒DNA全序列,以此为模板扩增产生1.3倍体HBV DNA,它包含完整的3.2kb基因组及从polyA(1825)至2599位点3'端冗余的775bp和至1400位点5'端冗余的425bp序列,将其连接改装后的pCDNA3.1(+)载体成为pN31-51-6-1表达质粒,转染肝癌细胞系HepG2,ELISA检测瞬时表达HBsAg、HBeAg,选择双高表达细胞孔进一步G418筛选稳定表达细胞系。经过ELISA、免疫组化和直接免疫荧光流式细胞术对定性和定量检测病毒抗原表达,以及对细胞HBV复制中间体核心颗粒DNA、cccDNA、培养上清中分泌病毒DNA载量进行荧光定量PCR测定,评估稳定细胞克隆的复制表达情况。结果获得1株具有高抗原表达和高复制能力的细胞克隆HepG2-51-6-1,已以稳定传代26代。检测HBsAg、HBeAg吸光度值为>3.5和1.29,直接免疫荧光流式细胞术证实s抗原在细胞表面存在,免疫组化染色直观可见细胞内病毒的表达。分泌到培养上清中的HBV DNA和细胞内HBV复制中间体水平分别为2.0-104和5.51-105拷贝/ml,HBV cccDNA为6～8拷贝/细胞。结论成功获得HBV-1.3倍体转染的C基因型HBV稳定复制表达细胞系,可为研究我国流行HBV的生物特性和抗HBV新药筛选提供帮助。(本文来源于《第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议论文汇编》期刊2012-04-12）
万剑吟[6]（2011）在《含乳饮料的流行趋势及复合含乳饮料稳定剂的选择》一文中研究指出含乳饮料是指以鲜乳或乳制品为原料,经发酵或未经发酵加工制成的制品,其以风味独特等特点在软饮料行业中独树一帜。从80年代起步,如今已成为软饮料中的重要品种。含乳饮料是一种常见的营养型饮料(本文来源于《食品安全导刊》期刊2011年07期）
王琳,刘文,刘妍,纪冬,思兰兰[7]（2010）在《中国流行的C基因型HBV稳定复制表达细胞系的建立》一文中研究指出目的建立中国流行的C基因型HBV的稳定复制表达细胞系。方法从1例慢性乙肝患者血清中分离克隆得到1株C基因型病毒DNA全序列,以此为模板扩增产生1.3倍体HBV DNA,包含完整基因组(3.2kb)、从1825位点(polyA)至2599位点大小为775bp的3′端冗余序列,以及至1400位点大小为425bp的5′端冗余序列,将其连接改建重组后的pcDNA3.1(+)载体,构建pN31-51-6-1表达质粒,转染肝癌细胞系HepG2。采用ELISA检测HBsAg、HBeAg的瞬时表达情况,选择双高表达细胞孔进一步行G418筛选稳定表达细胞系。通过ELISA、免疫组化、直接免疫荧光流式细胞术以及HBV复制中间体核心颗粒DNA、细胞内cccD-NA、分泌上清中病毒DNA的RT-PCR检测等方法评估稳定细胞克隆的复制表达情况。结果获得1株具有高抗原表达和高复制能力的细胞克隆HepG2-51-6-1,已稳定传代26代。检测HBsAg、HBeAg吸光度(A)值分别为>3.5和1.29;直接免疫荧光流式细胞术证实细胞表面存在s抗原,免疫组化染色可见细胞内病毒表达。分泌到培养上清中的HBV DNA和细胞内的HBV复制中间体水平分别为2.0×104和5.5×105拷贝/ml,HBVccc DNA为6～8拷贝/细胞。结论成功获得HBV-1.3倍体转染的C基因型HBV稳定复制表达细胞系,为研究我国流行HBV的生物特性和抗HBV新药筛选奠定了基础。(本文来源于《解放军医学杂志》期刊2010年12期）
朱磊[8]（2007）在《职业资格考试用书成盗版商新宠》一文中研究指出在湖南省长沙市看守所里，37岁的梁云此时正在这里等待法律对他的制裁。作为长沙“1·28”重大贮存盗版图书案的主要犯罪嫌疑人，梁云和他的同伙共同制造了湖南省近年来最大的一起图书盗版案件。从全国“扫黄打非”办接到举报电话，到主犯梁云落入法网，前后(本文来源于《法制日报》期刊2007-07-26）
马红霞,于湘晖,姜春来,吴永革,孔维[9]（2006）在《中国流行株HIV-1B/C重组亚型包膜蛋白真核表达载体的构建及稳定表达细胞株的筛选》一文中研究指出目的获得高质量的中国流行株HIV-1B/C重组亚型包膜蛋白抗原。方法改造表达载体,以构建中国流行株HIV-1B/C重组亚型包膜蛋白基因带有筛选标记的真核细胞表达质粒,将所构建质粒转染真核细胞,用含有抗性的培养基筛选出能够高效、持续表达包膜蛋白的稳定表达细胞株。结果所构建的表达载体pVRPEnv转染细胞后可表达目的蛋白,并建立了稳定表达细胞系。结论获得了可以高效、持续稳定表达中国流行株HIV-1B/C重组亚型包膜蛋白的细胞株。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2006年04期）
陈彩虹[10]（2006）在《韩国人谁先“下岗”？》一文中研究指出金融危机后韩国经济结构和企业资本结构发生了巨大变化。危机之前，大型企业集团、金融机构等，不是受到政府支持的完全韩资企业集团，就是很纯粹的政府资本机构。金融危机强迫性地打开了韩国市场，外国资本在如今韩国的大企业集团和金融机构中，已经占有了很大的份额。(本文来源于《财经时报》期刊2006-01-09）
稳定流行论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的筛选大流行流感疫苗的稳定剂。方法将流感病毒株Influenza A/Vietnam/1194/2004(H5N1)接种Vero细胞制备5批疫苗原液,加入Al(OH)3吸附制备成品疫苗。取同一批疫苗原液,分成5份,分别加入吐温-80(20μg/ml)及0.5%、1%和2%人血白蛋白稳定剂,以不加入稳定剂的疫苗原液作为空白对照,于37℃放置4周,检测流感病毒的血凝滴度,筛选疫苗的稳定剂;将加入筛选出的稳定剂的5批疫苗原液及3批成品疫苗于37℃放置不同时间,检测血凝素(hemagglutinin,HA)含量。结果不加入稳定剂的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度明显下降;加入20μg/ml吐温-80和0.5%人血白蛋白的疫苗原液37℃放置1周后,血凝滴度亦明显下降;而加入1%和2%人血白蛋白的疫苗原液于37℃放置4周,血凝滴度仍未下降,后续试验选择1%人血白蛋白作为疫苗稳定剂。加入1%人血白蛋白的5批疫苗原液于37℃放置1~4周与放置前比较,HA含量差异均无统计学意义(P>0.05);加入1%人血白蛋白的3批成品疫苗37℃放置6周,疫苗HA含量有下降趋势,37℃放置1~5周,相邻两周间HA含量差异无统计学意义(P>0.05),放置5周,HA含量下降幅度≤1μg/ml。结论 1%人血白蛋白对流感病毒具有良好的稳定作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
稳定流行论文参考文献
[1].杨悦,高俪,许智慧,余双庆,李瑞生.中国流行株C基因型HBV稳定复制表达小鼠模型的建立[J].解放军医学杂志.2016
[2].周庆玲,于晶,谢英林,李春艳,韩云飞.大流行流感疫苗稳定剂的筛选[J].中国生物制品学杂志.2015
[3].张婷玉.乙型肝炎病毒中国流行株C基因型稳定转染细胞模型的评价与应用[D].河南中医学院.2015
[4].王琳.我国流行C基因型野生和耐药HBV稳定复制细胞系的建立及应用[D].中国人民解放军军事医学科学院.2013
[5].王琳,刘文,刘妍,纪冬,思兰兰.我国流行的C基因型HBV稳定复制表达细胞系的建立[C].第二届全国病毒性肝炎慢性化重症化基础与临床研究进展学术会议论文汇编.2012
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[8].朱磊.职业资格考试用书成盗版商新宠[N].法制日报.2007
[9].马红霞,于湘晖,姜春来,吴永革,孔维.中国流行株HIV-1B/C重组亚型包膜蛋白真核表达载体的构建及稳定表达细胞株的筛选[J].中国生物制品学杂志.2006
[10].陈彩虹.韩国人谁先“下岗”？[N].财经时报.2006