导读:本文包含了内皮细胞衰老论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:高血糖,五味子乙素,人脐静脉内皮细胞,衰老
内皮细胞衰老论文文献综述
仲维莉,邹国良,徐洪涛[1]（2019）在《五味子乙素对高糖诱导的人脐静脉内皮细胞衰老的影响及机制》一文中研究指出目的观察不同浓度五味子乙素对高糖诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的抗衰老作用,并探讨其机制。方法将HUVEC分为6个组。正常组给予5.5 mmol/L的D-葡萄糖,其余各组均给予25 mmol/L的D-葡萄糖;五味子乙素1、2、3、4组在高糖诱导基础上,再分别给予5、10、15、20μmol/L的五味子乙素。各组细胞传代20代,采用衰老相关的β-半乳糖苷酶(SAβ-gal)染色法评估细胞衰老情况。采用流式细胞仪分析各组细胞周期,检测各组细胞中活性氧簇(ROS)、一氧化氮(NO)水平。结果高糖组、五味子乙素1组、五味子乙素2组、五味子乙素3组衰老细胞百分比高于正常组;五味子乙素各组衰老细胞百分比低于高糖组,五味子乙素不同浓度组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。高糖组、五味子乙素1组、五味子乙素2组、五味子乙素3组G_0/G_1期细胞比例高于正常组,S期细胞比例低于正常组;五味子乙素各组G_0/G_1期细胞比例低于高糖组,S期细胞比例高于高糖组;五味子乙素不同浓度组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。高糖组、五味子乙素1组、五味子乙素2组、五味子乙素3组ROS水平高于正常组;五味子乙素各组ROS水平低于高糖组;五味子乙素不同浓度组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。高糖组、五味子乙素1组、五味子乙素2组、五味子乙素3组NO水平低于正常组;五味子乙素各组ROS水平高于高糖组;五味子乙素不同浓度组间差异均有统计学意义(P均<0.01)。结论五味子乙素可延缓高糖诱导的HUVEC衰老进程,该作用可能与其减轻氧化应激损伤有关。(本文来源于《山东医药》期刊2019年32期）
林捷琪,阮云军,杨儒于,王玉筵,苏双[2]（2019）在《不同浓度雌二醇对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞衰老模型的影响》一文中研究指出目的探究不同浓度的17β-雌二醇(17β-Estradiol,17β-E_2)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老模型的影响。方法构建HUVECs衰老模型后将细胞分为空白组,衰老组,17β-E_2阴性对照组,低浓度、生理浓度及高浓度17β-E_2组,CCK-8检测细胞活力;Western blot检测细胞衰老程度相关蛋白p-Rb、Rb、细胞自噬水平相关蛋白P6_2、LC3B以及衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色。结果与空白组相比,衰老组p-Rb/Rb比值增加,细胞活力下降,SA-β-Gal染色阳性细胞数目多,与衰老组比较,高浓度和生理浓度17β-E_2组p-Rb/Rb比值降低,SA-β-Gal染色阳性细胞数减少,P6_2表达量减少,LC3-Ⅱ/LC3-I蛋白表达升高,细胞活力增加。结论 17β-E_2能通过上调自噬减轻H_2O_2诱导的HUVECs衰老,且与其浓度有关。(本文来源于《中国临床解剖学杂志》期刊2019年05期）
戴春梅,林桐,罗文威,李梓晴,刘培庆[3]（2019）在《应激性衰老导致血管内皮细胞能量代谢及线粒体功能异常的研究》一文中研究指出为探究H_2O_2诱导的血管内皮应激性衰老中能量代谢和线粒体功能的变化,在H_2O_2诱导的人脐静脉内皮细胞衰老模型中,Western blotting检测细胞衰老指标p21、p53、γH2A.X的蛋白表达水平;检测衰老相关的β-半乳糖苷酶蓝染程度;荧光定量PCR检测端粒长度;利用安捷伦Seahorse XFe 96细胞能量代谢仪检测内皮细胞的糖酵解情况和氧耗情况;检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位及ATP水平;检测细胞能量代谢关键酶的表达水平。与正常组相比,H_2O_2刺激的内皮细胞中p21、p53、γH2A.X的蛋白表达明显上调,衰老相关的β-半乳糖苷酶蓝染的细胞比例增加,端粒长度缩短,衰老内皮细胞糖酵解能力下降,线粒体呼吸功能明显降低,ROS水平增加,线粒体膜电位下降,ATP生成减少,但大部分能量代谢关键酶的表达水平不变。因此,内皮应激性衰老可引起内皮能量代谢紊乱及线粒体功能障碍,靶向内皮能量代谢及线粒体功能调节可能是干预内皮应激性衰老的重要策略。(本文来源于《中国科技论文》期刊2019年08期）
宋仕聪,阮云军,吴赛珠,王玉筵[4]（2019）在《雷帕霉素对过氧化氢诱导血管内皮细胞衰老的干预研究》一文中研究指出目的:探讨雷帕霉素(Rapa)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响及其可能的机制。方法:把HUVECs分为空白组、衰老组(H_2O_2诱导)、Rapa+H_2O_2组和3-甲基腺嘌呤(3-MA)+H_2O_2组。噻唑蓝(MTT)比色法检测各组细胞活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况;透射电子显微镜观察细胞超微结构改变;Western blot检测Rb、磷酸化Rb(p-Rb)、p21、LC-3II和beclin-1的表达变化。结果:与空白组相比,衰老组细胞活力下降,SA-β-Gal染色阳性率增高,细胞结构紊乱,并伴有衰老蛋白表达显着增加(P<0.01);与衰老组相比,Rapa+H_2O_2组细胞活力增强,细胞衰老染色减少,p-Rb和p21表达显着减少(P<0.05),电镜下细胞结构趋于正常,并可见自噬小体,beclin-1和LC3-II表达显着增多(P<0.01);与衰老组相比,给予自噬抑制剂3-MA的细胞则表现为细胞活力进一步下降,SA-β-Gal染色阳性率进一步增高,p-Rb和p21表达增多,细胞结构破坏明显,beclin-1和LC3-II几乎不表达(P<0.05)。结论:Rapa可延缓H_2O_2诱导的血管内皮细胞衰老,这种抗衰老作用可能与促进自噬有关。(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2019年07期）
赵玉,郭艳,张温阳,毛伟阳,刘向东[5]（2019）在《二苯乙烯苷对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞衰老的保护作用》一文中研究指出目的探讨二苯乙烯苷对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导人脐静脉内皮细胞衰老的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞后,AngⅡ诱导细胞衰老模型,MTS法检测细胞存活率,SA-β-gal染色分析细胞衰老程度,qPCR检测miR-34a mRNA表达,Western blot检测p53、PAI-1、SIRT1、E2F1蛋白表达。结果二苯乙烯苷干预后,细胞存活率、SIRT1蛋白表达显着升高(P<0.05),β-gal阳性率及p53、PAI-1蛋白表达显着降低(P<0.05)。同时,该成分对miR-34a、E2F1表达也有明显抑制作用(P<0.05)。结论二苯乙烯苷对AngⅡ诱导人脐静脉内皮细胞衰老具有明显保护作用,其作用机制可能与抑制miR-34a、E2F1表达及促进SIRT1蛋白表达有关。(本文来源于《中成药》期刊2019年06期）
王雪[6]（2019）在《人参叁七川芎提取物调控线粒体自噬延缓血管内皮细胞衰老的机制研究》一文中研究指出糖尿病是以糖脂代谢紊乱为主要临床特征的慢性代谢性疾病,其中心血管疾病是糖尿病的主要并发症,约60%的糖尿病患者死于心血管并发症。越来越多的证据表明,糖脂代谢紊乱引发的血管内皮细胞衰老是导致内皮功能紊乱及心血管疾病的关键。衰老的血管内皮细胞能够活化和分泌大量促炎细胞因子,促进慢性炎症扩散、单核细胞聚集和血栓形成,加速血管内皮功能紊乱和糖尿病心血管疾病形成。因此,探讨高糖高脂环境下血管内皮细胞衰老的病理机制,寻找靶向干预衰老细胞的治疗措施,对糖尿病及心血管并发症的防治意义重大。糖尿病患者体内高糖高脂刺激损伤了血管内皮细胞内线粒体,导致细胞内活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)累积,诱导长期氧化应激反应,加速血管内皮细胞衰老形成。线粒体自噬是选择性自噬的一种形式,它可以标记受损的线粒体,并对其进行自动识别和降解,从而改善线粒体结构和功能的完整性,阻止线粒体来源的ROS的过度累积,进而在延缓细胞衰老过程中发挥保护作用。AMPK/mTOR信号通路作为经典的线粒体自噬调控通路,也参与了多种心血管和衰老相关疾病的发生发展过程。因此,调控AMPK/mTOR信号通路介导的线粒体自噬有望成为延缓血管内皮细胞衰老的新策略。中药人参、叁七、川芎均属于益气活血药的范畴,临床广泛应用于心脑血管疾病的防治。既往药理学研究显示,上述叁种中药的多种活性成分均具有良好的抗衰老功效。本课题组前期研究表明,在复制型和诱导型的血管内皮细胞衰老中,人参叁七川芎提取物均能有效降低细胞内ROS水平,发挥延缓细胞衰老的作用。但是,在高糖高脂诱导的血管内皮细胞衰老中,人参叁七川芎提取物是否能有效地抑制细胞衰老的发生发展?其具体机制是否与线粒体自噬和AMPK/mTOR信号通路有关?上述科学问题均有待进一步探索。基于此,我们提出以下科学假说:人参叁七川芎提取物可能通过调控AMPK/mTOR信号通路介导的线粒体自噬延缓高糖高脂诱导的血管内皮细胞衰老。围绕上述假说,本研究首先基于网络药理学研究,预测人参、叁七和川芎延缓血管衰老的可能作用靶点和分子机制,然后以糖尿病小鼠主动脉和人主动脉内皮细胞为研究对象,以线粒体自噬与AMPK/mTOR信号通路为切入点,探索人参叁七川芎提取物与高糖高脂诱导的血管内皮细胞衰老之间的关系,旨在从网络药理、整体动物和细胞分子叁个水平阐述人参叁七川芎提取物延缓血管内皮细胞衰老的作用及机制。研究一人参叁七川芎延缓血管衰老的网络药理学研究目的:基于网络药理学分析人参、叁七和川芎延缓血管衰老可能的作用靶点和分子机制。方法:检索中药系统药理数据库和分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)数据库,以 口服生物利用度(oral bioavailability,OB)和类药性(drug-likeness,DL)为限定条件对人参、叁七和川芎所含的活性成分进行筛选,并预测作用靶点;利用Cytoscape 3.7.1构建药物活性成分-靶点网络、成分靶点相互作用网络和血管衰老相关靶点蛋白相互作用网络;采用BisoGenet插件,将上述中药活性成分作用靶点和人类血管衰老相关疾病靶点进行相互作用关系网络绘制,抽取获得人参、叁七和川芎延缓血管衰老的关键靶标;采用ClueGO分析插件,将上述筛选得到的关键靶标进行KEGG信号通路富集分析。结果:通过TCMSP数据库,以OB≥30%和DL≥0.18为参数从中药人参、叁七和川芎中收集到了 33个入血活性成分,130个预测靶点;从NCBI、AgeFactDB和HAGR数据库筛选获得146个人血管衰老相关基因;构建中药调控血管衰老的蛋白质相互作用交集网络,通过拓扑属性分析筛选获得253个关键靶标;ClueGO富集分析显示人参、叁七和川芎延缓血管衰老的机制涉及细胞周期、长寿调节通路、FoxO信号通路、神经营养因子信号通路、线粒体自噬等多种生物过程。结论:人参、叁七和川芎延缓血管衰老具有多成分、多途径和多靶点综合调控的作用特点,其中线粒体自噬很可能是关键调控点之一。研究二人参叁七川芎提取物对高糖高脂环境下血管组织和血管内皮细胞衰老的影响目的:观察人参叁七川芎提取物对糖尿病小鼠主动脉衰老和高糖高脂诱导血管内皮细胞衰老的影响。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)联合高脂饮食喂养构建糖尿病小鼠模型,造模28 w后给予药物干预9 w,实验分为空白对照组、衰老模型组、人参叁七川芎提取物低(0.819 g/kg)、高(1.638 g/kg)剂量组和二甲双胍组(150 mg/kg)。利用生化分析小鼠血糖血脂变化,细胞衰老β-半乳糖苷酶(senescence associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色法计算蓝染组织比例,免疫组化和Western blot检测p16和p21蛋白表达情况。体外实验采用40mM葡萄糖(high glucose,HG)和 100μM 棕榈酸(palmitic acid,PA)干预 48h 诱导人主动脉内皮细胞(Human Aortic Endothelial Cells,HAEC)衰老模型,实验分为空白对照组、衰老模型组、人参叁七川芎提取物不同剂量组和二甲双胍组。采用CCK-8检测细胞增殖活力,SA-β-gal染色检测细胞衰老程度,Western blot检测细胞p16、p21蛋白表达水平的变化,免疫荧光检测Y-H2A.X(Ser139)表达、线粒体ROS(mitochondrial ROS,mtROS)生成和线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)变化。结果:(1)与空白对照组相比,衰老模型组小鼠随机血糖、胆固醇和低密度脂蛋白水平显着升高,高密度脂蛋白水平降低,主动脉组织SA-β-gal蓝染比例增加,p16、p21蛋白表达水平升高(P<0.05);药物干预后,小鼠血糖水平降低(P<0.05),各项血脂指标改变不明显,主动脉组织SA-β-gal蓝染比例明显降低(P<0.05),p16、p21蛋白表达水平下调(P<0.05)。(2)体外实验中,与空白对照组相比,衰老模型组HAEC细胞增殖活力、MMP水平降低(P<0.05),SA-β-gal蓝染细胞数量和mtROS生成增加,p16、p21和Y-H2A.X(Ser139)蛋白表达水平升高(P<0.05);与衰老模型组比较,人参叁七川芎提取物组和二甲双胍组中HAEC细胞增殖活力和MMP水平增加(P<0.05),SA-β-gal蓝染细胞数量和mtROS生成减少(P<0.05),p16、p21和Y-H2A.X(Ser139)的表达水平显着降低(P<0.05)。结论:长期高糖高脂刺激可加速小鼠主动脉和HAEC细胞衰老进程,而人参叁七川芎提取物能够同时延缓血管组织和HAEC细胞衰老,且对HAEC细胞线粒体功能和mtROS的生成有明显干预作用,其可能通过此作用抑制了血管内皮细胞衰老的进程。研究叁人参叁七川芎提取物调控线粒体自噬抑制血管内皮细胞衰老的作用目的:观察人参叁七川芎提取物在血管内皮细衰老中对线粒体自噬的影响,并特异性抑制线粒体自噬,进一步探讨人参叁七川芎提取物抑制细胞衰老的可能机制。方法:采用HG 40mM联合PA 100μM干预48h诱导HAEC细胞衰老模型,实验分为空白对照组、衰老模型组、人参叁七川芎提取物组和二甲双胍组。采用GFP-LC3与mitotracker荧光共定位检测评估线粒体自噬体的形成,Parkin与mitotracker荧光共定位检测评估Parkin蛋白转位情况,Western blot检测线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3B-Ⅱ、p62和衰老相关蛋白p16、p21的表达水平,CCK-8检测细胞增殖活力,SA-β-gal染色检测细胞衰老程度,免疫荧光检测γ-H2A.X(Ser139)表达、mtROS 生成和 MMP 变化。结果:(1)与空白对照组相比,衰老模型组HAEC细胞中GFP-LC3与mitotracker共定位程度下降,Parkin蛋白表达与转位程度下调,p62表达增加;与衰老模型组相比,人参叁七川芎提取物组GFP-LC3、Parkin与mitotracker共定位程度增加(P<0.05),Parkin和LC3B-Ⅱ的表达水平上调(P<0.05),而p62表达水平下调(P<0.05);二甲双胍组GFP-LC3与mitotracker共定位程度和Parkin、LC3B-Ⅱ蛋白表达水平均上调(P<0.05)。(2)给予Mdivi-1抑制线粒体自噬,与衰老模型组相比,人参叁七川芎提取物组GFP-LC3和mitotracker共定位程度、Parkin的表达和转位情况均未发生改变;LC3B-Ⅱ和p62表达水平上调(P<0.05);mtROS生成、MMP水平、细胞增殖活性、SA-β-gal蓝染细胞数量和p16、p21、γ-H2A.X(Ser139)蛋白表达差异均无统计学意义。结论:高糖高脂刺激可抑制HAEC细胞线粒体自噬,人参叁七川芎提取物能够恢复HAEC细胞线粒体自噬能力,这可能是其发挥改善线粒体功能、减少mtROS生成和延缓细胞衰老的重要机制之一。研究四人参叁七川芎提取物通过AMPK/mTOR通路发挥线粒体自噬调控作用目的:观察人参叁七川芎提取物在血管内皮细衰老中对AMPK/mTOR信号通路的影响。通过特异性干扰AMPK活性与表达,进一步探讨人参叁七川芎提取物调控线粒体自噬及延缓细胞衰老的作用机制。方法:采用HG 40mM联合PA 100μM干预48h诱导HAEC细胞衰老模型,实验分为空白对照组、衰老模型组、人参叁七川芎提取物组和二甲双胍组。采用Western blot检测p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-p70S6K和p70S6K蛋白表达;采用Compound C和AMPKα1 shRNA慢病毒颗粒干扰AMPK活性和表达,在此基础上,观察对人参叁七川芎提取物调控AMPK/mTOR信号通路、线粒体自噬和细胞衰老程度作用的影响。结果:(1)与空白对照组相比,衰老模型组HAEC细胞中AMPK蛋白和磷酸化(Thr172)水平下调,mTOR和p70S6K蛋白磷酸化水平上调;药物干预后,可有效上调AMPK蛋白表达及磷酸化水平,下调mTOR和p70S6K蛋白磷酸化水平,具有统计学意义。(2)给予Compound C抑制AMPK活性,与衰老模型组相比,药物干预后,AMPK、mTOR和p70S6K磷酸化水平没有差异;未能增加HAEC细胞中LC3、Parkin与线粒体的结合程度;PINK1、Parkin、p62和LC3B-Ⅱ的表达差异无统计学意义;HAEC细胞增殖活力、SA-β-gal细胞蓝染数量、mtROS生成以及p16、p21和γ-H2AX蛋白表达方面尚未有差异。(3)采用RNAi技术特异性干扰AMPKα1蛋白表达,与阴性对照组(SCR shRNA)比较,AMPKα1 shRNA转染细胞中AMPK蛋白表达及磷酸化水平显着下调,同时mTOR和p70S6K磷酸化水平上调;Parkin蛋白表达水平显着下调,p62蛋白表达水平上调;细胞增殖活力水平下降,SA-β-gal细胞蓝染数量、mtROS生成以及p16、p21和γ-H2AX蛋白表达增加。(4)在AMPKα1 shRNA干扰细胞中,与衰老模型组相比,人参叁七川芎提取物组中AMPK蛋白表达和磷酸化水平无统计学差异,mTOR和p70S6K磷酸化水平下调,但是其下调程度较结果(1)中明显减弱;PINK1、Parkin和LC3B-Ⅱ蛋白表达水平未有明显差异,p62蛋白水平明显下调;细胞增殖活力、SA-β-gal细胞蓝染数量、mtROS生成以及p21蛋白表达方面尚未有差异,但p16和γ-H2AX蛋白水平明显下调。结论:AMPK/mTOR信号通路在高糖高脂诱导的衰老HAEC细胞中呈抑制状态,人参叁七川芎提取物可激活该通路,这是其发挥激活线粒体自噬和拮抗细胞衰老作用的重要机制之一。综上所述,本研究利用糖尿病小鼠模型和HG/PA联合诱导的HAEC细胞衰老模型,证明人参叁七川芎提取物可呈剂量依赖性的延缓血管内皮细胞衰老,以往未见报道。在此基础上,本研究基于“AMPK/mTOR信号通路-线粒体自噬-线粒体功能障碍”轴阐明了高糖高脂环境下人参叁七川芎提取物延缓血管内皮细胞衰老的效应机制,为糖尿病及心血管疾病的中医药防治提供了新的思路。(本文来源于《中国中医科学院》期刊2019-05-30）
柯世业,石光耀,刘定辉,吴琳,温仁辉[7]（2019）在《人参皂苷Rb1通过Sirt3/SOD2通路延缓高糖诱导的人脐静脉内皮细胞衰老》一文中研究指出【目的】本研究拟探讨人参皂苷Rb1通过调节沉默信息调节因子3/超氧化物歧化酶2(Sirt3/SOD2)通路延缓高糖诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)衰老的作用和机制。【方法】建立高糖(40 mmol/L葡萄糖)诱导的HUVEC早熟性衰老模型,根据衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)阳性率及Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAI-1)和P16表达评估HUVEC衰老,并采用Annexin V-FITC/PI排除细胞凋亡的发生。采用Western blot检测各组Sirt3与SOD2表达的变化。同时检测细胞内丙二醛(MDA)及SOD2活性的水平。【结果】40 mmol/L葡萄糖处理24 h可成功诱导HUVEC衰老,并未发生细胞凋亡,早熟性衰老的HUVEC SA-β-Gal阳性率明显增多,PAI-1及P16表达增多,Sirt3及SOD2表达均减少,MDA含量升高,SOD2活性降低(P <0.05)。与高糖处理组比较,40μmol/L人参皂苷Rb1预处理延缓HUVEC早熟性衰老,SA-β-Gal阳性率明显减少,PAI-1及P16表达减少,Sirt3及SOD2表达均增多,MDA含量降低,SOD2活性升高(P <0.05)。与人参皂苷Rb1处理组相比,Sirt3特异性抑制剂3-TYP处理后,人参皂苷Rb1保护作用消失,HUVEC PAI-1及P16表达升高,Sirt3及SOD2表达均减少。【结论】人参皂苷Rb1可通过激活Sirt3/SOD2信号通路延缓高糖诱导的HUVEC早熟性衰老。(本文来源于《中山大学学报(医学版)》期刊2019年03期）
王雪,方靖漪,杨静,修成奎,雷燕[8]（2019）在《人参叁七川芎提取物对高糖高脂诱导的衰老血管内皮细胞自噬的影响》一文中研究指出目的观察人参叁七川芎提取物对血管内皮细胞自噬流的影响,探讨其延缓高糖高脂诱导血管内皮细胞衰老的作用机制。方法采用40 mmol/L葡萄糖和100μmol/L棕榈酸钠造模,实验分为空白对照组、衰老模型组和中药组(200 mg/L),干预48 h。采用CCK-8检测细胞增殖能力;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老程度;Western blot检测细胞p16、p21、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和p62蛋白表达;免疫荧光检测自噬流变化。结果与空白对照组比较,衰老模型组细胞增殖能力和LC3B-Ⅱ表达降低,β-半乳糖苷酶蓝染细胞数量和p16、p21、p62蛋白表达增加,并存在自噬流阻滞;与衰老模型组比较,中药组细胞增殖能力增强,LC3B-Ⅱ表达升高,β-半乳糖苷酶蓝染细胞数量减少,p16、p21和p62表达降低,自噬流畅通。结论人参叁七川芎提取物可延缓高糖高脂引起的血管内皮细胞衰老,其机制可能与增强细胞自噬活性有关。(本文来源于《中国中医药信息杂志》期刊2019年04期）
苗新宇,朱潇潇,龚燕平,谷昭艳,李春霖[9]（2019）在《原代大鼠主动脉内皮细胞衰老模型的建立》一文中研究指出目的建立血管衰老模型,观察比较高葡萄糖(HG)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、过氧化氢(H_2O_2)及棕榈酸(PA)对原代大鼠主动脉内皮细胞(RAEC)诱导衰老作用。方法取2月龄雄性Wistar大鼠,组织贴块法提取原代RAEC并采用免疫荧光细胞化学染色检测CD31的表达并进行鉴定。分别应用30 mmol/L葡萄糖(HG)、 10μmol/L AngⅡ、 100μmol/L H_2O_2、 0.5 mmol/L PA处理原代RAEC 24 h。采用β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况,实时荧光定量PCR检测衰老相关基因P16 mRNA的水平, Western blot法检测衰老相关基因P16、 P21、 P53蛋白水平;免疫荧光细胞化学染色观察P16的表达, CCK-8法观察细胞存活率。结果与对照组相比,各处理组RAEC中β-半乳糖苷酶染色细胞增加,以H_2O_2、 PA处理组更明显; HG、 AngⅡ、 H_2O_2、 PA处理均可增加RAEC的P16 mRNA水平; AngⅡ、 H_2O_2、 PA处理均可增强RAEC的P16、 P21蛋白水平,以H_2O_2组最显着。各处理组细胞P16表达均增强,与对照组相比, HG组与AngⅡ组细胞存活率变化不大, H_2O_2组与PA组细胞存活率显着降低。结论 HG、 AngⅡ、 H_2O_2及PA均可诱导建立RAEC衰老模型,以H_2O_2诱导衰老作用最强。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2019年03期）
付瑞[10]（2019）在《Th17/IL-17在小鼠血管内皮细胞衰老进程中的变化及意义》一文中研究指出背景:衰老是自古以来人们一直在研究并去尝试减缓的问题,而在医学领域里,血管系统作为维持人体生命结构的重要组成之一,研究心血管系统的衰老具有着重要意义。血管内皮细胞分隔着血液成分,起着保护作用,同时其可分泌血管紧张素,以及表面的血小板依赖成分在机体的血管平衡稳态过程和抗凝过程发挥重要作用。血管内皮衰老后,形态学可见到细胞之间的空隙变大,细胞核和体积也增大且细胞形态不规则。衰老的血管结构不再完整,容易引起血管舒张及血栓形成,造成炎性物质的堆积,从而反馈调节又加重衰老。血管内皮的衰老对心血管疾病有着重要关系。辅助性T细胞17(helper T cells 17,Th17)是2007年新发现的一类不同于Th1,Th2的CD4~+辅助性T细胞,可以分泌多种细胞因子,其中白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)是Th17细胞的主要效应因子,Th17在先天免疫和获得性中起重要作用。并参与许多重要的生理或病理过程,如防御细胞外细菌感染,介导慢性炎症,器官移植的免疫排斥,自身免疫疾病和肿瘤的发作。目前的研究表明其在炎性反应、自身免疫性疾病等疾病中发挥重要作用。同时IL-17/Th17也可影响许多炎症因子的分泌与表达。而在小鼠体内,根据其CD44与CD62L的表达情况不同,可将其分为记忆性T细胞(CD4~+CD44~(high)CD62L~(low))和初始T细胞(CD4~+CD44~(low)CD62L~(high))。衰老涉及到了包括CD4~+T淋巴细胞在内的一些免疫细胞,而Th17细胞分泌白细胞介素-17,诱导炎症因子IL-6参与炎症反应,从而涉及到了炎症衰老这一假说,将Th17与衰老联系。衰老往往伴随着许多疾病(包括感染,癌症和一些自身免疫疾病)的发病率和严重程度的增加,导致生活质量下降,这些疾病都具有免疫成分的参与,免疫与衰老密切相关。血管内皮细胞的衰老和功能障碍参与动脉粥样硬化发生,内皮损伤被认为是动脉粥样硬化的第一个触发因素。此外,内皮细胞的功能障碍和细胞凋亡是斑块侵蚀和血栓形成的主要决定因素,导致急性冠脉综合征等疾病。。IL-17/Th17在血管内皮衰老进程中的作用及机制未有深入研究。在本课题中,检测Th17/IL-17在不同年龄段小鼠血清及脾脏中的表达情况,并通过培养小鼠主动脉原代内皮细胞,分析原代内皮细胞衰老通路变化和其他指标改变。同时检测小鼠血管动脉IL-17/IL-17RA表达情况,分析Th17/IL-17对血管内皮细胞衰老的影响,探讨其在血管内皮细胞衰老进程中的作用与意义,为心血管衰老提供新的方向。目的:研究小鼠原代血管内皮细胞衰老过程所涉及到的通路变化,分析在小鼠在不同年龄阶段其血管组织变化及脾脏和血清的Th17/IL-17表达变化,并分析其在血管内皮细胞衰老中产生的影响与意义。方法:(1)本研究首先以健康青年鼠、中年鼠、老年鼠为研究对象,每组20例,检测各年龄段小鼠血清IL-17浓度,以及相关细胞因子IL-6、细胞衰老相关分泌表型(senescent-associated secretory phenotype,SASP)因子IL-1β和动脉粥样硬化生化标志物Ox-LDL浓度均采用酶联免疫吸附法(Enzyme-linked immune-sorbent assay,ELISA)检测。并分析Th17/IL-17与这些SASP相关因子和炎症标志物表达水平的相关性。采用多参数流式细胞术检测技术,用不同的荧光色素抗体标记细胞,对小鼠脾脏所得的脾细胞悬液的淋巴细胞进行刺激和诱导实验得出Th17细胞的比率;检测CD44和CD62L在鼠Th17细胞中的表达情况;(2)不同年龄段小鼠收集主动脉做HE染色和免疫组化,观察衰老过程小鼠动脉血管变化以及IL17/17RA和内皮衰老指标VCAM-1在血管上的表达情况。(3)通过分离培养小鼠主动脉原代内皮细胞,经流式和免疫组化鉴定纯度,β-半乳糖苷酶染色检测原代细胞衰老情况,并检测衰老内皮细胞衰老相关异染色质位点(senescence-associated heterochromatic foci,SAHF)。并收集原代内皮细胞并提取蛋白,western-blot法检测内皮细胞衰老蛋白的表达变化,分析衰老所涉及的主要信号通路。结果:(1)老年鼠血清IL-17(210.82±27.68 pg/ml)及脾脏刺激诱导Th17细胞表达率(39.49±3.81%)显着高于健康青年鼠(88.78±14.35 pg/ml,23.53±4.74%)和健康中年鼠(128.47±16.63 pg/ml,27.28±3.86%)(均P<0.05)(2)青年鼠中年鼠老年鼠Th17细胞中记忆性T细胞(CD4~+CD44~(high)CD62L~(low))细胞表达率分别为(82.57±6.578%)、(76.38±6.45%)、(78.54±6.87%),(P>0.05)。Th17细胞初始T细胞表达率(CD4~+CD44~(low)CD62L~(high)IL-17~+/CD4~+IL17~+T细胞)在青年鼠(5.82±2.61%),中年鼠(7.73±3.26%),老年鼠(6.52±2.96%),各组间表达差异无统计学意义(均P>0.05)。各组Th17细胞以记忆性T细胞为主。(3)老年鼠体内血清IL-6、IL-1β及动脉粥样硬化相关指标ox-LDL浓度明显高于青年鼠和中年鼠,且相关性分析表明,IL-17/Th17与这些指标变化呈有正相关性。(4)小鼠主动脉HE染色和免疫组化结果:主动脉HE染色结果显示青年鼠和中年鼠内皮细胞排列整齐,细胞之间连接紧密,内皮下间隙小。而老年鼠动脉较青年鼠和中年鼠血管壁增厚,内膜变粗糙,内皮间隙增宽,排列疏松。主动脉免疫组化结果显示,老年鼠动脉IL-17、IL-17RA和内皮衰老指标VCAM-1表达水平均明显高于青年鼠和中年鼠。(5)分离培养鼠原代内皮细胞,衰老染色结果显示,老年鼠原代血管内皮细胞具有阳性细胞表达率和衰老相关异位染色质(SAHF)表达明显增多,Western-Blot结果表明原代内皮细胞P16、P19、P21、P53和Rb等衰老蛋白蛋白表达明显增强。结论:(1)老年鼠Th17表达率、体内血清IL-17、IL-6浓度以及以及SASP因子IL-1β浓度较青年和中年鼠明显增高;Th17/IL-17的表达水平与IL-6、IL-1β浓度水平呈显著正相关。(2)老年鼠原代血管内皮衰老染色阳性率、SAHF表达率较青年和中年鼠明显增高。(3)衰老小鼠其主动脉IL-17及受体IL-17RA、血管内皮衰老指标VCAM-1表达明显增多。由此可见,Th17/IL-17在衰老进程中表达明显增强,与小鼠血管内皮细胞衰老密切相关,为衰老和心脑血管疾病研究提供新的研究点。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-03-01）
内皮细胞衰老论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探究不同浓度的17β-雌二醇(17β-Estradiol,17β-E_2)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H_2O_2)诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老模型的影响。方法构建HUVECs衰老模型后将细胞分为空白组,衰老组,17β-E_2阴性对照组,低浓度、生理浓度及高浓度17β-E_2组,CCK-8检测细胞活力;Western blot检测细胞衰老程度相关蛋白p-Rb、Rb、细胞自噬水平相关蛋白P6_2、LC3B以及衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色。结果与空白组相比,衰老组p-Rb/Rb比值增加,细胞活力下降,SA-β-Gal染色阳性细胞数目多,与衰老组比较,高浓度和生理浓度17β-E_2组p-Rb/Rb比值降低,SA-β-Gal染色阳性细胞数减少,P6_2表达量减少,LC3-Ⅱ/LC3-I蛋白表达升高,细胞活力增加。结论 17β-E_2能通过上调自噬减轻H_2O_2诱导的HUVECs衰老,且与其浓度有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
内皮细胞衰老论文参考文献
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