本文主要研究内容
作者张博雯（2019）在《核盘菌细胞分裂周期蛋白SsCdc28的功能研究》一文中研究指出：核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum（Lib）de Bary）是使作物产生菌核病的主要病原物,该菌广泛侵染大部分单子叶和双子叶植物,包括大部分的经济作物和油料作物,是需要密切关注并防治的病原菌之一。MADS-box基因家族是一类重要的转录调控因子,广泛存在于真核生物中,MADS-box家族中的SRF亚族具有高度保守的结构域,SsMCM1具有SRF亚族的高度保守结构域,本课题组研究发现SsMCM1参与调控核盘菌的生长发育及致病性。结合酿酒酵母MCM1信号通路分析发现核盘菌中存在与酿酒酵母MCM1下游Cdc28高度同源的蛋白SS1G02296,本研究成功克隆该基因,命名为SsCdc28,并通过以下研究初步分析SsCdc28蛋白的功能。1、以野生型核盘菌UF-1DNA为模板成功克隆得到SsCdc28基因,全长1185bp,并对SsCdc28进行生物信息学分析。2、本研究通过NCBI查找SsCdc28基因上下游序列,设计特异性引物,以野生型核盘菌DNA为模板克隆SsCdc28基因上游1246bp片段,下游1225bp片段,将上下游片段与敲除载体pXEH连接,构建核盘菌SsCdc28基因敲除载体pXEH-Cdc28。3、制备核盘菌原生质体,将构建好的敲除载体pXEH-Cdc28转化到原生质体中。通过PCR扩增验证经抗性筛选的转化子,最终得到3个阳性SsCdc28敲除突变体SsCdc28-7、SsCdc28-11、SsCdc28-13。4、对筛选得到的敲除突变体菌株和野生型核盘菌进行对比,结果表明敲除转化子的菌丝生长速率变慢,无法形成菌核,菌丝弯曲,分枝角度变大,侵染垫及草酸的产生量显著减少,抵抗高渗透胁迫环境能力增强,致病力减弱。上述研究表明SsCdc28参与调控核盘菌生长发育以及草酸等物质的产生,进而影响核盘菌的生长发育及致病力,为进一步揭示核盘菌转录因子SsMCM1调控网络,探索核盘菌生长发育及致病机制奠定基础。
Abstract
he pan jun （Sclerotinia sclerotiorum（Lib）de Bary）shi shi zuo wu chan sheng jun he bing de zhu yao bing yuan wu ,gai jun an fan qin ran da bu fen chan zi xie he shuang zi xie zhi wu ,bao gua da bu fen de jing ji zuo wu he you liao zuo wu ,shi xu yao mi qie guan zhu bing fang zhi de bing yuan jun zhi yi 。MADS-boxji yin jia zu shi yi lei chong yao de zhuai lu diao kong yin zi ,an fan cun zai yu zhen he sheng wu zhong ,MADS-boxjia zu zhong de SRFya zu ju you gao du bao shou de jie gou yu ,SsMCM1ju you SRFya zu de gao du bao shou jie gou yu ,ben ke ti zu yan jiu fa xian SsMCM1can yu diao kong he pan jun de sheng chang fa yo ji zhi bing xing 。jie ge niang jiu jiao mu MCM1xin hao tong lu fen xi fa xian he pan jun zhong cun zai yu niang jiu jiao mu MCM1xia you Cdc28gao du tong yuan de dan bai SS1G02296,ben yan jiu cheng gong ke long gai ji yin ,ming ming wei SsCdc28,bing tong guo yi xia yan jiu chu bu fen xi SsCdc28dan bai de gong neng 。1、yi ye sheng xing he pan jun UF-1DNAwei mo ban cheng gong ke long de dao SsCdc28ji yin ,quan chang 1185bp,bing dui SsCdc28jin hang sheng wu xin xi xue fen xi 。2、ben yan jiu tong guo NCBIcha zhao SsCdc28ji yin shang xia you xu lie ,she ji te yi xing yin wu ,yi ye sheng xing he pan jun DNAwei mo ban ke long SsCdc28ji yin shang you 1246bppian duan ,xia you 1225bppian duan ,jiang shang xia you pian duan yu qiao chu zai ti pXEHlian jie ,gou jian he pan jun SsCdc28ji yin qiao chu zai ti pXEH-Cdc28。3、zhi bei he pan jun yuan sheng zhi ti ,jiang gou jian hao de qiao chu zai ti pXEH-Cdc28zhuai hua dao yuan sheng zhi ti zhong 。tong guo PCRkuo zeng yan zheng jing kang xing shai shua de zhuai hua zi ,zui zhong de dao 3ge yang xing SsCdc28qiao chu tu bian ti SsCdc28-7、SsCdc28-11、SsCdc28-13。4、dui shai shua de dao de qiao chu tu bian ti jun zhu he ye sheng xing he pan jun jin hang dui bi ,jie guo biao ming qiao chu zhuai hua zi de jun si sheng chang su lv bian man ,mo fa xing cheng jun he ,jun si wan qu ,fen zhi jiao du bian da ,qin ran dian ji cao suan de chan sheng liang xian zhe jian shao ,di kang gao shen tou xie pai huan jing neng li zeng jiang ,zhi bing li jian ruo 。shang shu yan jiu biao ming SsCdc28can yu diao kong he pan jun sheng chang fa yo yi ji cao suan deng wu zhi de chan sheng ,jin er ying xiang he pan jun de sheng chang fa yo ji zhi bing li ,wei jin yi bu jie shi he pan jun zhuai lu yin zi SsMCM1diao kong wang lao ,tan suo he pan jun sheng chang fa yo ji zhi bing ji zhi dian ding ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自吉林大学的张博雯，发表于刊物吉林大学2019-06-25论文，是一篇关于核盘菌论文,基因敲除论文,生长发育论文,致病性论文,吉林大学2019-06-25论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自吉林大学2019-06-25论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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