本文主要研究内容
作者徐敏,许厚强,杨洋,陈伟（2019）在《FGF10基因真核表达载体的构建及其在从江香猪不同组织中的表达》一文中研究指出：成纤维细胞生长因子10基因(fibroblast growth factor 10, FGF10)属于6个FGFs亚家族中的FGF7亚家族,是特异地表达于白色脂肪组织的唯一FGF,在脂肪组织的发育和代谢过程中具有重要的作用。本实验旨在研究从江香猪(Sus scrofa)肌内前体脂肪细胞中FGF10对脂肪代谢的调控功能,实验采用qRT-PCR的方法检测了从江香猪不同组织中的表达情况,并根据克隆得到的FGF10的CDS区,构建了真核过表达载体pEGFP-C1-FGF10;分离培养从江香猪肌内前体脂肪细胞运用胶原酶消化法分离培养从江香猪肌内前体脂肪细胞,并进行了诱导培养,采用油红O染色法进行鉴定;运用qRT-PCR技术检测FGF10基因在不同诱导阶段的从江香猪肌内前体脂肪细胞中的表达;利用脂质体法将重组质粒pEGFP-C1-FGF10瞬时转染从江香猪肌内前体脂肪细胞,并检测过表达FGF10基因后脂肪相关代谢沉积的氧化物酶体增殖物激活受体γ基因(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)、脂联素基因(adiponectin,ADIPOQ)、脂肪酸结合蛋白4基因(fatty acid binding protein 4, FABP4)、脂肪酸合成酶基因(fatty acid synthase, FAS)、脂肪组织甘油三酯水解酶(adipose triglyceride lipase, ATGL)、激素敏感脂酶基因(hormone sensitive lipase, HSL)、脂蛋白酯酶基因(lipoprotein lipase, LPL)以及乙酰辅酶A羧化酶基因(acetyl-CoA carboxylase, ACC)的表达水平。FGF10基因表达量最低是在背最长肌中,表达量最高是在胃中(P<0.05),其次是在肾脏和脂肪中;在诱导的早期阶段,FGF10基因表达量逐渐增加,在诱导分化48 h的表达量最高;经双酶切和测序鉴定,成功构建了pEGFP-C1-FGF10表达载体,且在从江香猪肌内前体脂肪细胞中成功表达;与空白对照相比,ACC、FABP4、FAS、LPL、PPARγ的表达量均增加,ADIPOQ、ATGL和HSL的表达量均减少。FGF10对脂肪的沉积具有一定的调控作用,这种作用可能是通过对相关脂肪代谢基因的调控实现的。本研究为揭示FGF10对脂肪的调控作用提供了基础数据。
Abstract
cheng qian wei xi bao sheng chang yin zi 10ji yin (fibroblast growth factor 10, FGF10)shu yu 6ge FGFsya jia zu zhong de FGF7ya jia zu ,shi te yi de biao da yu bai se zhi fang zu zhi de wei yi FGF,zai zhi fang zu zhi de fa yo he dai xie guo cheng zhong ju you chong yao de zuo yong 。ben shi yan zhi zai yan jiu cong jiang xiang zhu (Sus scrofa)ji nei qian ti zhi fang xi bao zhong FGF10dui zhi fang dai xie de diao kong gong neng ,shi yan cai yong qRT-PCRde fang fa jian ce le cong jiang xiang zhu bu tong zu zhi zhong de biao da qing kuang ,bing gen ju ke long de dao de FGF10de CDSou ,gou jian le zhen he guo biao da zai ti pEGFP-C1-FGF10;fen li pei yang cong jiang xiang zhu ji nei qian ti zhi fang xi bao yun yong jiao yuan mei xiao hua fa fen li pei yang cong jiang xiang zhu ji nei qian ti zhi fang xi bao ,bing jin hang le you dao pei yang ,cai yong you gong Oran se fa jin hang jian ding ;yun yong qRT-PCRji shu jian ce FGF10ji yin zai bu tong you dao jie duan de cong jiang xiang zhu ji nei qian ti zhi fang xi bao zhong de biao da ;li yong zhi zhi ti fa jiang chong zu zhi li pEGFP-C1-FGF10shun shi zhuai ran cong jiang xiang zhu ji nei qian ti zhi fang xi bao ,bing jian ce guo biao da FGF10ji yin hou zhi fang xiang guan dai xie chen ji de yang hua wu mei ti zeng shi wu ji huo shou ti γji yin (peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)、zhi lian su ji yin (adiponectin,ADIPOQ)、zhi fang suan jie ge dan bai 4ji yin (fatty acid binding protein 4, FABP4)、zhi fang suan ge cheng mei ji yin (fatty acid synthase, FAS)、zhi fang zu zhi gan you san zhi shui jie mei (adipose triglyceride lipase, ATGL)、ji su min gan zhi mei ji yin (hormone sensitive lipase, HSL)、zhi dan bai zhi mei ji yin (lipoprotein lipase, LPL)yi ji yi xian fu mei Asuo hua mei ji yin (acetyl-CoA carboxylase, ACC)de biao da shui ping 。FGF10ji yin biao da liang zui di shi zai bei zui chang ji zhong ,biao da liang zui gao shi zai wei zhong (P<0.05),ji ci shi zai shen zang he zhi fang zhong ;zai you dao de zao ji jie duan ,FGF10ji yin biao da liang zhu jian zeng jia ,zai you dao fen hua 48 hde biao da liang zui gao ;jing shuang mei qie he ce xu jian ding ,cheng gong gou jian le pEGFP-C1-FGF10biao da zai ti ,ju zai cong jiang xiang zhu ji nei qian ti zhi fang xi bao zhong cheng gong biao da ;yu kong bai dui zhao xiang bi ,ACC、FABP4、FAS、LPL、PPARγde biao da liang jun zeng jia ,ADIPOQ、ATGLhe HSLde biao da liang jun jian shao 。FGF10dui zhi fang de chen ji ju you yi ding de diao kong zuo yong ,zhe chong zuo yong ke neng shi tong guo dui xiang guan zhi fang dai xie ji yin de diao kong shi xian de 。ben yan jiu wei jie shi FGF10dui zhi fang de diao kong zuo yong di gong le ji chu shu ju 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自农业生物技术学报的徐敏,许厚强,杨洋,陈伟，发表于刊物农业生物技术学报2019年03期论文，是一篇关于从江香猪论文,基因论文,真核表达载体论文,肌内前体脂肪细胞论文,诱导分化论文,脂肪沉积论文,农业生物技术学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自农业生物技术学报2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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