导读:本文包含了细胞核活性论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:载脂蛋白A-Ⅰ,受体,肾上腺素能β_3,转录因子
细胞核活性论文文献综述
曹晓菁,李艳芳,金泽宁[1]（2019）在《β_3肾上腺素受体调节肝细胞核因子活性促进肝细胞载脂蛋白A-Ⅰ基因的转录》一文中研究指出目的探讨β_3肾上腺素受体(β_3-AR)对肝细胞载脂蛋白A-Ⅰ(apoA-Ⅰ)基因转录的调控作用。方法不同浓度(10-5～10-10 mol/L)β_3-AR激动剂(BRL37344)和拮抗剂(SR59230A)分别孵育HepG2细胞,CCK8检测细胞活性。将HepG2细胞分为对照组、激动剂组(10-6 mol/L的BRL37344)和拮抗剂组(10-7 mol/L的SR59230A),孵育6h;RT-qPCR检测apoA-ⅠmRNA表达;ELISA检测细胞外基质apoA-Ⅰ分泌水平;染色质免疫共沉淀联合RT-PCR检测肝细胞核因子(HNF)-4和HNF-3及早期生长反应蛋白1(EGR-1)。结果 HepG2细胞在10-6～10-8 mol/L的BRL37344和SR59230A区间内生长增殖良好,孵育6h和24h时细胞呈现较高活性。与对照组比较,激动剂组肝细胞apoA-ⅠmRNA和细胞外基质apoA-Ⅰ分泌水平上调[2.9±0.5 vs 1.0±0.2,(590.1±54.6)μg/ml vs(395.5±23.4)μg/ml,P<0.01],且HNF-4和HNF-3结合活性显着升高(90.4±13.4 vs 17.2±1.2,78.3±20.6 vs 19.7±2.5,P<0.01)。3组肝细胞EGR-1结合活性比较,无统计学差异(P>0.05)。结论激活β_3-AR使肝细胞HNF-4和HNF-3活性增高,可能是β_3-AR上调肝脏apoA-Ⅰ转录水平的分子机制之一。(本文来源于《中华老年心脑血管病杂志》期刊2019年09期）
王羚瑶[2]（2019）在《HeLa细胞核抽出物中一种新的具有H2A.Z置换活性组分的纯化和鉴定》一文中研究指出在真核细胞中,遗传信息储存在DNA中并且以核小体为基本单位装载在染色质中。H2A.Z是存在于酵母和人细胞中的H2A一个高度保守的变体,它在染色质中的存在被认为与基因转录调控、DNA损伤修复、基因组稳定性相关。将组蛋白变体置换进、出染色质是染色质重塑中非常重要的组成部分。已经有很多发表的论文中报导了一些具有H2A.Z置换功能的酶。酵母中Swr1和它在人细胞中的两个同源物SRCAP和P400/TIP60是已经比较清楚的被证实的具有活性的染色质重塑酶。最近的研究表明,H2A..Z可以被TIP60置换进DSB(DNA双链断裂)位点,而不依赖于TIP60的乙酰基转移酶活性。H2A.Z缺失会导致非同源末端连接(NHEJ)复合物KU70/KU80无法募集到DSB部位,使DSB的修复过程无法继续。H2A.Z被置换进核小体是发挥了基因转录激活亦或抑制作用还不十分清楚,但是H2A.Z在promoter区临近核小体的存在会导致DNA对于RNA聚合酶可接近性的改变,从而能影响基因转录。另外,H2A.Z在DSB损伤修复中也起着非常重要的作用。为了筛选其它并没有被发现可能具有H2A.Z置换功能的蛋白组分,我们将100LHeLa细胞核抽出物蛋白进过多次柱层析分离,并应用体外组蛋白变体置换实验跟踪置换活性。我们发现了能够将H2A.Z置换进核小体的蛋白活性组分,之后我们进一步在体内、体外实验中证实该蛋白组分的H2A.Z置换活性及其相关特性。蛋白质谱结果显示活性组分中富含DNA-PKcs和condensin complexⅡ的所有亚基的肽段。在之后进行的亲水一疏水层析中,这两个蛋白组分的募集峰分开了,并且蛋白峰的体外H2A.Z置换活性主要存在于DNA-PKcs的组分中。进一步的实验发现,体外纯化的condensin复合物没有H2A.Z的置换活性,说明具有H2A.Z置换活性的蛋白是DNA-PKcs。另外,利用从细胞中纯化的DNA-PKcs蛋白也证实其具有体外H2A.Z置换活性,并且随着DNA-PKcs的添加量的增加,置换活性也逐渐增加。由于H2A.Z在DNA双链断裂之后在损伤位点附近有募集,我们在两种损伤细胞模型中敲低DNA-PKcs观察其对H2A.Z募集的影响。在X射线辐射模型中,H2A.Z在1h左右有募集,敲低DNA-PKcs能够导致H2A.Z募集峰丰度降低和滞后。在40HT诱导的DNA双链断裂模型中,敲低DNA-PKcs可以导致H2A.Z在DSB部位的募集明显滞后(滞后了 2h)。接下来我们对DNA-PKcs调控H2A.Z置换的分子机制进行了研究,发现DNA-PKcs可能是通过磷酸化H2A,改变染色质结构,进而将H2A.Z置换入染色质中,并且这种活性能被DNA-PKcs的激酶抑制剂NU7026所抑制。但是DNA-PKcs在此过程中有没有磷酸化其它蛋白,以及H2A被DNA-PKcs磷酸化的位点等,还有待进一步验证。综上所述,我们认为DNA-PKcs是一种新的具有将H2A.Z置换入核小体功能的蛋白,这种置换活性与其对H2A的磷酸化相关,但它具体的作用机制仍有待进一步的研究。(本文来源于《吉林大学》期刊2019-06-01）
刘宇,张日欣,李钟淑[3]（2018）在《小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构早期端粒酶活性的测定》一文中研究指出采用端粒酶重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)-银染法,对小鼠卵母细胞、体内受精胚胎及重构胚的各阶段端粒酶活性进行测定,对PCR产物的电泳条带进行灰度值分析,计算端粒酶总产品总量。结果表明:(1)体内受精胚胎及核移植重构胚各阶段的端粒酶活性随胚胎分裂呈上升趋势,囊胚期最高(P<0.05);(2)体内受精胚胎的端粒酶活性高于体细胞核移植重构胚端粒酶活性。同时进行囊胚计数并测定单卵裂球相对端粒酶活性,结果表明:单卵裂球的端粒酶活性呈下降趋势,囊胚期端粒酶活性最低(P<0.05)。以上结果说明小鼠卵母细胞及体细胞核移植重构胚端粒酶活性变化与细胞发育水平及细胞发育全能性有关。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2018年03期）
敬雨亭,熊翔,明阳,杨光,赵静雅[4]（2018）在《具有pH响应及细胞核靶向功能的胶束的体内抗肿瘤活性的研究》一文中研究指出目的:研究具有pH响应性及细胞核靶向功能的,由细胞穿透肽Tat修饰的聚乙二醇-聚己内酯共聚物胶束(PECL/DA-Tat-M)的体内抗肿瘤活性。方法:用溶剂挥发法制备了胶束,通过透射电镜(TEM)观察胶束形貌和大小。考察在不同pH条件下胶束的药物释放行为。在Bal b/c雌性小鼠的乳腺脂肪垫注射鼠源4T1乳腺癌细胞,建立小鼠乳腺癌原位模型,通过尾静脉向荷瘤小鼠注射具有pH响应及细胞核靶向功能的载药胶束。记录18天治疗期内肿瘤的体积、小鼠体重以及存活率的变化情况,并进行肿瘤组织的免疫组化研究。结果:TEM结果显示PECL/DA-Tat-M胶束呈球形结构,粒径在80 nm左右。在72小时内,胶束在pH 5.0条件释放80%的药物,而在pH 7.4条件下仅释放11%的药物。PECL/DA-Tat-M胶束组小鼠的肿瘤生长最缓慢,在治疗第18天,非靶向胶束(PECL-M)组肿瘤体积为0.82 cm3,PECL/DA-Tat-M组的肿瘤体积仅有0.51 cm3。生理盐水(Saline)组和空白胶束(PECL/DA-Tat-blank M)组的小鼠的肿瘤生长较为迅速,体积分别是PECL/DA-Tat-M胶束组肿瘤体积的4.43倍和3.76倍,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);各组小鼠经过治疗后体重均呈现出上升趋势;治疗期后第42天,PECL/DA-Tat-M胶束组和非靶向胶束(PECL-M)组小鼠的存活率分别为60%和40%,其他组的小鼠均在39天内全部死亡(n=5);肿瘤组织免疫组化分析结果表明PECL/DA-Tat-M载药胶束能有效抑制肿瘤生长,其抑瘤率(IR)、及肿瘤细胞凋亡率(AR)明显高于其他组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:具有pH响应及细胞核靶向功能的胶束(PECL/DA-Tat-M)具有良好的体内抗乳腺癌活性。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2018年01期）
孙冰洁,陈示洁,邓龙飞,丁晨虹,陈斐[5]（2017）在《基于报告基因系统的肝细胞核因子4α活性检测体系的建立》一文中研究指出目的建立一个基于荧光素酶报告基因系统的肝细胞核因子4α(HNF4α)活性检测系统,筛选可调控HNF4α活性的小分子化合物。方法采用亲和层析法纯化HNF4α蛋白,行蛋白热迁移实验检测相关DNA片段及小分子化合物与HNF4α蛋白的直接相互作用。分别构建含有3个拷贝和9个拷贝的Ninjurin1(NINJ1)基因启动子区HNF4α反应元件的荧光素酶报告基因质粒pGL3-NINJ1-3p和pGL3-NINJ1-9p,转染肝癌细胞,采用荧光素酶报告基因法检测肝癌细胞内HNF4α转录活性的改变,qPCR检测小分子化合物木犀草素或阿尔维林处理后肝癌细胞中HNF4α及下游基因的表达情况,荧光素酶报告基因法检测小分子化合物处理后细胞内HNF4α转录活性的改变。结果蛋白热迁移实验证实,NINJ1基因启动子区HNF4α的DNA结合片段可与HNF4α蛋白结合。在过表达HNF4α的肝癌细胞中,pGL3-NINJ1-3p和pGL3-NINJ1-9p均可检测到肝癌细胞中HNF4α活性的改变,且pGL3-NINJ1-9p较pGL3-NINJ1-3p的检测灵敏度更高(P<0.01)。木犀草素和阿尔维林与HNF4α蛋白存在直接相互作用,分别下调和上调HNF4α靶基因;pGL3-NINJ1-9p可检测到木犀草素和阿尔维林对HNF4α转录活性的影响。结论利用报告基因载体pGL3-NINJ1-9p成功建立了HNF4α活性的检测系统,为筛选调控HNF4α活性的小分子化合物等提供了基础工具。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2017年09期）
李怀秋[6]（2017）在《细胞核与线粒体双靶向羟基喜树碱纳米粒的制备及其抗肿瘤活性研究》一文中研究指出羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)是一种来源于植物的重要抗癌药物,具有高效、低毒、抗癌谱广、无交叉耐药等优点。研究发现,HCPT完整的内酯环结构是其发挥抗肿瘤作用的关键。然而,内酯型HCPT难溶于水,且在生理环境中不稳定;开环的羧酸盐型HCPT水溶性好,但是抗癌活性低且毒副作用严重。HCPT在干扰细胞核DNA复制的同时可引发细胞线粒体功能障碍,导致线粒体膜电位降低,线粒体膜通透性改变,释放细胞色素C,引起细胞凋亡。近年来研究发现,纳米药物递送系统在改善药物水溶性和增强药物疗效方面效果显着。因此,构建细胞核与线粒体双靶向HCPT纳米递药系统,通过肿瘤组织的渗透与滞留增强效应(EPR效应)将HCPT富集于肿瘤部位,增强肿瘤细胞对HCPT的摄取,增加HCPT在细胞核和线粒体的分布量,对增强HCPT的抗肿瘤作用,减少毒副作用具有重要意义。目的:以叶酸(FA)为肿瘤细胞靶向配体,以叁苯基磷(TPP)为线粒体和细胞核靶向分子,以聚(乳酸-羟基乙酸)共聚物(PLGA)为疏水材料,以聚乙二醇(PEG)为亲水材料,分别构建包封HCPT的具有p H响应和氧化还原响应的细胞核与线粒体双靶向纳米粒,旨在增加内酯型HCPT的稳定性,改善HCPT在体内的分布,促进肿瘤细胞对药物的摄取,提高HCPT的抗肿瘤活性。方法:1.以FA、TPP、PLGA、PEG为原料,合成PLGA-hyd-PEG4k-FA、PLGA-SS-PEG4kFA和PLGA-PEG2k-TPP叁种聚合物,并通过核磁氢谱(1H NMR)和红外图谱(IR)对目标产物进行结构鉴定。2.采用乳化溶剂挥发法,以PLGA-PEG2k-TPP和PLGA-hyd-PEG4k-FA为两亲性材料,制备包封HCPT纳米粒HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA;以PLGAPEG2k-TPP和PLGA-SS-PEG4k-FA为两亲性材料,制备包封HCPT纳米粒HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA。以粒径、zeta电位、多分散系数(PDI)和载药量为指标,优化制备载HCPT纳米粒的处方。3.利用zeta电位和激光粒度测定仪、荧光分光光度计和透射电子显微镜(TEM)对载药纳米粒的粒径、zeta电位、载药量、外观形态以及稳定性进行表征。4.采用透析法结合荧光分光光度计观察载药纳米粒在不同的释放介质中的释药特性;通过检测HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA在p H值为5.0、6.5、7.4的PBS中zeta电位变化,考察其p H响应性;通过检测HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGASS-PEG4k-FA在GSH浓度为0.1μM和10 m M的PBS(p H7.4)中zeta电位变化,考察其氧化还原响应性。5.通过MTT法检测载药纳米粒对Hep G2细胞和SW620细胞的细胞毒性;利用caspase-3试剂盒检测载药纳米粒诱导SW620细胞发生凋亡的作用;采用流式细胞术检测载药纳米粒对SW620细胞周期的影响;利用激光共聚焦显微镜观察Hep G2细胞和SW620细胞对载药纳米粒的摄取和纳米粒转运的HCPT在Hep G2细胞和SW620细胞中的分布;通过JC-1试剂观察载药纳米粒对SW620细胞线粒体膜电位的影响。6.采用皮下注射SW620细胞构建人结肠癌荷瘤裸鼠模型;利用活体成像仪和组织冰冻切片DAPI染色法观察载药纳米粒给药后HCPT在荷瘤裸鼠体内的分布;通过测定荷瘤裸鼠肿瘤体积、体重变化及肿瘤抑制率评价载药纳米粒的体内抗肿瘤活性;通过H&E染色观察荷瘤裸鼠各器官和肿瘤的组织形态变化。结果:1.1H NMR和IR鉴定结果显示所合成的PLGA-hyd-PEG4k-FA、PLGA-SS-PEG4k-FA和PLGA-PEG2k-TPP均为目标产物。2.制备HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA和HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA的最佳处方分别为PLGA-PEG2k-TPP:PLGA-hyd-PEG4kFA=4:16(mg/mg),PLGA-PEG2k-TPP:PLGA-SS-PEG4k-FA=12:8(mg/mg)。3.HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA的平均粒径为104 nm,zeta电位为-8.1 m V,载药量为6.56%;HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA的平均粒径为98 nm,zeta电位为-18.6 m V,载药量为6.54%。TEM图像显示两种纳米粒为球形。两种纳米粒在p H7.4的PBS中,8天内粒径分布无明显变化。4.体外释药实验结果显示,随着释放介质p H值的降低,HCPT@PLGA-PEG2kTPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA的累积释药量显着增加;随着释放介质中GSH浓度的升高,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA的累积释药量明显增多。当介质p H值从7.4变为5.0时,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA的zeta电位可发生电荷翻转;当介质GSH浓度从0.1μM增加到10 m M时,HCPT@PLGA-PEG2kTPP/PLGA-SS-PEG4k-FA的zeta电位也能发生电荷翻转。5.MTT结果显示,与Hep G2细胞和SW620细胞分别孵育48 h后,HCPT@PLGAPEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA的细胞毒性明显高于游离HCPT和HCPT@PLGAhyd-PEG4k-FA;HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA的细胞毒性明显高于游离HCPT和HCPT@PLGA-SS-PEG4k-FA。Caspase-3活性检测结果表明,相比于游离HCPT,载药纳米粒能显着提高SW620细胞的caspase-3活性水平;相比于HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGASS-PEG4k-FA提高SW620细胞caspase-3活性的作用更强。细胞周期影响实验结果表明,与游离HCPT相比,载药纳米粒诱导SW620细胞发生S期阻滞的作用更强。6.Hep G2细胞和SW620细胞对载药纳米粒的摄取具有时间依赖性。孵育4.0 h时,肿瘤细胞对载药纳米粒的摄取明显高于游离HCPT,而且肿瘤细胞对HCPT@PLGAPEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA的摄取显着高于HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGAhyd-PEG4k-FA。相比于HCPT@PLGA-hyd-PEG4k-FA,HCPT@PLGA-PEG2kTPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA转运的HCPT在细胞核与线粒体中分布的量显着增多;与HCPT@PLGA-SS-PEG4k-FA相比,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA转运的HCPT在细胞核与线粒体中分布的量显着增多。7.JC-1检测结果显示,相比于游离HCPT,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hydPEG4k-FA和HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA能显着降低SW620细胞线粒体膜电位;与HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA相比,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA降低SW620细胞线粒体膜电位的作用更强。8.活体成像和组织冰冻切片DAPI染色结果显示,与游离HCPT治疗组相比,载药纳米粒给药12 h后,在裸鼠肿瘤部位HCPT荧光信号显着增强并持续到给药后24 h,纳米粒表现出良好的肿瘤靶向性。体内抗肿瘤活性结果表明,相比于游离HCPT治疗组,载药纳米粒能够显着地抑制肿瘤生长,而且对裸鼠体重无明显影响;与HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA相比,HCPT@PLGA-PEG2kTPP/PLGA-SS-PEG4k-FA对荷瘤裸鼠的肿瘤抑制率显着提高。H&E染色结果表明载药纳米粒对荷瘤裸鼠的主要器官组织无明显损伤,但能显着地破坏肿瘤组织,降低肿瘤细胞密度。结论:HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA和HCPT@PLGA-PEG2kTPP/PLGA-SS-PEG4k-FA分别具有良好的p H响应性和氧化还原响应性。HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4k-FA和HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGASS-PEG4k-FA可有效增强肿瘤细胞对HCPT的摄取,提高HCPT在细胞核与线粒体中的分布,使HCPT发挥更强的细胞毒性。HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hydPEG4k-FA和HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA具有良好的体内肿瘤靶向性,增强了HCPT的体内抗肿瘤活性。与HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-hyd-PEG4kFA相比,HCPT@PLGA-PEG2k-TPP/PLGA-SS-PEG4k-FA具有更好的体内抗肿瘤效果。(本文来源于《第四军医大学》期刊2017-05-01）
罗莉,侯凤艳,严军,梁华平[7]（2016）在《活性氧与细胞核共染影响因素的实验研究》一文中研究指出目的利用二氯荧光黄二乙酸酯(2',7'-Dichlorodihydrofluorescein diacetate,DCFH-DA)探针和4',6'-二脒基-2-苯基吲哚(4',6'-diamidino-2-phenylindole,DAPI)探讨影响活性氧(reactive oxidative species,ROS)和细胞核共染的因素,以优化最佳的研究方案。方法以RAW 264.7细胞株为研究对象,首先采用不同浓度的多聚甲醛分别固定10、30 min,1、2、4 h,进行ROS和DAPI检测;再用不同的固定试剂分别在ROS检测前和后固定,检测ROS荧光强弱;将DAPI在DCFH-DA探针加入前12、4、2、1 h,20 min加入和两者同时加入,检测DAPI染色情况;最后,DAPI在ROS检测前12 h加入,以不加DAPI组为对照,分别用LPS和H_2O_2刺激产生ROS并检测,计算其荧光数和平均荧光强度,利用SPSS18.0软件进行t检验分析。结果不同固定浓度、固定试剂、固定顺序的结果均表明,固定虽然会增强DAPI的染色,但同时会减弱ROS的荧光强度;活细胞DAPI染色时,随着染色时间的延长,核着色强度和均匀度都更好;DAPI染色12 h后检测ROS,对ROS的荧光数和平均荧光强度都没有统计学影响(P>0.05)。结论 DCFH-DA探针法检测ROS荧光时不能与细胞固定连用;DAPI在DCFH-DA探针孵育前12 h加入,并不影响ROS荧光的产生和检测,该研究方案可有效实现ROS与DAPI的共染。(本文来源于《第叁军医大学学报》期刊2016年06期）
贺薇,黄莺[8]（2014）在《FRAP技术揭示PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性依赖于其配基及转录活性》一文中研究指出目的运用光漂白荧光恢复(FRAP)技术检测一系列带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的野生型及突变型的早幼粒细胞性白血病锌指-维甲酸受体α(PLZF-RARα)表达蛋白分子在细胞核内运动性。方法运用凝胶迁移实验(EMSA)检测带有GFP标签的野生型及突变型PLZF-RARα融合蛋白结合维甲酸反应元件(RARE)的能力;运用FRAP以及共聚焦荧光显微镜分析一系列GFP-PLZF-RARα及其突变体表达蛋白在细胞核内的运动性;运用转录抑制剂放线菌素D(Act D)和/或全反式维甲酸(ATRA)处理GFP-RARα和GFPPLZF-RARα表达细胞,运用FRAP观察PLZF-RARα和野生型RARα在细胞核内的运动性变化情况。结果位于PLZF结构区的POZ以及锌指结构域不仅是引起PLZF-RARα核内运动性降低的主要原因,同时也是引起配体诱导的核内运动性减慢的关键因素。Act D能够显着地抑制PLZF-RARα和RARα蛋白分子在细胞核内的运动性;分化诱导剂ATRA处理可逆转Act D引起的RARα核内运动性降低效应,但经Act D处理的PLZF-RARα分子无此效应。结论运用FRAP技术发现PLZF-RARα融合蛋白在细胞核内的运动性减慢可能依赖于配体的存在及其转录活性。(本文来源于《上海交通大学学报(医学版)》期刊2014年10期）
陈旭昕,孟激光,刘振千,段蕴铀,韩志海[9]（2014）在《下调paralemmin-3表达对脂多糖诱导的肺泡上皮细胞核转录因子-κB活性的影响》一文中研究指出目的研究下调paralemmin-3(PALM3)表达对脂多糖(LPS)诱导的肺泡上皮A549细胞核转录因子-κB(NF-κB)活性的影响。方法将针对PALM3的小干扰核糖核苷酸(siRNA)转染A549细胞后(PALM3siRNA转染组),用RT-PCR法检测PALM3 mRNA表达水平,同时设立control siRNA转染组及正常细胞组作为对照。转染48 h后,对3组细胞同时给予LPS刺激12 h后,收集细胞核蛋白和培养上清液,用ELISA的方法检测各组细胞培养上清液中的TNF-α、IL-6和IL-1β水平,用凝胶电泳迁移率实验的方法检测各组细胞NF-κB活性。结果特异性siRNA转染后成功下调PALM3在A549细胞中的表达;给予LPS刺激后,与正常细胞组及control siRNA转染组相比,PALM3 siRNA转染组细胞释放炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β减少,同时PALM3 siRNA转染组细胞中NF-κB活性受抑。结论下调PALM3的表达可减轻A549细胞对LPS诱导的炎症反应,调控PALM3的表达有望成为治疗急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征等炎症失控性疾病的新靶点。(本文来源于《广东医学》期刊2014年19期）
周健恺,徐善良,邱成功,陈苹,方增冰[10]（2014）在《Cu~(2+)急性毒性下银鲳幼鱼红细胞核异常和抗氧化酶活性的变化》一文中研究指出为探究Cu2+对银鲳幼鱼的致毒效应,采用静态毒性实验方法,开展了Cu2+对银鲳幼鱼的急性暴露实验,研究了不同浓度的Cu2+对银鲳幼鱼外周血细胞微核率、核异常率和肝脏抗氧化酶(SOD、CAT、GPX)活性变化的影响。结果表明:Cu2+对银鲳幼鱼48和96 h的LC50分别为0.860和0.770 mg/L,安全质量浓度为0.077 mg/L;Cu2+的浓度与银鲳幼鱼红细胞微核率及核异常率具有明显的剂量效应关系,在相同浓度Cu2+胁迫下,核异常率又普遍高于微核率;不同浓度Cu2+胁迫下银鲳幼鱼肝组织中的SOD、CAT、GPX活性均表现为低浓度被诱导而高浓度受抑制的规律,与Cu2+浓度呈抛物线型剂量效应关系。研究认为红细胞微核率、核异常率与SOD、CAT和GPX活性的变化均可以反映银鲳幼鱼受伤害的程度,并可用作银鲳安全性风险评价的参考依据,其中SOD还可以灵敏地指示低浓度的早期Cu2+污染。(本文来源于《水产学报》期刊2014年08期）
细胞核活性论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
在真核细胞中,遗传信息储存在DNA中并且以核小体为基本单位装载在染色质中。H2A.Z是存在于酵母和人细胞中的H2A一个高度保守的变体,它在染色质中的存在被认为与基因转录调控、DNA损伤修复、基因组稳定性相关。将组蛋白变体置换进、出染色质是染色质重塑中非常重要的组成部分。已经有很多发表的论文中报导了一些具有H2A.Z置换功能的酶。酵母中Swr1和它在人细胞中的两个同源物SRCAP和P400/TIP60是已经比较清楚的被证实的具有活性的染色质重塑酶。最近的研究表明,H2A..Z可以被TIP60置换进DSB(DNA双链断裂)位点,而不依赖于TIP60的乙酰基转移酶活性。H2A.Z缺失会导致非同源末端连接(NHEJ)复合物KU70/KU80无法募集到DSB部位,使DSB的修复过程无法继续。H2A.Z被置换进核小体是发挥了基因转录激活亦或抑制作用还不十分清楚,但是H2A.Z在promoter区临近核小体的存在会导致DNA对于RNA聚合酶可接近性的改变,从而能影响基因转录。另外,H2A.Z在DSB损伤修复中也起着非常重要的作用。为了筛选其它并没有被发现可能具有H2A.Z置换功能的蛋白组分,我们将100LHeLa细胞核抽出物蛋白进过多次柱层析分离,并应用体外组蛋白变体置换实验跟踪置换活性。我们发现了能够将H2A.Z置换进核小体的蛋白活性组分,之后我们进一步在体内、体外实验中证实该蛋白组分的H2A.Z置换活性及其相关特性。蛋白质谱结果显示活性组分中富含DNA-PKcs和condensin complexⅡ的所有亚基的肽段。在之后进行的亲水一疏水层析中,这两个蛋白组分的募集峰分开了,并且蛋白峰的体外H2A.Z置换活性主要存在于DNA-PKcs的组分中。进一步的实验发现,体外纯化的condensin复合物没有H2A.Z的置换活性,说明具有H2A.Z置换活性的蛋白是DNA-PKcs。另外,利用从细胞中纯化的DNA-PKcs蛋白也证实其具有体外H2A.Z置换活性,并且随着DNA-PKcs的添加量的增加,置换活性也逐渐增加。由于H2A.Z在DNA双链断裂之后在损伤位点附近有募集,我们在两种损伤细胞模型中敲低DNA-PKcs观察其对H2A.Z募集的影响。在X射线辐射模型中,H2A.Z在1h左右有募集,敲低DNA-PKcs能够导致H2A.Z募集峰丰度降低和滞后。在40HT诱导的DNA双链断裂模型中,敲低DNA-PKcs可以导致H2A.Z在DSB部位的募集明显滞后(滞后了 2h)。接下来我们对DNA-PKcs调控H2A.Z置换的分子机制进行了研究,发现DNA-PKcs可能是通过磷酸化H2A,改变染色质结构,进而将H2A.Z置换入染色质中,并且这种活性能被DNA-PKcs的激酶抑制剂NU7026所抑制。但是DNA-PKcs在此过程中有没有磷酸化其它蛋白,以及H2A被DNA-PKcs磷酸化的位点等,还有待进一步验证。综上所述,我们认为DNA-PKcs是一种新的具有将H2A.Z置换入核小体功能的蛋白,这种置换活性与其对H2A的磷酸化相关,但它具体的作用机制仍有待进一步的研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞核活性论文参考文献
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