丁珊:磷酸化对UCHL3体外去泛素化酶活性的影响论文

丁珊:磷酸化对UCHL3体外去泛素化酶活性的影响论文

本文主要研究内容

作者丁珊,任禹静,姜凌,梅子青(2019)在《磷酸化对UCHL3体外去泛素化酶活性的影响》一文中研究指出:泛素羧基末端水解酶L3(ubiquitin C-terminal hydrolase-L3,UCHL3)是真核细胞泛素羧基末端水解酶家族(ubiquitin C-terminal hydrolases,UCHs)的重要成员,参与了DNA损伤修复等过程。近期研究表明,UCHL3不仅在体外条件下可以切割C端用香豆素修饰的泛素分子(C-terminal conjugate of ubiquitin with 7-amino-4-methylcoumarin,Ub-AMC),当UCHL3上第75位的丝氨酸(Ser75)发生磷酸化后,其在细胞内切割多聚泛素链的活性也明显增强,但这种磷酸化调控尚缺乏体外证据支持。基于此,利用点突变及多种层析技术制备了野生型UCHL3(UCHL3WT)和模拟磷酸化的UCHL3蛋白(UCHL3S75E),在体外生化水平上研究了磷酸化对UCHL3的泛素链切割活性的影响。体外泛素切割实验显示,与UCHL3WT相比,UCHL3S75E切割Ub-AMC的活性提高了70%,但仍不能展现生理水平上的二泛素(di-ubiquitin,diub)切割活性,暗示UCHL3切割泛素链的机制更为复杂。同时,系统发育树与序列对比分析显示,发生磷酸化的Ser75仅存在于UCHL3中,在其他UCH家族成员中并不保守,表明基于Ser75的磷酸化调控是UCHL3所特有的。此外,UCHL3在众多真核生物中高度保守,暗示着该蛋白的磷酸化调控机制在进化上的保守性。研究结果拓展了对UCHL3磷酸化修饰调控的认识,为深入研究其生理角色奠定了基础。

Abstract

fan su suo ji mo duan shui jie mei L3(ubiquitin C-terminal hydrolase-L3,UCHL3)shi zhen he xi bao fan su suo ji mo duan shui jie mei jia zu (ubiquitin C-terminal hydrolases,UCHs)de chong yao cheng yuan ,can yu le DNAsun shang xiu fu deng guo cheng 。jin ji yan jiu biao ming ,UCHL3bu jin zai ti wai tiao jian xia ke yi qie ge Cduan yong xiang dou su xiu shi de fan su fen zi (C-terminal conjugate of ubiquitin with 7-amino-4-methylcoumarin,Ub-AMC),dang UCHL3shang di 75wei de si an suan (Ser75)fa sheng lin suan hua hou ,ji zai xi bao nei qie ge duo ju fan su lian de huo xing ye ming xian zeng jiang ,dan zhe chong lin suan hua diao kong shang que fa ti wai zheng ju zhi chi 。ji yu ci ,li yong dian tu bian ji duo chong ceng xi ji shu zhi bei le ye sheng xing UCHL3(UCHL3WT)he mo ni lin suan hua de UCHL3dan bai (UCHL3S75E),zai ti wai sheng hua shui ping shang yan jiu le lin suan hua dui UCHL3de fan su lian qie ge huo xing de ying xiang 。ti wai fan su qie ge shi yan xian shi ,yu UCHL3WTxiang bi ,UCHL3S75Eqie ge Ub-AMCde huo xing di gao le 70%,dan reng bu neng zhan xian sheng li shui ping shang de er fan su (di-ubiquitin,diub)qie ge huo xing ,an shi UCHL3qie ge fan su lian de ji zhi geng wei fu za 。tong shi ,ji tong fa yo shu yu xu lie dui bi fen xi xian shi ,fa sheng lin suan hua de Ser75jin cun zai yu UCHL3zhong ,zai ji ta UCHjia zu cheng yuan zhong bing bu bao shou ,biao ming ji yu Ser75de lin suan hua diao kong shi UCHL3suo te you de 。ci wai ,UCHL3zai zhong duo zhen he sheng wu zhong gao du bao shou ,an shi zhao gai dan bai de lin suan hua diao kong ji zhi zai jin hua shang de bao shou xing 。yan jiu jie guo ta zhan le dui UCHL3lin suan hua xiu shi diao kong de ren shi ,wei shen ru yan jiu ji sheng li jiao se dian ding le ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自生物技术进展的丁珊,任禹静,姜凌,梅子青,发表于刊物生物技术进展2019年05期论文,是一篇关于磷酸化调控论文,泛素切割活性论文,损伤修复论文,生物技术进展2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自生物技术进展2019年05期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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