本文主要研究内容
作者雷垚（2019）在《基于不同分子内佐剂的A型、O型口蹄疫病毒二价多表位免疫原的初步研究》一文中研究指出：口蹄疫(Foot-and-mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)感染猪、牛、羊等偶蹄动物引起的一种急性、热性和高传染性动物疫病,可造成严重的经济损失。目前口蹄疫灭活疫苗仍是预防和控制口蹄疫的主要手段,但是鉴于灭活疫苗在生产中存在的安全隐患,研制新型安全有效的口蹄疫亚单位疫苗刻不容缓。在FMD表位疫苗研究领域,如何将FMDV中和表位更加有效的呈递给免疫系统,从而更加高效的激发抵抗FMD感染的免疫应答,是目前表位疫苗研究的主要方向。本研究选取了三种FMD多表位抗原的分子内佐剂,分别是:乙肝核心抗原(Hepatitis B core antigen,HBcAg),结核分枝杆菌热休克蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)的羧基端肽结合区(mHSP70C)以及肝素结合血凝素蛋白(heparin-binding hemagglutinin adhesin,HBHA)。另外选取A型和O型FMDV代表性毒株VP1上的B细胞表位(VP1 134-161aa,200-213aa)或非结构蛋白3A上的T细胞表位(3A 21-35aa)的编码基因进行串联,并插入到截短型HBcAg的主要免疫原区(major immunogenic region,MIR)进行合成。在原核表达系统中获得不同的重组抗原rHBc/AO和rHBc/AOT,经过亲和层析纯化以及尿素梯度透析复性等程序后使其在体外高效自组装成携带有FMDV抗原表位的病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)。此外,笔者将A型和O型FMD二价多表位基因AO和HAO分别与mHSP70C以及HBHA的编码基因进行融合,以及HAO和HBHA单独构建至原核表达载体pET-28a,在原核系统中成功表达和纯化了重组蛋白AOHSP,HAO,HBHA以及HAO-HBHA。笔者将得到的rHBc/AO和rHBc/AOT VLPs以及融合抗原AO-HSP、HAO-HBHA等在小鼠模型中进行了免疫效果评价。rHBc/AO和rHBc/AOT VLPs均能刺激机体产生A型和O型FMDV特异性中和抗体;在细胞免疫应答方面,两者均能显著刺激机体产生Th1型细胞免疫应答,而灭活疫苗更倾向于刺激产生Th2型细胞免疫应答。与rHBc/AO VLPs相比,rHBc/AOT VLPs能够产生更高水平的Th2型细胞免疫应答。此外,HAO-HBHA免疫组的抗体水平以及脾淋巴细胞增殖水平明显高于HAO+HBHA混合免疫组,HAO以及HAO+206佐剂组。绵羊免疫结果显示,HAOHBHA免疫组能产生同灭活疫苗组同等的FMDV特异性抗体水平。由此可得出结论,在HBc分子MIR区插入多种血清型FMDV的抗原表位以提高该类VLPs疫苗广谱性的优势性;另外mHSP70C以及HBHA在增强FMDV表位免疫原性方面同样具有优势,特别是HBHA在提高FMDV特异性抗体水平以及细胞免疫应答方面有良好的应用前景。
Abstract
kou ti yi (Foot-and-mouth disease,FMD)shi you kou ti yi bing du (Foot-and-mouth disease virus,FMDV)gan ran zhu 、niu 、yang deng ou ti dong wu yin qi de yi chong ji xing 、re xing he gao chuan ran xing dong wu yi bing ,ke zao cheng yan chong de jing ji sun shi 。mu qian kou ti yi mie huo yi miao reng shi yu fang he kong zhi kou ti yi de zhu yao shou duan ,dan shi jian yu mie huo yi miao zai sheng chan zhong cun zai de an quan yin huan ,yan zhi xin xing an quan you xiao de kou ti yi ya chan wei yi miao ke bu rong huan 。zai FMDbiao wei yi miao yan jiu ling yu ,ru he jiang FMDVzhong he biao wei geng jia you xiao de cheng di gei mian yi ji tong ,cong er geng jia gao xiao de ji fa di kang FMDgan ran de mian yi ying da ,shi mu qian biao wei yi miao yan jiu de zhu yao fang xiang 。ben yan jiu shua qu le san chong FMDduo biao wei kang yuan de fen zi nei zuo ji ,fen bie shi :yi gan he xin kang yuan (Hepatitis B core antigen,HBcAg),jie he fen zhi gan jun re xiu ke dan bai 70(Heat shock protein 70,HSP70)de suo ji duan tai jie ge ou (mHSP70C)yi ji gan su jie ge xie ning su dan bai (heparin-binding hemagglutinin adhesin,HBHA)。ling wai shua qu Axing he Oxing FMDVdai biao xing du zhu VP1shang de Bxi bao biao wei (VP1 134-161aa,200-213aa)huo fei jie gou dan bai 3Ashang de Txi bao biao wei (3A 21-35aa)de bian ma ji yin jin hang chuan lian ,bing cha ru dao jie duan xing HBcAgde zhu yao mian yi yuan ou (major immunogenic region,MIR)jin hang ge cheng 。zai yuan he biao da ji tong zhong huo de bu tong de chong zu kang yuan rHBc/AOhe rHBc/AOT,jing guo qin he ceng xi chun hua yi ji niao su ti du tou xi fu xing deng cheng xu hou shi ji zai ti wai gao xiao zi zu zhuang cheng xie dai you FMDVkang yuan biao wei de bing du yang ke li (virus-like particles,VLPs)。ci wai ,bi zhe jiang Axing he Oxing FMDer jia duo biao wei ji yin AOhe HAOfen bie yu mHSP70Cyi ji HBHAde bian ma ji yin jin hang rong ge ,yi ji HAOhe HBHAchan du gou jian zhi yuan he biao da zai ti pET-28a,zai yuan he ji tong zhong cheng gong biao da he chun hua le chong zu dan bai AOHSP,HAO,HBHAyi ji HAO-HBHA。bi zhe jiang de dao de rHBc/AOhe rHBc/AOT VLPsyi ji rong ge kang yuan AO-HSP、HAO-HBHAdeng zai xiao shu mo xing zhong jin hang le mian yi xiao guo ping jia 。rHBc/AOhe rHBc/AOT VLPsjun neng ci ji ji ti chan sheng Axing he Oxing FMDVte yi xing zhong he kang ti ;zai xi bao mian yi ying da fang mian ,liang zhe jun neng xian zhe ci ji ji ti chan sheng Th1xing xi bao mian yi ying da ,er mie huo yi miao geng qing xiang yu ci ji chan sheng Th2xing xi bao mian yi ying da 。yu rHBc/AO VLPsxiang bi ,rHBc/AOT VLPsneng gou chan sheng geng gao shui ping de Th2xing xi bao mian yi ying da 。ci wai ,HAO-HBHAmian yi zu de kang ti shui ping yi ji pi lin ba xi bao zeng shi shui ping ming xian gao yu HAO+HBHAhun ge mian yi zu ,HAOyi ji HAO+206zuo ji zu 。mian yang mian yi jie guo xian shi ,HAOHBHAmian yi zu neng chan sheng tong mie huo yi miao zu tong deng de FMDVte yi xing kang ti shui ping 。you ci ke de chu jie lun ,zai HBcfen zi MIRou cha ru duo chong xie qing xing FMDVde kang yuan biao wei yi di gao gai lei VLPsyi miao an pu xing de you shi xing ;ling wai mHSP70Cyi ji HBHAzai zeng jiang FMDVbiao wei mian yi yuan xing fang mian tong yang ju you you shi ,te bie shi HBHAzai di gao FMDVte yi xing kang ti shui ping yi ji xi bao mian yi ying da fang mian you liang hao de ying yong qian jing 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学院的雷垚，发表于刊物中国农业科学院2019-07-05论文，是一篇关于口蹄疫论文,多表位抗原论文,分子内佐剂论文,病毒样颗粒论文,中国农业科学院2019-07-05论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学院2019-07-05论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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