导读:本文包含了倍半萜内酯类类化合物论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:上皮-间质转化,肾小管,肾间质纤维化,UUO
倍半萜内酯类类化合物论文文献综述
李红瑜,彭芬芬,陈晓雯,刘文婷,龚望球[1]（2016）在《倍半萜烯内酯类化合物衍生物ACT001抑制肾脏上皮-间质转化》一文中研究指出目的肾间质纤维化是所有慢性肾脏病的最终转归,迄今尚无有效的治疗手段,而上皮-间质转化是其进展的关键机制。本课题组自主研发了倍半萜内酯类化合物衍生物ACT001,为NF-КB抑制剂,具有显着抗炎效应及抗肿瘤、免疫调节作用。拟观察ACT001对肾间质纤维化的影响,旨在探求治疗CKD的新药物。方法体内:选8周龄的C57小鼠,随机分组(n=6):假手术组(sham)、单侧输尿管梗阻模(本文来源于《2016年中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会学术年会论文摘要汇编》期刊2016-11-10）
陈思佳,王建成,陈晓雯,杜晓燕,龙海波[2]（2015）在《倍半萜烯内酯类化合物衍生物对db/db小鼠胰岛细胞的保护作用及其作用机制研究》一文中研究指出目的:2型糖尿病中存在胰岛β细胞进行性受损。保护β细胞功能是延缓2型糖尿病进展的重要手段。本研究主要观察倍半萜烯内酯类衍生物ACT001对-db/db小鼠胰岛β细胞的保护作用并探讨其潜在的机制。方法:以自发性2型糖尿病-db/db小鼠为研究对象,随机分为2组:db/db糖尿病模型组(本文来源于《中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2015年学术年会资料汇编》期刊2015-10-15）
朱华野,朴惠顺[3]（2015）在《倍半萜内酯类化合物抗肿瘤作用机制的研究进展》一文中研究指出倍半萜内酯类化合物在自然界中分布广泛,具有较强的抗肿瘤活性。现以国内外文献为基础,对倍半萜内酯类化合物抗肿瘤作用机制的研究进展进行综述。(本文来源于《华西药学杂志》期刊2015年03期）
王笑晴[4]（2015）在《旋覆花来源的新倍半萜内酯类化合物JEUD-38抑制RAW264.7细胞产生NO的作用及机理》一文中研究指出目的:已证实旋覆花属植物在抗肿瘤、抗炎、抑菌、预防肝炎及预防和治疗糖尿病等方面都具有较好的生物活性,具有很高的药用价值。通过前期的研究工作,我们从旋覆花中分离得到了21个单体化合物,其中JEUD-38(1-oxo-4αH-eudesma-5(6),11(13)-dien-12,8β-olide)是一个新的倍半萜内酯类化合物。通过前期的抑制一氧化氮(nitric oxide,NO)生成实验筛查证实JEUD-38具有抑制NO生成的活性,是具有抗炎性质的化合物。利用小鼠巨噬细胞RAW264.7进行体外实验研究该化合物的抑制NO生成的分子作用机制。作用机制包括JEUD-38对诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)的表达、核转录因子-?B(nuclear factor-kappa B,NF-?B)活性和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)的磷酸化等。方法:采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7细胞建立炎症反应模型。1.利用MTT实验研究JEUD-38对RAW264.7细胞的细胞毒性作用,确定化合物的细胞毒性浓度。2.利用Griess法研究JEUD-38对NO的抑制作用,检测NO的释放量。3.利用Western blot方法研究JEUD-38对LPS诱导的RAW264.7细胞的抗NO作用机制:检测i NOS以及其上游的两个蛋白通路:NF-?B通路和MAPKs通路中关键信号转导分子的磷酸化水平。结果:JEUD-38显示出抗炎的特性,能够显着减少LPS诱导的NO产生,并以浓度依赖的方式抑制LPS诱导的i NOS的蛋白表达。作用机制研究中发现,JEUD-38能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中NF-?B的活性,其作用是通过抑制抑制因子-?B-?(inhibitory factor-?B-?,I?B-?)的磷酸化和降解实现的。同时JEUD-38抑制LPS刺激的MAPKs通路且显示出浓度依赖的抑制效果,包括胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),c-Jun N-末端激酶(JNK)和p38。结论:这些结果表明,JEUD-38是通过抑制NF-?B和MAPK的活性,而抑制i NOS的表达,进而抑制NO产生。提示JEUD-38在预防和治疗炎症方面有潜在的应用价值,有望成为治疗炎症疾病的候选药物。(本文来源于《天津医科大学》期刊2015-05-01）
陈斯佳[5]（2015）在《倍半萜烯内酯类化合物衍生物对db/db小鼠胰岛细胞的保护作用》一文中研究指出研究背景与目的众所周知,随着人们生活水平不断提高和人口老龄化进程的加速,我们所面临的非传染性疾病的威胁日益增多,糖尿病(Diabetes Mellitus, DM)患病率呈快速上升的趋势,已成为危害全球人类健康最重要的疾病之一。同时,糖尿病的并发症可高达100多种,如糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变、糖尿病足等,是目前已知并发症最多的疾病。我国2型糖尿病患者占所有糖尿病患者的90%以上,因此增加对2型糖尿病防治的重视是当务之急。2型糖尿病的发病机制十分复杂,已知年龄、肥胖、氧化应激、胰岛p细胞功能受损、组织脂质蓄积、高血糖症、组织炎症、内质网应激等机制都与其发病有关,亦有研究发现2型糖尿病也属于慢性炎症疾病。目前认为长期胰岛素抵抗和逐渐加重的胰岛细胞功能受损为是2型糖尿病主要特征,糖尿病病程前期胰岛素抵抗的存在可出现胰岛细胞代偿性增生和(或)胰岛素代偿性分泌增加,当胰岛p细胞功能受损加重、胰岛素分泌减少,不能完全代偿机体对胰岛素的正常需求时最终可引起糖尿病的发生。胰岛p细胞功能受损、细胞死亡增加是其病程发展必不可少的因素之一,而p细胞凋亡增多可能是引起胰岛细胞分泌胰岛素的功能受损最主要的原因。糖尿病相关的糖毒性、游离脂肪酸(Free Fatty Acids, FFAs)增加和胰岛素淀粉样沉淀等刺激,均可促使胰岛β细胞功能受损、出现凋亡。因而如何保护胰岛组织、防止胰岛p细胞功能受损、减少p细胞凋亡是我们需要研究和探讨的延缓糖尿病病程进展的主要方向。核转录因子-κB (nuclear factor-kappa B, NF-κB)是一种十分重要的转录因子,它广泛存在于哺乳动物的各种组织和细胞中。NF-κB在氧化应激、炎症反应、免疫反应等多种信号通路中均有着重要的作用；NF-κB与癌症也有相关关系,能在基因水平参与调控细胞的生存、生长、分化、凋亡、新陈代谢和血管生成等过程。研究发现NF-κB在糖尿病动物模型及糖尿病患者的胰岛细胞中均有表达上调的现象,糖尿病相关高血糖症、血脂代谢紊乱、活性氧的生成,以及糖基化终末产物与其特异性受体的结合等途径均可刺激体内NF-κB的激活,活化的NF-κB进而介导下游炎症因子、趋化因子等形成和大量释放,如白白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α),以及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)等,这些因子的释放可引发胰岛炎症反应,损伤胰岛p细胞,使其功能紊乱和出现凋亡,最终影响胰岛素的正常分泌；同时,NF-κB刺激表达的下游炎性介质可进一步刺激其活化,放大炎症反应效应,加重对p细胞的损伤。NF-κB也可能参与调控凋亡相关因子Bcl-2和Bax的表达,影响p细胞的凋亡过程。有研究显示通过抑制胰腺组织中NF-κB的活性,可影响机体炎性介质和氧化应激的水平,这在改善胰岛β细胞功能受损,减少细胞凋亡,延缓糖尿病进展等方面有着关键性的作用。小白菊内酯(parthenolide,PTL)是从小白菊花蕾中提取纯化的一种倍半萜烯内酯类(Sesquiterpene lactones, SLs)天然化合物,其被证实为是SLs中药理活性最好的成份。大量研究证实该类化合物可用于治疗皮肤感染、风湿热、偏头痛、关节痛、周期性发热及哮喘等疾病；然而,近年来发现SLs还有多种其它的生物学效应,如抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗氧化应激等。同时,PTL也是NF-κB的抑制剂,它可通过抑制IKK复合体的激活来减少IKK介导IκB的磷酸化,最终抑制NF-κB的活化,下调其调控的下游因子的表达,影响多种与之相关的生物学反应过程。本次研究我们以PTL为原料自主合成的一种倍半萜烯内酯类化合物衍生物(代号为ACT001)来作为干预药物。此前已证实ACT001可抑制高糖和超前氧化(作用)蛋白产物诱导的系膜细胞和足细胞中NF-κB的活化,同时,ACT001较PTL在制备程序、结构稳定性、生物利用度、毒副作用以及对NF-κB活性抑制的强度等方面均有显着的优势,显示出了广阔的开发与临床应用前景。本研究以自发性2型糖尿病模型-db/db小鼠为实验研究对象,通过检测相关指标来了解自主合成的倍半萜烯内酯类化合物衍生物对小鼠血糖、血胰岛素、血脂、炎症因子及胰岛细胞中NF-κB、iNOS、Bcl-2、Bax等表达的影响,观察胰岛的形态改变,探讨这种新的衍生物对2型糖尿病小鼠胰岛p细胞的保护作用及其可能的机制。研究内容与方法SPF级15周龄db/m小鼠12只、db/db小鼠24只,雌雄各半,给所有小鼠予基础饲料适应性饲养1周后,db/m小鼠设为正常对照组(n=12),db/db小鼠随机分为2组：糖尿病模型组(n=12)、倍半萜烯内酯类化合物衍生物干预组(ACT001干预组,n=12)。ACT001干预组db/db小鼠每日固定时间给予ACT001混悬液25mg/kg灌胃1次,正常对照组及糖尿病模型组小鼠分别给予相应剂量的生理盐水灌胃,各组小鼠自由进食饮水,各组小鼠监测体重和血糖。小鼠禁食12小时后,从其尾静脉取血检测血糖。灌胃给药12周后实验结束,处死小鼠。将小鼠予戊巴比妥钠麻醉后,留其取血标本用于检测血清胰岛素、甘油叁酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterole, TC);留取小鼠胰腺组织标本用于检测组织NF-κB、iNOS、Bcl-2、Bax的表达。1.血清学指标的测定小鼠空腹血糖用罗氏ACCU-CHEK血糖仪测定；血清胰岛素用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)试剂盒测定,小鼠血TG、TC等指标均用全自动生化分析仪测定。2.血脂的测定和IL-1β、TNF-α含量的测定小鼠血清IL-1β、TNF-α用ELISA试剂盒测定。3小鼠胰腺组织形态学检查取小鼠胰腺尾部组织用4%多聚甲醛固定24小时后,经梯度酒精脱水,予石蜡包埋,将石蜡切片,切片厚度约为4μm,予HE染色观察胰岛的一般形态学变化,免疫组化染色检测小鼠胰岛细胞团NF-κB、iNOS、Bcl-2、Bax表达的变化。4.免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠胰腺组织中NF-κB、iNOS蛋白表达的变化。5.统计方法本实验所有计量资料数据采用均数±标准差(X±S)表示,所有统计数据由统计软件SPSS19.0进行分析完成；各组间均数采用两样本t检验进行比较,多组间样本均数的比较采用单因素方差分析(One-Way analysis of variance, ANOVA);若方差不齐时,组间均数比较用Welch检验,两两比较用Dunnett's T3方法,以P<0.05为差异有统计学意义。结果1.各组小鼠一般情况的变化正常对照组小鼠一般情况良好,精神状态佳,活动自如,毛发亮泽,饮食及大小便无异常,未见死亡；糖尿病模型组、ACT001干预组小鼠一般情况较差,精神状态欠佳,行动缓慢,毛发杂乱无光,有脱发、皮疹,出现了多饮多尿多食等糖尿病相关症状；与糖尿病模型组比较,ACT001干预组小鼠上述情况均有所改善。2.各组小鼠体重的变化干预12周实验结束后,与正常对照组小鼠相比较,糖尿病模型组、ACT001干预组小鼠体重明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；糖尿病模型组与ACT001干预组相比体重未见明显差异。3.各组小鼠血清学指标的变化干预12周实验结束后,与正常对照组小鼠相比较,糖尿病模型组、ACT001干预组小鼠空腹血糖、胰岛素浓度、TG, TC均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；与糖尿病模型组小鼠比较,ACT001干预组小鼠上述指标有降低(P<0.05)。4.各组小鼠血清IL-1β、TNF-α表达水平的变化干预12周实验结束后,与正常对照组小鼠比较,糖尿病模型组、ACT001干预组小鼠血清IL-1β、TNF-α表达水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)；与糖尿病模型组小鼠比较,ACT001干预组小鼠血IL-1β、TNF-α表达水平均有降低(P<0.05)。5.各组小鼠胰腺组织形态学变化：HE染色显示：正常对照组小鼠胰腺组织镜下胰岛数量多,呈团索状,为圆形或类圆形,胞浆丰富,形态完整,细胞核居中、胞界清晰；糖尿病模型组小鼠胰岛数量较少,分布零散,形态不规则,边缘不整齐,界限不清晰,细胞体积增大,细胞核呈偏心分布,可见空泡状变性；与糖尿病模型组小鼠相比较,ACT001干预组小鼠的胰岛形态改变有较明显的改善。免疫组化染色显示：与正常对照组小鼠比较,糖尿病模型组、ACT001干预组小鼠胰岛细胞中NF-κB、iNOS及促凋亡因子Bax表达明显增强,抗凋亡因子Bc1-2表达减弱,差异有统计学意义(P<0.05)；与糖尿病模型组小鼠比较,ACT001干预组小鼠胰岛细胞中NF-κB、iNOS、Bax表达有减弱,Bcl-2表达增强(P<0.05)。6.蛋白免疫印迹法检测各组小鼠NF-κB、iNOS蛋白表达的变化与正常对照组小鼠比较,糖尿病模型组、ACT001干预组小鼠胰岛细胞中NF-κB、iNOS蛋白表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)；与糖尿病模型组小鼠比较,ACT001干预组小鼠胰岛细胞中NF-κB、iNOS蛋白表达有明显减弱(P<0.05)。结论1.db/db小鼠与db/m小鼠相比,体重、进食量、饮水量增加,空腹血糖、血脂升高,胰岛素浓度增加。2.db/db小鼠与db/m小鼠相比,血清中IL-1β、TNF-α产生和释放增多。3.db/db小鼠与db/m小鼠相比,胰岛细胞中NF-κB、iNOS、Bax表达增强,以及Bcl-2表达减弱,这可促使胰岛β细胞功能受损,凋亡增加。4.倍半萜烯内酯类化合物衍生物可降低db/db小鼠空腹血糖、血脂、胰岛素浓度及减少血清中IL-1β、TNF-α的表达和释放。5.倍半萜烯内酯类化合物衍生物可抑制db/db小鼠胰岛细胞中NF-κB的激活,下调iNOS的表达,改善胰岛p细胞功能受损,减少p细胞凋亡的发生。6.倍半萜烯内酯类化合物衍生物可使db/db小鼠胰岛细胞中促凋亡因子Bax的表达减弱、抗凋亡因子Bcl-2的表达增强,改善胰岛p细胞中的凋亡现象。7.本实验采用自主合成的倍半萜烯内酯类化合物衍生物作为NF-κB有效抑制剂,具有改善细胞凋亡、保护胰岛β细胞的作用。(本文来源于《南方医科大学》期刊2015-03-18）
赵艳[6]（2014）在《倍半萜烯内酯类化合物对晚期氧化蛋白产物诱导足细胞炎症因子MCP-1表达的影响及其机制的研究》一文中研究指出研究背景与目的糖尿病肾病(DN)是糖尿病最常见的一种微血管并发症。DN的发病机制十分复杂,至今尚未完全明确。按传统的观点,DN并非是一种炎症性疾病,然而近年的研究表明炎症反应和DN关系密切,炎症反应在DN发生发展过程中起到了重要的促进作用。研究表明,单核细胞趋化蛋白(MCP)-1参与诱导巨噬细胞进入糖尿病肾脏,在DN动物模型中的表达进行性上升,并且其在肾小球和肾小管中的积累量分别与肾小球和肾小管的损伤成正相关。在DN中,MCP-1不仅发挥趋化作用,促进单核细胞和巨噬细胞游走和活化,同时也能通过上调黏附因子表达和促进其他炎症因子的表达直接引起肾脏的炎症反应和肾纤维化。晚期氧化蛋白产物(AOPPs)是一个新的致DN进展的炎症介质。DN患者体内AOPPs水平明显高于未出现肾脏损伤的糖尿病患者。在DN动物模型中,AOPPs的慢性积累显着增加了残余肾巨噬细胞的侵润和MCP-1的过度表达,促进了炎症反应。AOPPs可通过ROS依赖的p38MAPK通路的激活降低足细胞中的nephrin和podocin的表达,同时AOPPs也可诱导足细胞的凋亡,导致足细胞数目减少、密度降低和基底膜裸露,进而诱发了蛋白尿,加重肾病的进展。核因子κB (NF-κB)在调节炎症因子的过程中发挥着重要作用,AOPPs能激活NF-κB相关通路。我们之前的研究发现,DN大鼠中NF-κB表达显着增加；在体外培养的大鼠肾小球系膜细胞中,高糖可诱导系膜细胞增殖,激活NF-κB相关信号通路,诱导炎症因子MCP-1和转化生长因子-p1表达增加；AOPPs可以快速诱导系膜细胞内活性氧的产生,激活MAPKs/NF-κB信号转导通路,最终诱导系膜细胞中MCP-1mRNA和蛋白过度表达。倍半萜烯内酯(SLs)是一大类具有多样结构的天然生物活性化合物,最初是从菊科植物中分离所得,小白菊内酯(PTL)是SLs中最主要的生物活性成分。已有研究发现PTL和其他SLs能通过抑制IKK和IκBα磷酸化和/或影响NF-κB和DNA的结合能力发挥其抗炎作用。我们最新的研究结果表明,在体外培养的系膜细胞中,SLs,包括PTL, MCL和及小白菊内酯的衍生物-化合物2,以及其他相关的小白菊内酯衍生物,能有效地抑制高糖及AOPPs诱导的IκBα的降解和NF-κB的活化,进而抑制系膜细胞中炎症因子MCP-1mRNA和蛋白的表达。我们推钡AOPPs能通过激活NF-κB相关的信号通路来诱导足细胞中炎症因子MCP-1的过度表达；倍半萜烯内酯类化合物可通过抑制NF-κB相关的信号转导途径的激活来发挥其抗炎作用,具有保护DN肾脏的作用。本实验以体外培养的足细胞为对象,旨在验证上述推测,为将来应用SLs治疗DN及相关炎症性肾病的深化研究提供一定的理论依据。研究内容与方法1.体外制备AOPPs将20mg/ml MSA与40mmo/1HC10等体积混合,其摩尔比为1：140,室温放置30分钟后,于无内毒素PBS中透析24小时,以除去游离的HCLO用0.22μmm的微孔滤膜过滤除菌后4℃保存。20mg/ml MSA与PBS等体积混合,作为对照。AOPPs含量通过测定酸性条件下340nm的吸光度,以氯胺T为标准取得。内毒素含量用鲎试验法检测,该方法制备的AOPPs内毒素含量均低于0.25EU/ml。2.足细胞的培养按Peter Mundel的方法。足细胞于33℃含5%C02培养箱,,在10%FBS、50U/ml IFN-y的RPM11640培养液中增殖。为了得到分化表型,足细胞于37℃含5%C02培养箱,在10%FBS的RPM11640培养液中培养10-14天。待细胞分化后,使用无血清1640培养液培养24小时。根据不同的实验目的分组,加用各种试剂和药物刺激。本研究使用10-20代足细胞。一、AOPPs对足细胞炎症因子MCP-1表达的影响1. qPCR法检测足细胞MCP-1mRNA的表达。细胞同步于GO期后,0、50、100.200(μg/ml)的AOPPs和200(μg/ml)未经修饰的MSA刺激细胞24h；或者200μg/ml的AOPPs刺激细胞0、3、6、12、24、48h。提取细胞中总RNA。qPCR法检测足细胞MCP-1mRNA的表达。2. ELISA法检测足细胞培养上清中MCP-1的表达。细胞同步于GO期后,0、50、100、200(μg/ml)的AOPPs和200(μg/ml)未经修饰的MSA刺激细胞24h；或者200的AOPPs刺激细胞0、3、6、12、24、48h。取细胞上清。ELISA法检测细胞上清中MCP-1的浓度。3. Western blot方法检测足细胞的IKKβ, IκBα和NF-κB蛋白表达水平。足细胞分别与200μg/ml AOPPs或MSA共同孵育30min。提取细胞总蛋白。Western blot方法检测足细胞的IKKβ、IκBα和NF-κB蛋白表达水平。4.抑制试验。NF-κB特异性抑制剂PTL预孵育1h后,200μg/ml AOPPs刺激足细胞24h。提取细胞上清,ELISA法检测足细胞MCP-1的表达。二、SLsAOPPs诱导的足细胞炎症因子MCP-1表达的影响1. qPCR法检测足细胞MCP-1mRNA的表达用不同浓度的SLs(MCL,化合物1,化合物2)预孵育1h后,200μg/ml AOPPs刺激足细胞24h, PTL(5μM)作为阳性对照。或者AOPPs刺激24h,而SLs,即MCL(5μM),化合物1(10μM),化合物2(2.5μM))作用预先设定的时间。提取细胞总RNA, qPC法检测足细胞MCP-1mRNA的表达。2. ELISA法检测足细胞MCP-1的表达用不同浓度的SLs(MCL,化合物1,化合物2)预孵育1h后,200μg/ml AOPPs刺激足细胞24h, PTL(5μM)作为阳性对照。或者AOPPs刺激24h,而SLs,即MCL(5μM),化合物1(10μM),化合物2(2.5lμM))作用预先设定的时间。提取细胞上清,ELISA法检测足细胞MCP-1的表达。3. Western blot法检测足细胞IKKβ、IkBα、NF-κB蛋白的表达。不同浓度的SLs (MCL,化合物1,化合物2)预孵育1h后,200μg/ml AOPPs刺激足细胞30min, PTL(10μM)作为阳性对照。或者AOPPs刺激30min,而SLs,即MCL (10μM),化合物1(20μM),化合物2(5μM))作用预先设定的时间。提取细胞总蛋白,Western blot法检测足细胞IKKβ、IkBα、NF-κB蛋白的表达。统计方法采用SPSS13.0统计软件包进行统计分析,所有数据结果均以均数加减标准差表示。多个样本均数的比较采用One-way ANOVA,两两比较采用LSD和SNK,p<0.05为差异有统计学意义。所有数据均代表3次重复实验的结果。结果AOPPs的鉴定AOPPs-MSA中AOPPs含量为72.40±9.8nmol/mg蛋白质,未修饰的MSA中AOPPs含量为0.2±0.06nmol/mg蛋白质。AOPPs和未经修饰的MSA经鲎试验法检测样本内毒素含量结果为内毒素含量低于0.025EU/ml。一、AOPPs对足细胞炎症因子MCP-1表达的影响(1)不同浓度干预的结果：足细胞分别与0、50、100、200、400μg/mlAOPPs或MSA(200μg/ml)共同孵育24h,随着AOPPs浓度的增高,细胞上清中MCP-1mRNA和MCP-1蛋白的表达水平亦逐渐增加,AOPPs(200μg/ml)时达最高(p<0.001)；未经修饰的MSA对足细胞MCP-1mRNA和MCP-1蛋白的表达水平无明显影响(P＞0.05)。(2)干预不同时间的结果：AOPPs(200μg/ml)或MSA(200μg/ml)与足细胞共同孵育0、3、6、12、24、48h、MCP-1mRNA和MCP-1蛋白的表达水平随刺激时间的延长而升高,24h达最高(p<0.001)。未经修饰的MSA对足细胞MCP-1mRNA和MCP-1蛋白的表达水平无明显影响(P＞0.05)。(3)足细胞与200μg/ml AOPPs或MSA共同孵育30min,与正常对照组相比,AOPPs刺激组足细胞IκBα蛋白表达逐渐降低(p<0.01); p-IKKα/β和P-NF-κBp65蛋白表达显着增加(p<0.05),而总IKKβ和NF-κB p65蛋白表达未见明显差异。未经修饰MSA刺激组对足细胞IκBα IKKp和NF-κB蛋白的表达水平无显着差异(p>0.05)(4)抑制试验：用NF-κB特异性抑制剂PTL(10μM)预孵育足细胞30min,再用AOPPs刺激24h后测定足细胞MCP-1的表达。与AOPPs干预组相比,用PTL‘预孵育组细胞上清中的MCP-1分泌减少,差异具有统计学意义(P<0.001)。二、SLs对AOPPs诱导的足细胞炎症因子MCP-1表达的影响(1)不同浓度的SLs (MCL,化合物1,化合物2)预孵育1h后,200μg/ml AOPPs刺激足细胞24h, PTL(5μM)作为阳性对照。或者AOPPs刺激24h,而SLs,即MCL (5μM),化合物1(10μM),化合物2(2.5μM))作用预先设定的时间。结果显示MCL,化合物1,化合物2呈剂量和时间依赖型抑制AOPPs诱导的足细胞MCP-1mRNA和蛋白的表达,其中5μMMCL,10μM化合物1,2.5μM化合物2抑制作用最强,和阳性对照组5μM PTL作用相当。(2)不同浓度的SLs (MCL,化合物1,化合物2)预孵育1h后,200μg/ml AOPPs刺激足细胞30min,PTL(10μM)作为阳性对照。或者AOPPs刺激30min,而SLs,即MCL (10μM),化合物1(20μM),化合物2(5μM))作用预先设定的时间。结果显示MCL,化合物1,化合物2呈剂量和时间依赖型抑制AOPPs诱导的足细胞IKKβ蛋白的磷酸化、IκBα蛋白的降解和NF-κB蛋白的活化。其中10μM MCL,20μM化合物1,5μM化合物2抑制作用最强,和阳性对照组10μMPTL作用相当。结论一、AOPPs可通过IKK/NF-κB通路诱导体外培养的足细胞过度表达炎症因子MCP-1。二、SLs(MCL,化合物1和化合物2)能通过抑制IKK/NF-κB通路的激活来降低AOPPs诱导的足细胞MCP-1的过度表达而发挥抗炎作用,说明SLs可能具有防治DN及相关免疫炎症性肾病的作用,但其作用机制尚有待进一步研究。同时,与PTL相比,自主合成的SLs在制备工艺、稳定性、生物利用度、毒副作用等方面均具有显着的优势,具有更为广阔的开发与临床应用前景。(本文来源于《南方医科大学》期刊2014-03-01）
王建成[7]（2013）在《倍半萜烯内酯类化合物对晚期氧化蛋白产物诱导的大鼠肾小球系膜细胞炎症因子调控的实验研究》一文中研究指出研究背景与目的糖尿病肾病(diabetic ncphrophthy, DN)是糖尿病(diabetes mellitus, DM)危害性最大的慢性并发症之一。DN病理改变的特征是细胞外基质(extracellular matrix, ECM)成分积聚所致的肾小球肥大、基底膜增厚、系膜基质增宽,最后发展为肾小球硬化。在外界刺激下,系膜细胞会迅速发生表形变化,并可分泌多种生长因子,如血小板衍生因子、胰岛素样生长因子、成纤维细胞生长因子,单核细胞趋化因子(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1).这些炎症因子能够招募炎症细胞,增加细胞外基质积聚,其中MCP-1起到了关键的作用,被认为是肾疾病发病机理的一种主要趋化因子。DN的发病机制目前尚不完全清楚,在导致DN的众多原因中,现普遍认为氧化应激是造成糖尿病肾病各种损害的主要原因。晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products, AoPPs)是Witko. Sarsat在慢性肾功能衰竭(chronic renal failure, CRF)病人血浆中发现的蛋白质氧化交联产物。它是由中性粒细胞髓过氧化物酶催化活性氧生成的次氯酸作用于蛋白质而形成的。AoPPs主要在CRF患者中出现,不过有学者证实了在糖尿病患者血液中也有AOPPs的升高,同时发现肥胖患者也存在AOPPs升高,这表明AOPPs可能参与了糖尿病肾病的形成。最近有研究表明,AOPPs能够通过活化蛋白激酶C后通过NADPH氧化酶诱导系膜细胞产生活性氧(reactive oxygen species, ROS),促使系膜细胞产生氧化应激反应。丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases, MAPKs)、核转录因子(nuclear factor, NF-κB)等是氧化应激敏感的信号,主要参与细胞增殖、分化、转化及凋亡的调节,与炎症性疾病的发生机制密切相关,可促使肾内炎症反应。小白菊内酯(parthenolide, PTL)是从feverfew (Tanacetum parthenium)纯化出的一种倍半萜烯内酯类化合物,是被证实为药理活性最好的成分。它曾被用于治疗发热、偏头痛、哮喘及关节痛等。而它的功效远不止这些,很多实验表明小白菊内酯是一种特异且强有效NF-κB抑制剂,通过直接阻止NF-κB和(或)作用于IKK复合体,表现出强大的抗氧化、炎症、肿瘤作用。在这个实验中,我们以PTL等化合物为原料合成了一系列倍半萜烯内酯类化合物,研究了其构-效关系。本研究以体外的系膜细胞为对象,观察人工合成的晚期蛋白氧化产物是否能够激活MAPKs/NF-κB信号通路和上调炎症因子MCP-1的表达,以及被激活的NF-κB和MCP-1能否被倍半萜烯内酯类化合物抑制,更重要的是通过与小白菊内酯比较观察我们研制的倍半萜烯内酯类化合物的药效。研究内容与方法1、AOPPs的制备将20mg/ml大鼠白蛋白与40mmo/1次氯酸等体积混合,室温放置30分钟,其摩尔比为1：140(RSA-次氯酸)。制备的AOPP在无内毒素PBS中透析24小时,除去游离的次氯酸。用0.22μm的微孔滤膜过滤除菌后4℃保存。20mg/mlRSA与PBS等体积混合,作为对照。AOPPs含量通过测定酸性条件下340nm的吸光度,以氯胺T为标准取得。通过鲎试验法检测,该方法制备的AOPPs内毒素含量均低于0.25EU/m1。2、大鼠系膜细胞的培养大鼠肾小球系膜细胞(HYBZ-1)购自武汉细胞库。细胞复苏后在37℃、5%C02条件下用含10%胎牛血清的低糖DMEM培养基中培养,待细胞生长至70-80%融合时用于实验。3、AOPPs对细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的影响MCs生长至融合,分别与浓度为0、50、100、200(μg/ml)的AOPPs和200(μg/ml)未经修饰的RSA共同孵育,于24小时后收集细胞上清。ELISA法检测MCP-1在细胞上清中的浓度。4、AOPPs对单核细胞趋化蛋白-1mRNA(MCP-1mRNA)表达的影响MCs分别与浓度为0、50、100、200(μg/ml)的AOPPs或200(μg/ml)未经修饰的RSA共同孵育24小时后,收集细胞,加入Trizol试剂提取细胞总RNA。按试剂盒说明进行操作,RT-PCR测定MCP-1mRNA表达。5、AOPPs对细胞内p47phox的膜迁移的影响MCs分别与浓度为0、50、100、200(μg/ml)的AOPPs或200(μg/ml)未经修饰的RSA共同孵育1小时后,收集细胞,提取细胞浆和细胞膜蛋白。按试剂盒说明进行操作,Western blot检测每组细胞浆内p47phox蛋白的表达和膜内p47phox蛋白的表达。6、AOPPs对细胞内MAPKs信号通路的影响MCs分别与浓度为0、50、100、200(μg/ml)的AOPPs或200(μg/ml)未经修饰的RSA共同孵育1小时后,收集细胞,提取细胞总蛋白。按试剂盒说明进行操作,Western blot检测每组细胞内p-P38、P38、p-JNK、JNK、p-ERK1/2、 ERK1/2蛋白的表达。7、AOPPs对细胞内NF-κB信号通路的影响MCs分别与浓度为0、50、100、200(μg/ml)的AOPPs或200(μg/ml)未经修饰的RSA共同孵育1小时后,收集细胞,提取细胞总蛋白和细胞核蛋白。按试剂盒说明进行操作,Western blot检测每组细胞内NF-κB/p65、p-IκBa、 IκBa、p-IKK a、IKK a蛋白的表达和核内p-NF-κB/p65蛋白的表达。8、倍半萜烯内酯类化合物对AOPPs诱导的细胞MCP-1的影响浓度为10(μmol/L)的倍半萜烯内酯类化合物与MCs孵育1小时后,浓度为200(μg/ml)的AOPPs刺激24小时后收集细胞上清。ELISA法检测MCP-1在细胞上清中的浓度。9、倍半萜烯内酯类化合物对AOPPs诱导的细胞MCP-1mRNA的影响浓度为10(μmol/L)的倍半萜烯内酯类化合物与MCs孵育1小时后,浓度为200(μg/ml)的AOPPs刺激24小时后,收集细胞,加入Trizol试剂提取细胞总RNA。按试剂盒说明进行操作,RT-PCR测定MCP-1mRNA的表达。10、倍半萜烯内酯类化合物对AOPPs诱导的细胞内NF-κB信号通路激活的影响浓度分别为5、10(μmol/L)的倍半萜烯内酯类化合物与MCs孵育1小时后,浓度为200(μg/ml)的AOPPs刺激1小时后,收集细胞,提取细胞总蛋白。按试剂盒说明进行操作,Western blot检测每组细胞内IκBα蛋白的表达。统计方法所有数据均代表3次重复实验的结果,以均数加减标准差表示。所有统计由统计软件SPSS13.0完成。多个样本均数的比较采用One Way ANOVA,两两比较采用LSD和SNK,P<0.05为差异有统计学意义。结果1、AOPPs的鉴定制备的次氯酸修饰的大鼠血清白蛋白和未经修饰的大鼠血清白蛋白的蛋白浓度分别为8.52mg/ml和10.3mg/ml,AOPPs含量分别为538.14μmol/1and1.56μmol/l,经蛋白浓度矫正后分别为63.16nmol/mg蛋白和0.15nmol/mg蛋白。所有制各的AOPP或未经修饰的RSA经鲎试验法检测内毒素含量均低于0.25EU/ml。2、AOPPs对系膜细胞MCP-1的影响1)AOPPs对大鼠系膜细胞MCP-1蛋白分泌的影响浓度为100、200(μg/ml)的AOPPs与RMCs共同孵育24h时后,细胞上清中分泌的MCP-1含量上调,并且随着AOPPs剂量的增加,上述蛋白表达亦逐渐增加(p<0.05),未经修饰的RSA对MCP-1的分泌无明显影响(p>0.05)。DAOPPs对细胞细胞MCP-1mRNA表达的影响浓度为50、100、200(u g/ml)的AOPPs与RMCs共同孵育24h时后,细胞内的MCP-1mRNA表达上调,并且AOPPs以剂量依赖的方式上调(p<0.05)。未被修饰的RSA对RMCs表达MCP-1mRNA无明显影响(p>0.05)。3、AOPPs诱导细胞内p47phox的膜迁移浓度为50、100、200(μg/ml)的AOPPs与RMCs共同孵育1h时后,细胞浆内的p47phox随着AOPP的浓度逐渐上升而下降(p<0.05),细胞膜内的p47phox随着AOPPs的浓度逐渐上升而升高(p<0.05)。未被修饰的RSA对RMCs内p47phox的膜迁移无明显影响(p>0.05)。4、AOPPs对细胞内MAPKs信号通路的激活浓度为50、100、200(ug/ml)的AOPPs与RMCs共同孵育1h时后,细胞内的磷酸化P38、JNK和ERK1/2的表达量随着AOPPs的浓度逐渐上升而升高(p<0.05),而细胞内总的P38、JNK和ERK1/2的蛋白表达量不变。未被修饰的RSA对RMCs内P38、JNK和ERK1/2的磷酸化表达量无明显变化。5、AOPPs对细胞内NF-κB信号通路的激活浓度为50、100、200(u g/ml)的AOPPs与RMCs共同孵育1h时后,细胞内的磷酸化IκBα、磷酸化IKK a蛋白的表达和核内p-NF-κB/p65蛋白表达量随着AOPPs的浓度逐渐上升而升高(p<0.05),而细胞内总的IKK α、NF-κ B/p65的蛋白表达量不变,总的IκBα随着AOPPs的浓度逐渐上升而被降解(p<0.05),未被修饰的RSA对RMCs内IκBα、IKKα、NF-κB/p65的磷酸化表达量无明显变化。6、倍半萜烯内酯类化合物抑制AOPPs诱导的MCP-1浓度为10(μmol/L)的倍半萜烯内酯类化合物与MCs孵育1小时后,AOPPs200(μg/ml)刺激24小时,Elisa检测细胞上清MCP-1的表达量,细胞上清中分泌的MCP-1含量明显下调(p<0.05)。7、倍半萜烯内酯类化合物抑制AOPPs诱导的细胞MCP-1mRNA浓度为10(μmol/L)的倍半萜烯内酯类化合物与MCs孵育1小时后,浓度为200(μg/ml)的AOPPs刺激24小时,RT-PCR检测细胞MCP-lmRNA的表达量,细胞内的MCP-1mRNA含量明显下调(p<0.05)。8、倍半萜烯内酯类化合物对AOPPs诱导的细胞内NF-κB信号通路激活的影响浓度为5和10(μmol/L)的倍半萜烯内酯类化合物与MCs孵育1小时后,浓度为200(μg/ml)的AOPPs刺激1小时,Western Blot检测细胞内IκBα蛋白的表达量,细胞内总的IκBα的降解被抑制(p<0.05)。结论AOPPs能够快速诱导大鼠系膜细胞内活性氧的产生,进一步激活了MAPKs/NF-κB信号传导通路,最终导致了MCP-1mRNA和蛋白表达的变化。倍半萜烯内酯类化合物可以全部或部分逆转AOPPs诱导的系膜细胞内IκBα蛋白的泛素化降解和NF-κB的活化,进一步抑制细胞因子MCP-1在系膜细胞内的表达。提示AOPPs对系膜细胞的效应可能在DN发生发展过程中发挥重要作用,而倍半萜烯内酯类化合物对AOPPs诱导炎症的抑制作用可能与抑制NF-κB的活性有关。与PTL相比,自主合成的倍半萜烯内酯类化合物在制备工艺、稳定性、生物利用度、毒副作用等方面均具有显着的优势,显示出了广阔的开发与临床应用前景。(本文来源于《南方医科大学》期刊2013-05-01）
花亚萍,覃江江,张飞,成向荣,金慧子[8]（2012）在《水朝阳旋覆花的倍半萜内酯类化合物(英文)》一文中研究指出目的:研究水朝阳旋覆花Inula helianthus-aquatica地上部分中的倍半萜内酯类化学成分。方法:应用硅胶柱色谱,Sephadex LH-20柱色谱,以及高效液相制备色谱等方法分离和纯化化合物,再通过运用光谱学方法,结合化合物的理化性质来鉴定结构。结果:从水朝阳旋覆花的地上部分分离得到7个倍半萜内酯类和4个其他类的化合物,并且依次鉴定为2-desoxy-4-epi-pulchellin(1),6-acetoxy-4-hydroxy-1,10H-pseudoguaia-11(13)-en-12,8-olide(2),4-acetoxy-6-hydroxy-1,10H-pseud-oguaia-11(13)-en-12,8-olide(3),8-epi-inuviscolide(4),2,3,11,13-tetrahydroaromaticin(5),11,13-dihydro-ergolide(6),4-epip-ulchellin-2-O-acetate(7),7-差向黑麦草内酯(8),黑麦草内酯(9),β-谷甾醇(10),胡萝卜苷(11)。结论:所有化合物均为首次从该植物中分离得到。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2012年11期）
马海娟,马长华,黄建梅[9]（2010）在《大花八角果皮中两个新的倍半萜内酯类化合物》一文中研究指出为了研究大花八角的化学成分,通过硅胶柱色谱等方法进行化合物的分离纯化,利用色谱和多种波谱技术鉴定化合物结构。从甲醇浸提物的二氯甲烷-乙酸乙酯(1∶1)部分和乙酸乙酯部分,分离得到11个化合物,其中2个新化合物,分别命名为6-去氧新大八角素(6-deoxyneomajucin,1)、2-氧代-6-去氧新大八角素(2-oxo-6-deoxyneomajucin,2),9个为已知化合物:6-去氧伪莽草毒素(3)、伪莽草毒素(4)、莽草毒素(5)、伪大八角素(6)、原儿茶酸(7)、莽草酸(8)、莽草酸甲酯(9)、β-谷甾醇(10)和胡萝卜苷(11)。化合物1和2为新的大八角素型倍半萜内酯类化合物,其余化合物均为首次从本植物中分离得到。(本文来源于《药学学报》期刊2010年03期）
宁娜[10]（2008）在《美花风毛菊地上部分中新的愈创木烷型倍半萜内酯和新的氨基酸倍半萜内酯类化合物》一文中研究指出美花风毛菊 Saussurea pulchella Fisch.广泛分布于韩国,人们用它治疗炎症、高血压、肝炎和关节炎,但关于其活性成分的研究目前仅有一个倍半萜内酯及4个酚类物质的研究报道。从该植物地上部分的(本文来源于《国外医药(植物药分册)》期刊2008年06期）
倍半萜内酯类类化合物论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:2型糖尿病中存在胰岛β细胞进行性受损。保护β细胞功能是延缓2型糖尿病进展的重要手段。本研究主要观察倍半萜烯内酯类衍生物ACT001对-db/db小鼠胰岛β细胞的保护作用并探讨其潜在的机制。方法:以自发性2型糖尿病-db/db小鼠为研究对象,随机分为2组:db/db糖尿病模型组
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
倍半萜内酯类类化合物论文参考文献
[1].李红瑜,彭芬芬,陈晓雯,刘文婷,龚望球.倍半萜烯内酯类化合物衍生物ACT001抑制肾脏上皮-间质转化[C].2016年中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会学术年会论文摘要汇编.2016
[2].陈思佳,王建成,陈晓雯,杜晓燕,龙海波.倍半萜烯内酯类化合物衍生物对db/db小鼠胰岛细胞的保护作用及其作用机制研究[C].中国中西医结合学会肾脏疾病专业委员会2015年学术年会资料汇编.2015
[3].朱华野,朴惠顺.倍半萜内酯类化合物抗肿瘤作用机制的研究进展[J].华西药学杂志.2015
[4].王笑晴.旋覆花来源的新倍半萜内酯类化合物JEUD-38抑制RAW264.7细胞产生NO的作用及机理[D].天津医科大学.2015
[5].陈斯佳.倍半萜烯内酯类化合物衍生物对db/db小鼠胰岛细胞的保护作用[D].南方医科大学.2015
[6].赵艳.倍半萜烯内酯类化合物对晚期氧化蛋白产物诱导足细胞炎症因子MCP-1表达的影响及其机制的研究[D].南方医科大学.2014
[7].王建成.倍半萜烯内酯类化合物对晚期氧化蛋白产物诱导的大鼠肾小球系膜细胞炎症因子调控的实验研究[D].南方医科大学.2013
[8].花亚萍,覃江江,张飞,成向荣,金慧子.水朝阳旋覆花的倍半萜内酯类化合物(英文)[J].中国中药杂志.2012
[9].马海娟,马长华,黄建梅.大花八角果皮中两个新的倍半萜内酯类化合物[J].药学学报.2010
[10].宁娜.美花风毛菊地上部分中新的愈创木烷型倍半萜内酯和新的氨基酸倍半萜内酯类化合物[J].国外医药(植物药分册).2008