集中延伸运动论文-杨阳

集中延伸运动论文-杨阳

导读:本文包含了集中延伸运动论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:集中延伸运动,Sun1,Sun2,β-catenin

集中延伸运动论文文献综述

杨阳[1](2013)在《SUN1/2对斑马鱼集中延伸运动的调节及其机制的研究》一文中研究指出SUN结构域蛋白(SAD1/UNC84domain containing protein)是一类C端含有保守SUN结构域的蛋白,该结构域与酿酒酵母中的SAD1蛋白和线虫中UNC-84蛋白有很高的同源性。目前,在哺乳动物中已发现的SUN结构域蛋白至少有四个,包括SUN1、SUN2、SUN3和SPAG4。其中SUN1和SUN2在哺乳动物各组织中广泛表达,SUN3和SPAG4表达较少。在结构上,哺乳动物中SUN1和SUN2蛋白的N端均定位于细胞核内,与核纤层蛋白相互连接,而其包含SUN结构功能域的C端则定位于双层核膜之间,通过Nesprin蛋白与细胞骨架相连。SUN1/2蛋白通过这种结构形成LINC (linker of nucleoskeleton and cytoskeleton)复合体,直接与细胞骨架和核骨架相连接,因此SUN1/2蛋白被认为在细胞核定位和迁移上具有非常重要的作用。研究表明,Sun1/2双敲小鼠(Sun1-/-; Sun2-/-)在胚胎发育早期死亡,提示SUN1/2蛋白可能在早期胚胎发育中起到极其重要的作用。虽然SUN1/2蛋白在核定位和迁移中的功能已经有所报道,但是其在胚胎早期发育特别是原肠运动中的作用还没有相关研究。原肠运动是斑马鱼早期胚胎发育过程中叁胚层形成的重要过程,其中集中延伸运动是其最主要的程序,它对于斑马鱼体轴的形成和延长起关键作用。在脊椎动物中,集中延伸运动主要受到平面细胞极性途径(Wnt/Planar Cell Polarity pathway, Wnt/PCP)的调节,它对于细胞的迁移以及胚胎发育过程中细胞的内卷内嵌等过程都起到显着的调节作用。本课题通过在斑马鱼胚胎1-4细胞期注射吗啉反义寡聚核苷酸(Morpholino, MO),特异性抑制SUN1和SUN2蛋白的表达,研究其在斑马鱼早期胚胎发育中的作用及相关机制。第一部分Sun1/2基因在斑马鱼早期胚胎中的表达为探讨SUN1/2蛋白在斑马鱼早期胚胎发育中的功能,我们首先采用胚胎整封原位杂交和RT-PCR的方法,检测了Sun1/2基因在斑马鱼发育早期的时空表达情况。原位杂交结果显示,Sun1和Sun2基因在胚胎8细胞期已经表达,为母源性表达,且在斑马鱼胚胎呈现泛表达;RT-PCR结果显示,Sunl在斑马鱼胚胎30%下包期表达较高,而Sun2在胚胎30%下包至尾芽期均呈现高表达。以上结果提示,SUN1/2可能在斑马鱼早期胚胎发育原肠运动中起到重要作用。第二部分SUN1/2对斑马鱼早期胚胎发育集中延伸运动的影响为研究SUN1/2蛋白在斑马鱼胚胎发育中的作用,我们采用胚胎早期显微注射MO的方法,特异性抑制SUN1/2蛋白的表达,并观察对于胚胎发育的影响。结果发现,单独抑制SUN1或SUN2的表达,没有对胚胎发育产生严重影响,而同时抑制SUN1/2的表达,胚胎表现出前后体轴缩短、尾部弯曲、体节部位变宽等表型,且呈现出一定程度的MO剂量依赖性。由此提示SUN1/2蛋白存在功能上的冗余,而同时抑制SUN1/2蛋白的表达对斑马鱼胚胎早期发育中的原肠运动造成影响。为进一步确认抑制SUN1/2蛋白的表达是否对斑马鱼胚胎原肠运动中极其重要的集中延伸运动造成影响,我们采用胚胎整封原位杂交技术,检测了集中延伸运动相关标记基因ntl、hggl、dlx3b、tbx6、myodl、 krox20等的表达变化。结果显示,抑制SUN1/2蛋白表达后,胚胎集中延伸相关标记基因表达均出现明显异常或异位,表明抑制SUN1/2表达后,胚胎发育中的轴向中胚层、轴旁中胚层、神经外胚层发育均出现缺陷,胚胎集中延伸运动受到严重影响。由此可见,SUN1/2蛋白在斑马鱼胚胎早期发育的集中延伸运动过程中发挥着重要的作用。第叁部分SUN1/2对斑马鱼集中延伸运动调节机制的研究哺乳动物中的研究证实,SUN1/2蛋白对于核孔复合体在核膜上正常分布很重要,而脊椎动物原肠运动中的细胞迁移与β-catenin蛋白在细胞内的分布相关。为研究SUN1/2蛋白是否通过影响β-catenin蛋白的核转运调节斑马鱼集中延伸运动,我们收集注射MO的斑马鱼胚胎,分离核蛋白及胞浆蛋白,采用蛋白免疫印迹技术检测β-catenin蛋白在细胞核及细胞浆中的分布变化。结果显示,注射SUN1/2MO并未影响P-catenin蛋白在细胞内的分布,提示抑制SUN1/2蛋白的表达并未影响核孔复合体的核转运功能。此外,脊椎动物中,集中延伸运动主要受到Wnt/PCP信号通路的调节。为研究抑制SUN1/2表达后是否影响Wnt/PCP信号通路,我们采用蛋白免疫印迹技术,检测了关键因子P-JNK蛋白表达情况,结果发现抑制SUN1/2蛋白表达后,P-JNK表达明显降低。为进一步验证该结果,我们采用RT-PCR技术检测了Wnt/PCP信号通路下游靶基因livl和stat3的表达情况,结果显示抑制SUN1/2表达后,liv]和stat3表达有所下调。这些结果表明,SUN1/2通过Wnt/PCP信号通路调节斑马鱼集中延伸运动,对于进一步深入的调节机制有待于继续研究。总之,通过本研究我们发现,SUN1/2蛋白通过Wnt/PCP信号通路对斑马鱼的原肠运动中的集中延伸运动起重要的调节作用。这些研究结果揭示了SUN1/2蛋白在斑马鱼早期胚胎发育中的重要作用。(本文来源于《山东大学》期刊2013-05-10)

杨阳,高明,陈学冉,史玮,王芬[2](2013)在《zdhhc17对斑马鱼集中延伸运动的调节及其机制》一文中研究指出目的通过抑制zdhhc17基因的表达,探讨其在斑马鱼胚胎发育过程中的作用及机制。方法通过显微注射zdhhc17吗啉反义寡聚核苷酸(MO)抑制zdhhc17翻译,观察斑马鱼胚胎发育过程中相关表型的变化。利用斑马鱼整封原位杂交技术,检测集中延伸运动相关标记基因(dlx3b、ntl、myod1、tbx6等)的表达变化。利用RT-PCR技术,检测集中延伸运动相关调控因子mRNA表达水平的变化。结果敲除zdhhc17基因后,斑马鱼胚胎集中延伸运动出现严重缺陷,主要表现为尾部弯曲变短(82/118),且集中延伸运动相关标记基因表达异常,钙黏附蛋白家族cdh1、padh18a mRNA水平降低。结论 zdhhc17通过调节钙黏附蛋白家族cdh1、padh18a基因的表达,进而影响细胞黏附运动,最终参与调控斑马鱼胚胎集中延伸运动。(本文来源于《解剖学报》期刊2013年02期)

刘忠振[3](2010)在《脊椎动物胚胎发育过程中DSCR5对于集中延伸运动的调节作用》一文中研究指出脊椎动物的原肠运动是一种基本的形态发生运动。脊椎动物通过原肠运动最终形成了叁胚层:外胚层,中胚层和内胚层。原肠运动包含至少叁种不同形式的运动:外包运动,细胞内移,集中延伸运动。集中延伸运动是指胚胎组织由两侧向中间的迁移(集中运动)和沿着前后轴的延长(延伸运动)。这些运动是由多种定向的和协调的细胞运动所驱动。集中延伸运动是胚胎形态发生运动的主要动力之一,对胚胎前后轴的延长具有重要作用。Wnt/PCP通路是一种非经典的Wnt信号通路,在集中延伸运动中起重要作用。Wntll与七次跨膜受体Frizzled及辅受体Glypican家族蛋白的相互作用激活Wnt/PCP通路,其中Glypican蛋白包括斑马鱼Knypek及爪蟾中的同源蛋白Glypican 4。Wnt/PCP通路向下传递到Dishevelled,导致Dishevelled的激活,并进一步激活下游的蛋白—GTP酶Rho和Rac。GTP酶的激活导致Rho-关联蛋白(ROCK)和Myosin的激活,最终导致肌动蛋白的修饰和细胞骨架的重排。唐氏综合症是最常见的人类出生缺陷疾病之一,其发病率可达到1/1000-1/600。唐氏综合症患者可产生一系列的智力迟钝和面部及身体缺陷。对患者进行的表型及分子鉴定发现21号染色体上的一小段区域对于唐氏综合症起主要作用。这段区域被称为唐氏综合症关键区(DSCR)。其中的几个基因已被鉴别出来,包括dscr5。这些基因在早期发育过程的重要事件中的作用尚未深入研究。所以研究这些基因在发育早期的功能是研究唐氏综合症出生缺陷的重要步骤。已有研究发现,人类dscr5可以编码磷脂酰肌醇多糖-P蛋白(phosphatidylinositol-glycan-class P, PIG-P).PIG-P作为GPI-GnT复合体的一个组分,参与到糖基化磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol, GPI)合成的第-步反应。GPI是一种糖脂复合体,可以作为多种细胞表面蛋白的锚点,GPI锚定蛋白属于乙酰肝素硫酸糖蛋白(heparan sulfate proteoglycans,HSPG)家族。果蝇和脊椎动物中的研究发现HSPG在调节Wnt通路的过程中起重要作用。虽然Knypek和Glypican 4都是潜在的GPI锚定蛋白,但是对于它们在膜上的锚定和活性是否受GPI合成复合体的调节尚未有人报道,所以对于这些潜在的GPI锚定蛋白和GPI合成复合体之间是否有功能联系仍需确定。在本研究中,我们发现Dscr5参与胚胎的集中延伸运动,dscr5的过表达和抑制都会引起斑马鱼胚胎的集中延伸运动的缺陷;进一步的研究发现,Dscr5通过Wnt/PCP通路调节集中延伸运动。Wnt/PCP通路需要Knypek和Frizzled 7在膜上的锚定,抑制dscr5的表达会导致Frizzled 7受体通过Caveolin依赖的途径被内吞到细胞内,从而使Dishevelled通过泛素-蛋白酶体途径降解。这些结果揭示了调节非经典Wnt通路和集中延伸运动的新的机理。(本文来源于《山东大学》期刊2010-05-10)

集中延伸运动论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的通过抑制zdhhc17基因的表达,探讨其在斑马鱼胚胎发育过程中的作用及机制。方法通过显微注射zdhhc17吗啉反义寡聚核苷酸(MO)抑制zdhhc17翻译,观察斑马鱼胚胎发育过程中相关表型的变化。利用斑马鱼整封原位杂交技术,检测集中延伸运动相关标记基因(dlx3b、ntl、myod1、tbx6等)的表达变化。利用RT-PCR技术,检测集中延伸运动相关调控因子mRNA表达水平的变化。结果敲除zdhhc17基因后,斑马鱼胚胎集中延伸运动出现严重缺陷,主要表现为尾部弯曲变短(82/118),且集中延伸运动相关标记基因表达异常,钙黏附蛋白家族cdh1、padh18a mRNA水平降低。结论 zdhhc17通过调节钙黏附蛋白家族cdh1、padh18a基因的表达,进而影响细胞黏附运动,最终参与调控斑马鱼胚胎集中延伸运动。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

集中延伸运动论文参考文献

[1].杨阳.SUN1/2对斑马鱼集中延伸运动的调节及其机制的研究[D].山东大学.2013

[2].杨阳,高明,陈学冉,史玮,王芬.zdhhc17对斑马鱼集中延伸运动的调节及其机制[J].解剖学报.2013

[3].刘忠振.脊椎动物胚胎发育过程中DSCR5对于集中延伸运动的调节作用[D].山东大学.2010

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