导读:本文包含了对虾白斑综合症病毒论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:对虾白斑综合症病毒,wsv249启动子,cAMP-response,element,binding,protein-3(CREB-3),c-Jun
对虾白斑综合症病毒论文文献综述
杨梓[1]（2018）在《对虾白斑综合症病毒极早期基因wsv249启动子分析及转录因子CREB-3鉴定》一文中研究指出自被发现以来,由于对虾白斑综合症病毒(WSSV)的高传染性,高死亡率,此病毒成为了危害虾类养殖业的主要病原之一,并严重影响了对虾产业的发展。由于WSSV感染宿主的关键步骤之一是其极早期基因的转录与翻译,因此本文着重分析了 WSSV极早期基因wsv249启动子及其有关转录因子之间的联系。WSSV极早期基因wsv249编码了一种E3泛素连接酶,能够与对虾体内的泛素结合酶相互作用。本研究中,为了了解wsv249转录调节机制,将wsv249启动子序列以25 bp为单位截短,并分析其启动子活性。四个25 bp区域被认为是潜在的正向或逆向调控元件。值得注意的是,将启动子CRE元件(-275/-250)截去,启动子活性受到抑制而降低了 84.2%。CRE元件是环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREBs)和激活蛋白1(AP-1)的结合位点。为此,本文深入研究了对虾体内同源蛋白Lvc-Jun和LvCREB-3对wsv249启动子的调控作用。我们通过(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)体内发现了一种CREB同源蛋白LvCREB-3,并且LvCREB-3蛋白在鳃组织中分布最多,而在心脏中含量最少。通过WSSV感染实验,发现在病毒感染12-24小时之间,LvCREB-3基因表达量在对虾鳃组织中迅速上升。这一时间段刚好与WSSV病毒极早期基因的表达相对应。另外,Lvc-Jun能够上调wsv249启动子活性高达12.4倍。EMSA实验证明Lvc-Jun能够与启动子中CRE序列结合。双荧光素酶报告基因检测证明位于wsv249启动子序列中-212/-205bp位置的CRE位点而不是-256/-249bp位置的CRE位点,在启动子活性方面起关键作用。相反,对虾体内LvCREB-3蛋白并不能激活wsv249启动子活性。上述研究有助于了解WSSV病毒与宿主体内因子的相互关系,同时也能够帮助了解病毒感染初期,其极早期基因在宿主体内的转录调控,为将来病毒防治提供理论依据。(本文来源于《厦门大学》期刊2018-06-01）
徐在超[2]（2018）在《基于高通量测序的功能微生物分析及其在对虾白斑综合症病毒载体疫苗构建中的应用》一文中研究指出微生物作为自然生态系统中的重要组成部分,在动物体,植物体、及其他自然环境中普遍存在,其对于维持自然环境的生态平衡和宿主的生理功能具有重要意义。因此,关于环境微生物多样性及其功能的研究已经成为微生物学的研究热点。由于常规培养技术的限制,目前在自然生态系统的各个环境中可用于分离培养的微生物不足1%,因此不依赖于分离培养的分子生物学方法在环境微生物学研究中得到了广泛的应用。然而,目前此类方法的研究重点大多局限于环境微生物类群多样性的分析,而对与环境或宿主功能直接相关的特定功能菌群的挖掘与分析还相对较少。因此,为了更好地探究高通量测序技术在功能微生物挖掘分析方面的应用效果,本文首先通过采用高通量测序技术对动物肠道益生菌群中细菌16S rRNA基因V3-V4高变区和冬虫夏草中真菌rRNA基因ITS2区进行测序分析;然后,结合对对虾肠道细菌菌群的分析结果及对虾白斑综合症病毒的研究现状,对对虾肠道细菌菌群进行了分离,同时筛选合适的载体启动子,以从对虾肠道内分离到的优势菌群肠杆菌作为载体菌株进行对虾白斑综合症病毒细菌载体疫苗的构建。主要研究结果如下:(1)采用高通量测序技术对羊粪样品中的芽孢杆菌(Bacillus)、梭菌(Clostridium)和双歧杆菌(Bifidobacterium)进行属水平测序分析,测序得到了大量的目的菌群序列,在97%的相似水平上将其归类得到1922~63172不等的OTUs,样品覆盖率分别为0.89、0.99和1.00,Bacillus(芽孢杆菌属)(37.90%)、Clostridium(梭菌属)(52.50%)和Bifidobacterium(双歧杆菌属)(99.32%)均被检测出来且为主要的优势菌群。(2)对冬虫夏草虫体和子座中的真菌类群进行高通量测序分析得到了大量的目的菌群序列,在97%的相似水平上将其归类得到75~187不等的OTUs,样品覆盖率均为1.00。在虫体和子座中存在大量的共有菌群和各自特有菌群,Ophiocordyceps(线孢虫草菌属)(61.51%、5.30%)和Mortierella(被孢霉属)(26.86%、5.91%)为主要优势共有菌群,此外Tolypocladium(弯颈霉属)、Paecilomyces(拟青霉属)和Metarhizium(绿僵菌属)等也被检测出来并大多为共有菌群。(3)根据上述高通量测序技术在不同样品中微生物类群的分析效果,结合对虾肠道细菌的高通量测序结果显示γ变形菌纲的Enterobacteriaceae(肠杆菌科)(85%)类细菌是对虾各个生长时期的肠道主要优势细菌,本实验对其肠道细菌进行了分离培养,结果表明分离到的肠道细菌有81%归属于肠杆菌科。(4)通过采用四种不同的铁调控型启动子(fur promoter)与噬菌体PhiX174裂解酶基因E(lysis E)进行基因重组与蛋白表达的结果显示,本次实验构建的细菌菌蜕疫苗及载体启动子的筛选未达到预期的结果,需要进一步筛选影响特定毒力蛋白表达的启动子。(5)结合对对虾肠道优势菌群的分析分离结果以及合适启动子的筛选结果,本实验选用组成型启动子J23100、丁香假单胞菌冰核蛋白N端基因序列inaK-N和对虾白斑综合症病毒(WSSV)的囊膜蛋白VP28基因序列进行重组构建表达载体pJIVP28,以从对虾肠道中分离到的优势肠杆菌为载体菌株构建WSSV载体疫苗,结果显示该重组表达载体构建成功,WSSVVP28 ELISA试剂盒也检测出重组蛋白表达并具有良好的活性,并且在宿主菌中也稳定表达。综上所述,本论文的结果表明:在动物肠道中存在大量的功能菌群,采用特异性测序分析方法有助于对其进行深度挖掘和开发;冬虫夏草的自然资源枯竭,人工种植难度较大,以往研究中仅用一种菌导致虫草子实体培养失败,通过对比蛹虫草中Cordyceps(虫草菌属)(99%)测序结果可以推断虫草子实体的形成很可能由两种菌共同形成的,这对于虫草菌的分离培养及人工种植具有重要意义;对虾白斑综合症病毒(WSSV)是一种肠道感染病毒,通过分析对虾不同生长时期的肠道菌群变化,对其优势菌群进行分离培养,并以此作为载体菌株构建相关载体疫苗对对虾类水产动物养殖业的发展具有重要意义。(本文来源于《广东药科大学》期刊2018-03-28）
王庚申,施慧,谢建军,汪玮,何杰[3]（2017）在《白斑综合症病毒在日本囊对虾精养池塘中的动态变化》一文中研究指出用实时荧光定量PCR技术检测了高密度精养池塘中日本囊对虾体内及浮游动物白斑综合症病毒携带量的动态变化,检测结果显示,两口池塘的日本囊对虾苗种均携带白斑综合症病毒,达2.43×10~5~9.42×10~5 IU/mg;浮游动物也携带微量白斑综合症病毒,达6.78×10~2~8.02×10~2 IU/mg。在整个养殖过程中,日本囊对虾多个组织均携带白斑综合症病毒,平均病毒量为鳃>肌肉>肝胰腺>胃;各组织病毒携带量的变化趋势不一致,肌肉、肝胰腺、胃等呈现明显的先降后升趋势,最低降至1.78×10~3 IU/mg,鳃白斑综合症病毒携带量的下降幅度较小,最低为7.29×10~4 IU/mg。浮游动物的病毒量在白斑综合症爆发前波动不明显,发病时急剧升高。综合认为,苗种携带是白斑综合症病毒的主要来源;当养殖进入中后期,底质变差、水温降至病毒适宜复制的温度时,易爆发白斑综合症。(本文来源于《水产科学》期刊2017年06期）
刘飞,李登峰[4]（2017）在《用鸡胚培养对虾白斑综合症病毒(WSSV)的研究》一文中研究指出为探索对虾白斑综合症病毒(WSSV)能否在鸡胚中培养,基于稳定培养体系,将WSSV接种到SPF鸡胚中.收获接种3 d后死亡的鸡胚,从中提取病毒;将其再次接种到健康鸡胚中,传代5次后,由卵黄囊膜提取病毒,将其经肌肉注射至克氏原螯虾,结果实验组克氏原螯虾100%死亡,而对照组无死亡情况.对各代鸡胚及克氏原螯虾进行PCR和电镜检测,实验组呈WSSV阳性;电镜下,死亡鸡胚细胞中可见大量正在组装的病毒粒子;表明WSSV可用鸡胚进行培养.(本文来源于《宁波大学学报(理工版)》期刊2017年01期）
秦梦雪,刘庆慧,万晓媛,黄捷[5]（2016）在《中国部分地区对虾白斑综合症病毒胶原蛋白基因缺失变异分析》一文中研究指出为了解我国主要对虾养殖区的白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)胶原蛋白基因(wsv001)蛋白结构变异情况,本研究以2015年13个省市发病地区采集的57份WSSV阳性样品为模板,用特异引物对目的片段进行扩增,连接转化扩增片段并进行测序分析。结果显示,57份WSSV阳性样品中,扩增出现条带的样品共有18份,氨基酸序列比对结果显示扩增的wsv001片段所编码氨基酸出现叁类变异,包括18个氨基酸小片段缺失,121个氨基酸大片段缺失以及氨基酸插入,此外还有8个氨基酸存在突变。结果表明,我国不同地区wsv001基因及其编码氨基酸,存在明显缺失变异。对wsv001蛋白结构缺失变异的分析为进一步对其蛋白功能和WSSV毒株毒力以及WSSV对环境适应能力的研究提供参考。(本文来源于《2016年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2016-11-02）
张正阳[6]（2016）在《对虾白斑综合症病毒（WSSV）基因原核表达与检测》一文中研究指出白斑综合症是危害世界虾养殖业的一大危害,自1992年在中国台湾发现以来,随后迅速在亚洲、欧洲、美洲蔓延开来。一旦感染白斑综合症病毒(WSSV),对虾3-10天发病,且死亡率100%,至今仍没有针对WSSV有效治疗方法。目前只能以清洁养殖环境、筛选抗病毒虾苗、使用一般的抗病毒药等手段预防WSSV感染。自WSSV基因组测序工作完成以来,越来越多的研究重点放在WSSV感染宿主细胞致病机理上,并且已经证明病毒囊膜蛋白在感染宿主的过程中起到了关键性作用,其中囊膜蛋白VP28研究居多。VP28蛋白已经在多种真核、原核表达系统中表达并被证明能够有效的抵御WSSV感染,所以重组VP28蛋白疫苗可作为防治白斑综合症的一种新手段。大肠杆菌中表达的VP28蛋白需要提取纯化后才能施用,这会增加成本和技术难度,对于规模化养殖中应用推广是十分不利的。蓝藻为光合自养生物,结构简单,基因组小便于遗传操作,蛋白酶含量少不易分解外源表达产物,光合效率高,生长速度快,且个体为多细胞易于大量收获。因此,蓝藻作为原核表达系统已被广泛应用于制备重组药物、生物柴油和环境保护等领域。对虾仔虾期具有植食性阶段,蓝藻为天然开口饵料,故蓝藻可作为口服重组疫苗。本实验室目前已获得转vp28基因的鱼腥藻7120(丝状体蓝藻),并经过药效试验证明其具有抗WSSV能力。但是关于其VP28蛋白的表达效率、表达规律以及投喂对虾防治WSSV的有效剂量却知之甚少。所以,本文构建了一种定量检测鱼腥藻7120异源表达VP28蛋白的方法,以解决上述问题。1.vp28基因原核表达载体构建与表达及纯化首先将密码子优化后合成的vp28基因序列,通过PCR扩增技术克隆获得目的片断产物,然后与pET-28a表达载体连接,构建大肠杆菌高效表达载体pET-28a-vp28。采用热激法转化DH5α,应用抗生素筛选阳性克隆,再经PCR鉴定(636bp)正确后,提取其质粒进行双酶切,结果验证后(重组质粒5910bp,双酶切产物5289bp、621bp)再进行DNA测序验证。测序结果表明,vp28基因正确的插入到了pET-28a表达载体中,最终成功获得了重组pET-28a-vp28表达载体。将其转入表达菌株bl21(de3)中后,卡那霉素筛选出阳性克隆,并用iptg进行诱导表达,sds-page电泳结果显示vp28蛋白诱导表达成功。进一步确定诱导表达的vp28蛋白是包涵体。包涵体经尿素洗涤并溶解后,利用biologiclp层析系统过镍柱琼脂糖亲和层析纯化,经含有10-250mm梯度浓度的咪唑洗脱后,得到融合蛋白,结果显示纯化蛋白为单一条带分子量约为30kda,纯度为95%以上。使用非干扰型蛋白浓度测定试剂盒测定纯化后的重组蛋白浓度为1.094mg/ml。2.抗vp28单克隆抗体的制备使用软件分析vp28氨基酸序列,综合其二级结构、跨膜区、信号肽、抗原性等参数选取了8个表位合成多肽并偶联血蓝蛋白klh,制备免疫原。常规方法免疫小鼠,选取抗血清效价1:16000的balb/c鼠1的脾细胞与杂交瘤细胞进行融合,有限稀释法筛选阳性克隆,得到3株单克隆细胞株,分别为e9、a7和h3。制备腹水后,elisa法测定其亚型均igg,效价分别为1×10-6、1×10-5、1×10-4,表位分别为ngksdaqmkeed(84-95aa)、dnietnmdenlr(42-53aa)、ssftpvsidede(156-167aa)。选取效价最高的e9作为后续westernblotting实验的第一抗体。3.工程蓝藻vp28外源蛋白表达量的定量检测将野生型和转vp28基因鱼腥藻7120分别进行单藻落纯化并扩大培养,并进一步采用逐渐增加硫酸新霉素浓度(25-200μg/ml)方法筛选出含有重组质粒的转基因鱼腥藻7120。将筛选后的工程藻株培养在200μg/ml硫酸新霉素液体培养基中,并分别提取转基因鱼腥藻7120和野生型的蛋白,应用单克隆抗体e9进行westernblotting定性检测和验证。将该2种藻株分别以1:50比例重新接种,设叁个平行样,培养在30℃培养箱内。然后分别采集接种后第1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23天的藻液,一方面使用分光光度计测定其od750值,绘制藻体生长曲线。一方面采用冻融法破碎细胞并提取各自的总蛋白,bradford法测定总蛋白浓度后,-80℃保存。采用效价为1:10000的抗vp28单克隆抗体e9作为第一抗体,1:5000hrp标记的羊抗鼠igg作为第二抗体进行westernblotting。将已纯化的原核表达pet-28a-vp28融合蛋白依次上样0.05μg、0.1μg、0.25μg、0.5μg、1μg、2μg作为横坐标,chemi-docmpimagingsystem成像仪采集条带的信号累计强度作为纵坐标,制作定量westernblotting标准曲线,采用r2大于0.99的标准曲线计算出转基因鱼腥藻7120中vp28的表达量。结果显示,转基因鱼腥藻7120产出的vp28量是先高后低,其中培养第17天时,vp28表达量达到最高,为5.14μg/ml,占总蛋白浓度的1.45%,而第15天总蛋白浓度最大,可见vp28蛋白表达量和总蛋白并不是协同增长的。野生型和转基因鱼腥藻7120的生长曲线基本相似,均是在第21天达到最大生长量,并且转基因鱼腥藻7120的生长速率为野生型的95.30%。可见藻体生长量最大的时间与VP28表达最大量是不同步的。(本文来源于《上海海洋大学》期刊2016-05-20）
王刚,孙成波,蔡传彬,曹佩星[7]（2016）在《哈维氏弧菌和白斑综合症病毒对墨吉明对虾仔虾的致病性》一文中研究指出研究了不同浓度哈维氏弧菌与白斑综合症病毒单独、合并浸泡感染,以及不同温度和盐度条件下单独、合并浸泡感染对墨吉明对虾仔虾死亡情况和WSSV携带量的影响。结果表明:高浓度哈维氏弧菌浸泡感染仔虾,48 h死亡率可达100%,高浓度WSSV浸泡感染仔虾,96 h死亡率可达97%;盐度突变可以降低弧菌与病毒浸泡感染对仔虾的致病性;高温条件下(32℃)弧菌对仔虾的致病性较强,低温条件下(26℃)病毒对仔虾的致病性较强;盐度26、水温26℃条件下,合并感染组死亡率较WSSV单独感染组低;哈维氏弧菌感染可以抑制WSSV在对虾体内的复制。(本文来源于《热带生物学报》期刊2016年01期）
李晶晶,李云,刘红,戴习林,蒋飞[8]（2016）在《感染溶藻弧菌及白斑综合症病毒后凡纳滨对虾不同组织的Toll样受体基因表达变化研究》一文中研究指出为研究不同类型Toll样受体基因在凡纳滨对虾免疫调控机制中的作用,实验首先通过荧光定量PCR方法检测了凡纳滨对虾3种Toll样受体基因在不同组织中的表达情况。结果表明凡纳滨对虾3种Toll样受体基因m RNA在各组织中均有表达。其中,Toll1基因在肌肉,血淋巴,心脏和鳃均有较高表达,心脏表达量最高;Toll2基因在血淋巴,心脏和鳃均有较高表达,其中在鳃表达量最高;Toll3基因在鳃和心脏有较高表达,其中在鳃表达量最高。实验还对人工感染溶藻弧菌及白斑综合症病毒后凡纳滨对虾3种Toll样受体基因在不同免疫组织的表达变化差异进行研究。感染白斑综合症病毒后凡纳滨对虾血淋巴及鳃中3种Toll样受体基因表达量均显着提高,并在各自达到表达峰值后逐渐下降直至恢复到感染前水平。感染溶藻弧菌后凡纳滨对虾血淋巴中3种Toll样受体基因表达量均显着提高;鳃中Toll1及Toll3表达量分别于感染后3h和12h有显着提高,而Toll2表达量无显着提高。由此推测3种Toll样受体基因均可能参与白斑综合症病毒感染所引起的免疫调控;而在溶藻弧菌感染所引起的免疫调控中,除了Toll1,Toll3参与鳃的免疫调控外,Toll2基因还参与血淋巴中的先天性免疫调控。长期感染白斑综合症病毒或溶藻弧菌后,凡纳滨对虾3种Toll样受体基因在血淋巴与鳃中的表达量均显着升高,这可能与虾体在长期感染过程中,需要不断保持较高免疫水平有关。(本文来源于《海洋与湖沼》期刊2016年02期）
李晶晶,李云,戴习林[9]（2015）在《白斑综合症病毒及溶藻弧菌感染后凡纳滨对虾Toll基因的表达变化研究》一文中研究指出通过实时定量PCR方法检测了分别感染白斑综合症病毒(WSSV,103copies)和溶藻弧菌(2.53106 copies)的凡纳滨对虾中3种Toll基因的表达变化,结果表明,处理24h内,感染WSSV 3h后血淋巴和鳃部中3种Toll基因m RNA水平均显着提高(P<0.05),感染6h后3种Toll m RNA水平均达到最高值后下降恢复到感染前水平;感染溶藻弧菌的凡纳滨对虾血淋巴中3种Toll基因表达量均显着提高(P<0.05),鳃中Lv Toll1及Lv Toll3表达量分别于感染后3h和12h有显着提高(P<0.05),Lv Toll2表达量无显着提高(P>0.05);感染WSSV及溶藻弧菌14天后,存活个体血淋巴和鳃部中的3种Toll m RNA水平均显着高于对照组(P<0.05),其中感染WSSV存活个体的血淋巴中Lv Toll1的表达量最高,鳃部中Lv Toll2的表达量最高。感染溶藻弧菌存活个体血淋巴中Lv Toll2的表达量最高,鳃部中Lv Toll1表达量最高。由此推测3种Toll基因均参与WSSV感染所引起的天然免疫调控;在溶藻弧菌感染所引起的免疫调控中,3种Toll基因均参与血淋巴中的天然免疫调控,其中Lv Toll1和Lv Toll3还参与鳃部的免疫调控。(本文来源于《2015年中国水产学会学术年会论文摘要集》期刊2015-11-05）
张玉梅,李文清[10]（2015）在《南美白对虾抗白斑综合症病毒新品种——“中兴1号”的养殖与推广》一文中研究指出天津市武清区引进南美白对虾抗白斑综合症病毒新品种—"中兴1号",并在一些池塘进行示范养殖和推广,其抗WSSV的特性,提高了虾体成活率,提高了产量,增加了养虾收入。示范推广两年最终累计新增效益278.4万元。(本文来源于《中国水产》期刊2015年08期）
对虾白斑综合症病毒论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
微生物作为自然生态系统中的重要组成部分,在动物体,植物体、及其他自然环境中普遍存在,其对于维持自然环境的生态平衡和宿主的生理功能具有重要意义。因此,关于环境微生物多样性及其功能的研究已经成为微生物学的研究热点。由于常规培养技术的限制,目前在自然生态系统的各个环境中可用于分离培养的微生物不足1%,因此不依赖于分离培养的分子生物学方法在环境微生物学研究中得到了广泛的应用。然而,目前此类方法的研究重点大多局限于环境微生物类群多样性的分析,而对与环境或宿主功能直接相关的特定功能菌群的挖掘与分析还相对较少。因此,为了更好地探究高通量测序技术在功能微生物挖掘分析方面的应用效果,本文首先通过采用高通量测序技术对动物肠道益生菌群中细菌16S rRNA基因V3-V4高变区和冬虫夏草中真菌rRNA基因ITS2区进行测序分析;然后,结合对对虾肠道细菌菌群的分析结果及对虾白斑综合症病毒的研究现状,对对虾肠道细菌菌群进行了分离,同时筛选合适的载体启动子,以从对虾肠道内分离到的优势菌群肠杆菌作为载体菌株进行对虾白斑综合症病毒细菌载体疫苗的构建。主要研究结果如下:(1)采用高通量测序技术对羊粪样品中的芽孢杆菌(Bacillus)、梭菌(Clostridium)和双歧杆菌(Bifidobacterium)进行属水平测序分析,测序得到了大量的目的菌群序列,在97%的相似水平上将其归类得到1922~63172不等的OTUs,样品覆盖率分别为0.89、0.99和1.00,Bacillus(芽孢杆菌属)(37.90%)、Clostridium(梭菌属)(52.50%)和Bifidobacterium(双歧杆菌属)(99.32%)均被检测出来且为主要的优势菌群。(2)对冬虫夏草虫体和子座中的真菌类群进行高通量测序分析得到了大量的目的菌群序列,在97%的相似水平上将其归类得到75~187不等的OTUs,样品覆盖率均为1.00。在虫体和子座中存在大量的共有菌群和各自特有菌群,Ophiocordyceps(线孢虫草菌属)(61.51%、5.30%)和Mortierella(被孢霉属)(26.86%、5.91%)为主要优势共有菌群,此外Tolypocladium(弯颈霉属)、Paecilomyces(拟青霉属)和Metarhizium(绿僵菌属)等也被检测出来并大多为共有菌群。(3)根据上述高通量测序技术在不同样品中微生物类群的分析效果,结合对虾肠道细菌的高通量测序结果显示γ变形菌纲的Enterobacteriaceae(肠杆菌科)(85%)类细菌是对虾各个生长时期的肠道主要优势细菌,本实验对其肠道细菌进行了分离培养,结果表明分离到的肠道细菌有81%归属于肠杆菌科。(4)通过采用四种不同的铁调控型启动子(fur promoter)与噬菌体PhiX174裂解酶基因E(lysis E)进行基因重组与蛋白表达的结果显示,本次实验构建的细菌菌蜕疫苗及载体启动子的筛选未达到预期的结果,需要进一步筛选影响特定毒力蛋白表达的启动子。(5)结合对对虾肠道优势菌群的分析分离结果以及合适启动子的筛选结果,本实验选用组成型启动子J23100、丁香假单胞菌冰核蛋白N端基因序列inaK-N和对虾白斑综合症病毒(WSSV)的囊膜蛋白VP28基因序列进行重组构建表达载体pJIVP28,以从对虾肠道中分离到的优势肠杆菌为载体菌株构建WSSV载体疫苗,结果显示该重组表达载体构建成功,WSSVVP28 ELISA试剂盒也检测出重组蛋白表达并具有良好的活性,并且在宿主菌中也稳定表达。综上所述,本论文的结果表明:在动物肠道中存在大量的功能菌群,采用特异性测序分析方法有助于对其进行深度挖掘和开发;冬虫夏草的自然资源枯竭,人工种植难度较大,以往研究中仅用一种菌导致虫草子实体培养失败,通过对比蛹虫草中Cordyceps(虫草菌属)(99%)测序结果可以推断虫草子实体的形成很可能由两种菌共同形成的,这对于虫草菌的分离培养及人工种植具有重要意义;对虾白斑综合症病毒(WSSV)是一种肠道感染病毒,通过分析对虾不同生长时期的肠道菌群变化,对其优势菌群进行分离培养,并以此作为载体菌株构建相关载体疫苗对对虾类水产动物养殖业的发展具有重要意义。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
对虾白斑综合症病毒论文参考文献
[1].杨梓.对虾白斑综合症病毒极早期基因wsv249启动子分析及转录因子CREB-3鉴定[D].厦门大学.2018
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[6].张正阳.对虾白斑综合症病毒（WSSV）基因原核表达与检测[D].上海海洋大学.2016
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[8].李晶晶,李云,刘红,戴习林,蒋飞.感染溶藻弧菌及白斑综合症病毒后凡纳滨对虾不同组织的Toll样受体基因表达变化研究[J].海洋与湖沼.2016
[9].李晶晶,李云,戴习林.白斑综合症病毒及溶藻弧菌感染后凡纳滨对虾Toll基因的表达变化研究[C].2015年中国水产学会学术年会论文摘要集.2015
[10].张玉梅,李文清.南美白对虾抗白斑综合症病毒新品种——“中兴1号”的养殖与推广[J].中国水产.2015
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