本文主要研究内容
作者徐缘（2019）在《酿酒酵母细胞中MTM1基因对镍离子代谢调节机制的研究》一文中研究指出：镍在地球中的含量仅次于硅、氧、铁、镁,位居第五位。随着镍在工业生产上和人类生活中的广泛应用,环境中镍污染已经成为国内外研究的热点问题。尽管镍在自然界中分布很广,但在人体内含量却极微,过量的镍会对生物体造成了严重的毒害作用。镍在能量代谢和氮循环中起着重要作用,是生物体生长发育的必需元素。在原核生物中镍离子作为多种酶的辅因子已经有较为全面的研究,但在真核生物中镍的代谢机制并不清晰,有待进一步解析。因此对于镍的代谢研究,无论是从生命机理本身还是解决实际镍的环境污染问题都具有重大意义。本课题以真核生物酿酒酵母细胞作为研究模型,利用分子生物学和遗传学的方法研究镍离子的代谢机制。通过高镍培养产生自发突变菌株并进行全基因组测序,用生物信息学的方法分析筛选出与镍代谢相关的基因,对其与镍的相互作用机制进行阐明。突变体基因组测序表明MTM1基因敲除菌株(mtm1?)在高镍条件下的生长显著优于野生型菌株,过量表达则表现出对镍的敏感性。镍处理测定结果表明MTM1基因敲除菌株内镍的含量与野生型相比无显著差别,而敲除株线粒体的镍含量则显著低于野生型菌株水平。体内实验证明镍离子能够恢复含锰超氧化物歧化酶(SOD2)的活性,体外处理一样能够恢复其活性。q RT-PCR和β-半乳糖苷酶报告基因实验结果显示mtm1?菌株SOD2 m RNA表达水平高于野生型水平,镍处理则降低SOD2 m RNA表达水平。MTM1基因敲除导致细胞体内氧化压力升高,但环境氧化压力并不影响mtm1?菌株对镍的抗性。蛋白印迹法结果表明过量镍离子处理显著降低Mtm1蛋白的稳定性,而绿色荧光蛋白GFP标记法显示镍离子并不改变Mtm1蛋白在细胞内的定位。本论文研究结果证实了酿酒酵母细胞中MTM1基因调节镍离子在线粒体中的分布,并且镍离子能够恢复SOD2的活性,从而使mtm1?菌株对镍离子表现出高抗性。同时过量镍离子并不改变Mtm1蛋白在细胞内的定位,但显著降低Mtm1蛋白的稳定性。我们的研究首次发现了在真核生物中MTM1基因参与镍的代谢平衡并为治疗镍离子代谢相关疾病提供理论依据。
Abstract
nie zai de qiu zhong de han liang jin ci yu gui 、yang 、tie 、mei ,wei ju di wu wei 。sui zhao nie zai gong ye sheng chan shang he ren lei sheng huo zhong de an fan ying yong ,huan jing zhong nie wu ran yi jing cheng wei guo nei wai yan jiu de re dian wen ti 。jin guan nie zai zi ran jie zhong fen bu hen an ,dan zai ren ti nei han liang que ji wei ,guo liang de nie hui dui sheng wu ti zao cheng le yan chong de du hai zuo yong 。nie zai neng liang dai xie he dan xun huan zhong qi zhao chong yao zuo yong ,shi sheng wu ti sheng chang fa yo de bi xu yuan su 。zai yuan he sheng wu zhong nie li zi zuo wei duo chong mei de fu yin zi yi jing you jiao wei quan mian de yan jiu ,dan zai zhen he sheng wu zhong nie de dai xie ji zhi bing bu qing xi ,you dai jin yi bu jie xi 。yin ci dui yu nie de dai xie yan jiu ,mo lun shi cong sheng ming ji li ben shen hai shi jie jue shi ji nie de huan jing wu ran wen ti dou ju you chong da yi yi 。ben ke ti yi zhen he sheng wu niang jiu jiao mu xi bao zuo wei yan jiu mo xing ,li yong fen zi sheng wu xue he wei chuan xue de fang fa yan jiu nie li zi de dai xie ji zhi 。tong guo gao nie pei yang chan sheng zi fa tu bian jun zhu bing jin hang quan ji yin zu ce xu ,yong sheng wu xin xi xue de fang fa fen xi shai shua chu yu nie dai xie xiang guan de ji yin ,dui ji yu nie de xiang hu zuo yong ji zhi jin hang chan ming 。tu bian ti ji yin zu ce xu biao ming MTM1ji yin qiao chu jun zhu (mtm1?)zai gao nie tiao jian xia de sheng chang xian zhe you yu ye sheng xing jun zhu ,guo liang biao da ze biao xian chu dui nie de min gan xing 。nie chu li ce ding jie guo biao ming MTM1ji yin qiao chu jun zhu nei nie de han liang yu ye sheng xing xiang bi mo xian zhe cha bie ,er qiao chu zhu xian li ti de nie han liang ze xian zhe di yu ye sheng xing jun zhu shui ping 。ti nei shi yan zheng ming nie li zi neng gou hui fu han meng chao yang hua wu qi hua mei (SOD2)de huo xing ,ti wai chu li yi yang neng gou hui fu ji huo xing 。q RT-PCRhe β-ban ru tang gan mei bao gao ji yin shi yan jie guo xian shi mtm1?jun zhu SOD2 m RNAbiao da shui ping gao yu ye sheng xing shui ping ,nie chu li ze jiang di SOD2 m RNAbiao da shui ping 。MTM1ji yin qiao chu dao zhi xi bao ti nei yang hua ya li sheng gao ,dan huan jing yang hua ya li bing bu ying xiang mtm1?jun zhu dui nie de kang xing 。dan bai yin ji fa jie guo biao ming guo liang nie li zi chu li xian zhe jiang di Mtm1dan bai de wen ding xing ,er lu se ying guang dan bai GFPbiao ji fa xian shi nie li zi bing bu gai bian Mtm1dan bai zai xi bao nei de ding wei 。ben lun wen yan jiu jie guo zheng shi le niang jiu jiao mu xi bao zhong MTM1ji yin diao jie nie li zi zai xian li ti zhong de fen bu ,bing ju nie li zi neng gou hui fu SOD2de huo xing ,cong er shi mtm1?jun zhu dui nie li zi biao xian chu gao kang xing 。tong shi guo liang nie li zi bing bu gai bian Mtm1dan bai zai xi bao nei de ding wei ,dan xian zhe jiang di Mtm1dan bai de wen ding xing 。wo men de yan jiu shou ci fa xian le zai zhen he sheng wu zhong MTM1ji yin can yu nie de dai xie ping heng bing wei zhi liao nie li zi dai xie xiang guan ji bing di gong li lun yi ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自上海师范大学的徐缘，发表于刊物上海师范大学2019-06-17论文，是一篇关于镍离子论文,基因论文,线粒体论文,代谢论文,超氧化物歧化酶论文,上海师范大学2019-06-17论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自上海师范大学2019-06-17论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。