导读:本文包含了特异性结合肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:棉铃虫,ABCC1,苏云金芽孢杆菌,Cry1Ac
特异性结合肽论文文献综述
陈琳,魏纪珍,刘臣,牛琳琳,张彩虹[1]（2019）在《棉铃虫中肠特异性结合蛋白ABCC1对Cry1Ac毒力的影响》一文中研究指出【目的】研究棉铃虫(Helicoverpa armigera)中肠蛋白ABCC1(HaABCC1)与Cry1Ac的结合特性及对Cry1Ac毒力的影响,明确HaABCC1在Cry1Ac杀虫机制中的作用。【方法】分析HaABCC1基因序列,设计引物,通过原核表达得到HaABCC1两个跨膜区片段的蛋白,与Cry1Ac进行Ligand blot试验,验证其与Cry1Ac的体外结合特性;利用RNAi技术干扰棉铃虫幼虫的HaABCC1,在3龄幼虫腹部注射siABCC1,比较HaABCC1的表达量及Cry1Ac处理后棉铃虫死亡率的变化;通过细胞转染将ABCC1导入Sf9细胞系中,确定pAc-ABCC1重组质粒转入Sf9细胞后,用细胞生物测定的方法比较Cry1Ac处理后细胞死亡率的变化;比较敏感品系(96S)和Cry1Ac抗性品系(BtR)棉铃虫的HaABCC1基因全长序列,并通过荧光定量RT-PCR检测HaABCC1在抗、感棉铃虫中的表达量。【结果】HaABCC1跨膜区TMD1和TMD2在Escherichia coli BL21(DE3)感受态细胞中成功表达,两个HaABCC1跨膜区片段蛋白均能与活化的Cry1Ac在体外结合;棉铃虫注射siABCC1后,HaABCC1的表达量显着下降,与未注射的棉铃虫、注射DEPC水和siEGFP的棉铃虫相比,用活化的Cry1Ac蛋白处理HaABCC1被干扰的棉铃虫,其幼虫死亡率显着降低,表明棉铃虫幼虫的HaABCC1被干扰后,能显着降低Cry1Ac对棉铃虫的毒力;用活化的Cry1Ac蛋白处理成功转入HaABCC1的Sf9细胞,与对照Sf9细胞相比,细胞的死亡率明显上升,表明将HaABCC1导入Sf9后能显着提高Cry1Ac处理后的细胞死亡率;抗性品系(BtR)与敏感品系(96S)棉铃虫的HaABCC1氨基酸序列没有差别,但抗性品系BtR棉铃虫HaABCC1的表达量显着降低。【结论】HaABCC1是Cry1Ac的特异性结合蛋白,可能是Cry1Ac的功能受体蛋白,并可能参与对Cry1Ac的抗性机制。(本文来源于《中国农业科学》期刊2019年19期）
刘国民,卢天成,冀璇,贾汶沅,李亚龙[2]（2019）在《与胶原特异性结合的BMP2模拟肽/PLGA3D打印复合支架的制备及成骨诱导活性》一文中研究指出将胶原绑定结构域(CBD)多肽序列与骨形态发生蛋白2模拟肽(BMP2-MP)序列连接制备具有胶原绑定能力的CBD-BMP2-MP,再将CBD-BMP2-MP与聚丙交酯-乙交酯/胶原(PLGA/COL) 3D打印支架相结合,以支架表面的胶原成分为媒介,将CBD-BMP2-MP更有效地固定于骨修复材料上,达到对其进行改性的目的.利用扫描电子显微镜(SEM)、电子万能试验机和接触角测量仪对复合支架表面形貌、力学强度和亲水性等材料学性能进行评价.用荧光成像法评测CBD-BMP2-MP及BMP2-MP与支架材料的结合能力.在各组支架材料表面接种MC3T3-E1细胞进行体外培养,采用CCK-8、鬼笔环肽荧光染色、茜素红染色及q PCR综合评价细胞在材料表面的黏附、增殖和成骨分化等细胞行为,研究CBD-BMP2-MP修饰的3D多孔PLGA/COL复合支架的生物学性能.研究结果表明,利用3D打印技术制备的多孔支架具有形貌可控的孔隙结构,为细胞生长创造更有利的细胞微环境,支架表面胶原成分的加入提高了支架材料的亲水性,同时对支架材料本身的力学性能无任何影响,提高了复合支架本身的生物相容性.与普通BMP2-MP相比,CBD-BMP2-MP具有更好的胶原绑定能力,与复合支架的结合更稳定,提高了PLGA/COL复合支架对BMP2-MP的负载能力.支架表面负载CBD-BMP2-MP后具有极强的促细胞成骨分化能力. MC3T3-E1细胞表现出更高的钙沉积能力,并且成骨分化相关基因Runx2,ALP,COL-I及OPN等水平也有了明显提升.表明CBD-BMP2-MP多孔复合支架具有良好的生物相容性和成骨诱导活性,在骨组织修复领域具有良好的应用前景.(本文来源于《高等学校化学学报》期刊2019年07期）
董利军,梁忠喆,刘通,王大军,王琦[3]（2019）在《结核分枝杆菌分泌蛋白Rv0674的特异性结合肽的筛选》一文中研究指出目的制备结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)分泌蛋白Rv0674,筛选与Rv0674蛋白特异性结合的肽分子。方法用PCR从MTB(H37Rv)基因组中扩增出Rv0674基因。克隆到pEASY-E1表达载体上,将测序验证正确的重组表达质粒转化入E. coli BL21中,用IPTG诱导蛋白表达,Ni2+亲和层析法纯化目的蛋白。通过SDS-PAGE和Western blot鉴定后,将纯化后的Rv0674蛋白包被到96孔板上,再利用噬菌体展示技术,经过连续4轮特异性亲和筛选,对第4轮产物随机挑取单独的噬菌斑,提取基因组并测序,用SnapGene 4.1.4比对并翻译多肽的基因序列。结果构建了Rv0674序列正确的重组表达质粒,获得分子量约为26.5kD的可溶性Rv0674蛋白。从第4轮的洗脱物中,随机挑选40个噬菌斑。测序结果可翻译成10种多肽分子,其中重复19次的多肽序列为TSTMMMHMNL。结论通过噬菌体展示技术筛选到TSTMMMHMNL多肽序列,对Rv0674蛋白的亲和力和特异性最好。(本文来源于《宁夏医科大学学报》期刊2019年06期）
华影,陈丽萍,李生,周发友,唐晓磊[4]（2019）在《特异性结合幽门螺杆菌黏附蛋白A(HpaA)核酸适配子的筛选及鉴定》一文中研究指出目的通过指数富集的配体系统进化技术(SELEX)筛选特异性结合幽门螺杆菌(H.pylori)黏附蛋白A(HpaA)的核酸适配子,并鉴定其结合特性。方法构建pET28a/HpaA原核表达质粒并诱导表达纯化重组HpaA蛋白;以重组HpaA蛋白为靶标利用SELEX技术筛选出能够与HpaA具有高特异性、高亲和力结合的核酸适配子。随后利用筛选所得HpaA适配子通过体外实验验证与H.pylori菌体的结合以及对临床胃黏膜切片中H.pylori的检测效能。结果本研究培养并提取ATCC26695菌株基因组,通过PCR扩增HpaA部分基因长度约699 bp,并成功克隆构建了原核表达质粒pET28a/HpaA。经异丙基β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达、纯化获得纯度约98%的重组HpaA蛋白作为筛选靶标。利用SELEX技术通过10轮正向筛选和5轮的负向筛选,获得6条与HpaA高亲和力的适配子分别命名为HA1～HA6。其中适配子HA6具有较高的亲和力和特异性,且适配子HA6核心序列在体外仍表现出与H.pylori菌体较高的结合力;利用羟基荧光素(FAM)标记的HA6适配子对166例H.pylori感染的患者胃黏膜中H.pylori进行检测,检出率为94.58%,高于同批次快速脲酶检测法的检出率(87.95%)。结论本研究筛选出的特异性结合H.pylori菌体表面HpaA的适配子,可能作为一种新的方法应用于胃黏膜组织中H.pylori的检测。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年06期）
宋铱航,刘思雪,简嘉甫,黄花荣,钟英强[5]（2019）在《CCR5第一、二胞外环特异性结合短肽对大鼠损伤性结肠上皮细胞的重建作用与机制》一文中研究指出目的探究CC趋化因子受体5(CCR5)第一、二胞外环拮抗短肽对大鼠损伤性结肠上皮细胞的重建作用与机制。方法原代培养大鼠结肠上皮细胞并鉴定;建立由TNF-α诱导的损伤性结肠上皮细胞模型;CCK8法检测两短肽(分别简称GH和HY短肽)对损伤性上皮细胞生长的影响;实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测各组(正常对照组、损伤模型组、各浓度GH短肽组、各浓度HY短肽组)黏蛋白2、occludin、CCR5、表皮生长因子(EGF)、叁叶因子3(TFF3)的mRNA和蛋白表达水平。结果 150 ng/ml TNF-α作用细胞48 h后可获得损伤性上皮细胞;GH和HY短肽在0.125～0.500 mg/ml浓度下均能促进损伤性上皮细胞增殖;0.125～0.500 mg/ml浓度的GH短肽组和HY短肽组occludin、EGF、TFF3的mRNA和蛋白水平均比损伤模型组高(P均<0.05);0.500 mg/ml浓度的GH短肽组和HY短肽组黏蛋白2的mRNA和蛋白的表达均比损伤模型组高(P均<0.05);0.250～1.000 mg/ml浓度的GH短肽组、0.500～1.000mg/ml浓度的HY短肽组CCR5的mRNA和蛋白表水平达均比损伤模型组低(P均<0.05)。结论CCR5第一、二胞外环特异性结合短肽在一定浓度范围内可促进损伤性上皮细胞的增殖,其机制可能与促进黏蛋白2、occludin、EGF、TFF3的表达有关。(本文来源于《新医学》期刊2019年05期）
陈琳[6]（2019）在《棉铃虫中肠特异性结合蛋白ABCC1对Cry2Ab、Cry1Ac毒力的影响》一文中研究指出昆虫中肠BBMV上的特异性受体蛋白与Bt蛋白结合是Bt发挥杀虫作用的关键,而且特异性受体蛋白发生基因突变或表达量显着改变都可能会使昆虫对Bt产生抗性。已有研究结果表明ABC转运蛋白家族不仅是Cry1A类蛋白的受体,而且ABC转运蛋白的突变与害虫对Bt产生抗性相关。本文在获得了棉铃虫ABCC1基因全长的基础上,对ABCC1在棉铃虫不同组织、不同龄期中的表达量、ABCC1与Cry2Ab、Cry1Ac在体外结合特性及ABCC1对Cry2Ab、Cry1Ac毒力的影响等进行了研究。研究结果可为明确棉铃虫ABCC1蛋白在Cry2Ab、Cry1Ac杀虫机制中的作用、为合理应用Cry2Ab、Cry1Ac用于棉铃虫的防治及延缓棉铃虫抗性发展提供理论依据。主要研究结果如下:1.利用PCR结合RACE-PCR克隆了棉铃虫ABCC1基因全长,并进行了生物信息学分析。ABCC1基因开放阅读框共4545bp,基因登录号:Gen Bank KY 796050。共编码1515个氨基酸,预测蛋白质的相对分子量169.75 k Da,等电点6.68;N末端不存在信号肽;有两个较大的膜外区域,有14个跨膜结构;含两个跨膜结构域和两个核苷酸结构域;有14个较分散的N-糖基化位点,有16个较集中的O-糖基化位点。系统进化树系显示不同鳞翅目昆虫ABCC1-3基因具有密切的亲缘关系,棉铃虫ABCC1与斜纹夜蛾、脐橙螟、玉带凤蝶、柑橘凤蝶的ABCC1基因亲缘关系最接近。2.ABCC1基因在棉铃虫不同发育阶段均有表达,在四龄、五龄幼虫中表达量最高,在成虫中最低;在不同组织中均有表达,在马氏管中表达量最高,在前肠中表达量最低。3.构建原核表达载体在大肠杆菌中表达ABCC1两个跨膜结构域蛋白并纯化,通过蛋白质谱验证表达正确;Ligand blot实验结果表明ABCC1两个跨膜结构域均能与Cry2Ab、Cry1Ac蛋白在体外结合。4.棉铃虫ABCC1被干扰48 h后,ABCC1基因表达量显着降低;注射si ABCC1的棉铃虫与不注射、注射DEPC水和si EGFP的棉铃虫相比,用Cry2Ab、Cry1Ac蛋白处理后,幼虫死亡率显着下降。构建PAC-ABCC1重组质粒并转入Sf9细胞系中,通过PCR检测转染成功;导入PAC-ABCC1重组质粒的Sf9细胞较转入PAC空质粒的Sf9细胞对Cry2Ab、Cry1Ac蛋白的敏感性显着升高。5.比较敏感棉铃虫品系(96S)和Cry1Ac-抗性棉铃虫品系(Bt R)ABCC1基因序列,发现ABCC1基因在抗性及敏感棉铃虫中编码区氨基酸序列没有差异;但与敏感品系棉铃虫相比,抗性品系中ABCC1的表达量显着降低,敏感品系棉铃虫ABCC1的表达量约是抗性品系的2.5倍。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
章旭日,白占涛,刘霞[7]（2019）在《蝎毒素多肽与钠通道特异性结合位点研究进展》一文中研究指出蝎毒素多肽是一种通道门控调节剂,早先研究发现其通过与离子通道的电压感受域结合影响通道的门控特性。新近研究表明,门控调解剂毒素与离子通道孔区也具有额外结合位点。因此,本文就蝎毒素多肽与钠通道特异性结合位点相关研究展开综述,以梳理门控调节剂毒素的结构与调节功能,为蝎毒素多肽与钠通道结合位点结构与功能的解析提供依据,也为靶向钠通道药物的设计与开发提供参考。(本文来源于《延安大学学报(自然科学版)》期刊2019年01期）
杨云鹏,何丽萍,鲍劲宵,戚逸飞,张增辉[8]（2019）在《细胞周期依赖性激酶2与其抑制剂的残基特异性结合的计算分析（英文）》一文中研究指出细胞周期依赖性激酶2(CDK2)是细胞周期调控中的关键大分子.在癌细胞中,CDK2常被过度表达,因此抑制CDK2的表达是治疗乳腺癌、白血病和淋巴瘤等多种癌症有效的方法,在分子水平上定量表征CDK2与其抑制剂之间的相互作用,可为药物开发提供更深入的蛋白质与抑制剂的相互作用机制和线索,本文采用计算丙氨酸扫描和相互作用熵方法,研究CDK2与13种抑制剂结合的微观机制,该方法得到的结合自由能与实验值之间的相关系数为0.76～0.83.计算结果揭示了这13种抑制剂中的两种结合模式,即范德华占优势和静电占优势.通过将总能量分解为每个残基的贡献,确定了结合过程中五个疏水残基为热点残基,同时发现了能够决定CDK2与抑制剂结合强度的残基.(本文来源于《Chinese Journal of Chemical Physics》期刊2019年01期）
张帆,贾昕,姚红,逯晓青,郭超[9]（2019）在《噬菌体展示技术筛选人乳腺髓样癌细胞特异性结合肽》一文中研究指出目的利用噬菌体随机七肽库体外筛选与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞特异性结合的小分子多肽。方法培养人乳腺髓样癌Bcap-37细胞作为靶细胞,人正常乳腺上皮细胞MCF-10A为吸附细胞,将噬菌体展示随机七肽库与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞进行减性体外筛选,用ELISA法鉴定噬菌体对人乳腺癌Bcap-37细胞的亲和力。提取亲和力较高的单克隆噬菌体DNA,测定DNA序列并翻译出相应的氨基酸序列,进行同源性分析。结果利用噬菌体随机七肽库通过4轮减性筛选获得了与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞特异结合的小分子多肽。ELISA法表明,第1,3,5,6,8,12,14,16,17,18和20号单克隆噬菌体与人乳腺髓样癌Bcap-37细胞有很强的亲和力和特异性。测序结果显示,重复性最高的序列为LXRNTNX。结论利用噬菌体展示技术体外筛选获得了能与人乳腺癌Bcap-37细胞特异性结合的小分子多肽LXRNTNX,经检索该肽段与已知蛋白尚无同源性,因此它很有可能成为乳腺癌的早期诊断和靶向治疗新的靶点。(本文来源于《山西医科大学学报》期刊2019年02期）
朱瑞,刘莉,金丽娟,高小芳,王方[10]（2019）在《利用噬菌体七肽库筛选获得阿尔茨海默病β-分泌酶特异性结合肽的研究》一文中研究指出目的利用Ph.D.-C7C噬菌体七肽库进行体外筛选(biopanning),从而获得阿尔茨海默病β-分泌酶表面特异性结合肽,并鉴定其与β-分泌酶(BACE1)的结合能力。方法以BACE1(Sigma company)为包被抗原,利用噬菌体展示技术,经过连续4轮生物淘洗,随机挑选噬菌体阳性单克隆进行DNA测序并合成七肽,利用ELISA法鉴定所选七肽与BACE1结合的特异性。结果筛选出的噬菌体LPLDSPL与BACE1有较高的亲和性及特异性。结论阳性噬菌体表面展示的多肽LPLDSPL可能对阿尔茨海默病β-分泌酶产生抑制作用,为阿尔茨海默病提供新的治疗药物。(本文来源于《宁夏医学杂志》期刊2019年01期）
特异性结合肽论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
将胶原绑定结构域(CBD)多肽序列与骨形态发生蛋白2模拟肽(BMP2-MP)序列连接制备具有胶原绑定能力的CBD-BMP2-MP,再将CBD-BMP2-MP与聚丙交酯-乙交酯/胶原(PLGA/COL) 3D打印支架相结合,以支架表面的胶原成分为媒介,将CBD-BMP2-MP更有效地固定于骨修复材料上,达到对其进行改性的目的.利用扫描电子显微镜(SEM)、电子万能试验机和接触角测量仪对复合支架表面形貌、力学强度和亲水性等材料学性能进行评价.用荧光成像法评测CBD-BMP2-MP及BMP2-MP与支架材料的结合能力.在各组支架材料表面接种MC3T3-E1细胞进行体外培养,采用CCK-8、鬼笔环肽荧光染色、茜素红染色及q PCR综合评价细胞在材料表面的黏附、增殖和成骨分化等细胞行为,研究CBD-BMP2-MP修饰的3D多孔PLGA/COL复合支架的生物学性能.研究结果表明,利用3D打印技术制备的多孔支架具有形貌可控的孔隙结构,为细胞生长创造更有利的细胞微环境,支架表面胶原成分的加入提高了支架材料的亲水性,同时对支架材料本身的力学性能无任何影响,提高了复合支架本身的生物相容性.与普通BMP2-MP相比,CBD-BMP2-MP具有更好的胶原绑定能力,与复合支架的结合更稳定,提高了PLGA/COL复合支架对BMP2-MP的负载能力.支架表面负载CBD-BMP2-MP后具有极强的促细胞成骨分化能力. MC3T3-E1细胞表现出更高的钙沉积能力,并且成骨分化相关基因Runx2,ALP,COL-I及OPN等水平也有了明显提升.表明CBD-BMP2-MP多孔复合支架具有良好的生物相容性和成骨诱导活性,在骨组织修复领域具有良好的应用前景.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
特异性结合肽论文参考文献
[1].陈琳,魏纪珍,刘臣,牛琳琳,张彩虹.棉铃虫中肠特异性结合蛋白ABCC1对Cry1Ac毒力的影响[J].中国农业科学.2019
[2].刘国民,卢天成,冀璇,贾汶沅,李亚龙.与胶原特异性结合的BMP2模拟肽/PLGA3D打印复合支架的制备及成骨诱导活性[J].高等学校化学学报.2019
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[6].陈琳.棉铃虫中肠特异性结合蛋白ABCC1对Cry2Ab、Cry1Ac毒力的影响[D].中国农业科学院.2019
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[9].张帆,贾昕,姚红,逯晓青,郭超.噬菌体展示技术筛选人乳腺髓样癌细胞特异性结合肽[J].山西医科大学学报.2019
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