导读:本文包含了急性凋亡性肝损伤论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:肝损伤,炎症因子,小鼠模型,p53
急性凋亡性肝损伤论文文献综述
许萍,焦彦,陈煜,段钟平,时红波[1]（2019）在《p53凋亡刺激蛋白2单倍体缺失通过促进自噬保护CCL4诱导的小鼠急性肝损伤》一文中研究指出背景P53凋亡刺激蛋白2(Apoptosis stimulating of p53 protein 2,ASPP2)具有多种生物学功能,它参与细胞炎症反应和细胞自噬,并可调节细胞凋亡和细胞生长。但是ASPP2在急性肝损伤中的作用尚未见报道。这项研究的目的是验证ASPP2单倍体缺失可以通过促进自噬保护CCL4诱导的急性肝损伤的假说。方法 CCL4腹腔注射构建小鼠急性肝损伤模型,在四氯化碳(CCl4)诱导的急性肝损伤野生(本文来源于《第十届全国疑难及重症肝病大会论文汇编》期刊2019-05-16）
Bing-yu,CHEN,Lu-xi,JIANG,Ke,HAO,Lu,WANG,Ying,WANG[2]（2018）在《血浆输注通过抑制肝细胞凋亡对脂多糖/D-半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用（英文）》一文中研究指出目的:评估血浆输注对脂多糖半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。创新点:在小鼠急性肝损伤模型中证明血浆输注对肝损伤的保护作用,且此作用与p53介导的肝细胞凋亡相关。方法:将40只清洁型ICR雄性小鼠随机分为4组(n=10每组):(1)对照组;(2)血浆(plamsa)组。收集血清和肝组织样本,用天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒检测血清中AST和ALT水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化;肝组织进行苏木精-伊红染色法(HE)和网状纤维染色,显微镜下观察肝组织病理学变化;用免疫印迹法(WB)检测凋亡相关蛋白的变化。在腹腔注射后32小时内对小鼠进行存活分结论:能够显着诱导小鼠的急性肝损伤,包括增加血清中AST和ALT水平;中心小叶坏死和炎性细胞的组织病理学变化和炎症上(TNF-α和IL-6)。当血浆输注后,这些变化被缓解。结果显示,血浆输注显着降低小鼠死亡率,降低AST、ALT和炎症因子如TNF-α和IL-6的水平。Cleaved Caspase-3、BAX和p53的表达下调,Bcl-2上调,表明血浆可以减少诱导的细胞凋亡。血浆输注对诱导的急性肝损伤的保护机制与通过p53诱导的凋亡途径和炎症因子减少相关。(本文来源于《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》期刊2018年06期）
钟欢[3]（2018）在《UII/UT系统介导的急性肝损伤效应与枯否细胞自噬增加和凋亡减少有关》一文中研究指出目的:利用尾加压素II(urotensin II,UII)受体(即UT)特异性拮抗剂urantide阻断UII/UT系统,探讨UII/UT系统对急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)过程中肝组织以及体外LPS刺激大鼠原代枯否细胞(Kupffer cell,KC)自噬水平的影响,以进一步阐明UII/UT系统在ALF过程中的作用机制。方法:体内实验:将健康雄性BALB/c小鼠随机分为A组:正常对照组LPS/DGalN(-)urantide(-);B组:预处理对照组LPS/D-Gal N(-)urantide(+);C组:模型组LPS/D-GalN(+)urantide(-);D组:预处理模型组LPS/D-GalN(+)urantide(+),每组6只(n=6)。其中B和D组给予urantide尾静脉注射预处理,A和C组给予生理盐水对照处理处理。30 min后,C和D组立即LPS/D-GalN腹腔注射诱导急性肝损伤,A和B组给予相同剂量的生理盐水对照处理。腹腔注射6 h后采集小鼠血液和肝组织样本。检测血清谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平。采用实时荧光定量PCR(Quantitative Realtime PCR,qRT-PCR)对肝组织Beclin-1、自噬相关基因5(autophagy-related gene,Atg5)、微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated proteins 1 light chain 3B,LC3)和p62 mRNA进行相对定量检测,采用蛋白免疫印迹法(western-blot)对自噬相关蛋白LC3和p62进行检测。体外实验:经在体原位灌注、密度梯度离心和早期细胞换液等方法分离纯化SD大鼠原代KC,采用墨汁吞噬法鉴定细胞吞噬功能。将提取的KC随机分成A组:正常对照组LPS(-)urantide(-);B组:预处理对照组LPS(-)urantide(+);C组:模型组LPS(+)urantide(-);D组:预处理模型组LPS(+)urantide(+),每组实验重复6次(n=6)。其中B和D组加入urantide溶液预处理,A和C组给予相同剂量的无菌PBS对照处理。30 min后,C和D组立即加入LPS溶液,A和B组给予相同剂量的无菌PBS对照处理,刺激6 h后收集细胞。采用qRT-PCR检测细胞肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF ReceptorAssociated Factor 6,TRAF6)、LC3和p62 mRNA表达水平,采用Western-Blot检测TRAF6、LC3、p62、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和活化型半胱天冬酶-3(cleaved caspase3)蛋白水平,采用活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)检测试剂盒检测枯否细胞ROS水平。结果:体内实验显示:LPS/D-GalN刺激6 h引起小鼠血清ALT和AST水平升高,C组较A、B组明显升高(均P<0.01);而urantide预处理后,D组较C组显着下降(P<0.01)。此外,C组肝组织Beclin-1、Atg5、LC3和p62 mRNA以及LC3-II、p62蛋白水平较A、B组均明显下降(均P<0.01);D组上述指标较C组而言,均无显着变化,差异均无统计学意义(均P>0.05)。体外实验显示:LPS刺激原代KC 6 h,其炎症信号分子TRAF6和ROS水平明显增高,C组TRAF6 m RNA和蛋白水平以及ROS水平较A、B组均显着上调(均P<0.01);而urantide预处理后,D组上述指标较C组均明显下调(均P<0.01)。此外,C组KC自噬相关指标LC3和p62 mRNA和蛋白水平较A、B组均明显上调(均P<0.01);而urantide预处理后,D组LC3 mRNA和蛋白以及p62 m RNA较C组明显下降,但p62蛋白水平进一步增高(均P<0.01)。同时,C组KC抗凋亡Bcl-2蛋白水平较A、B组均明显下降,促凋亡cleaved caspase3蛋白水平较A、B组明显增高(均P<0.01);而urantide预处理后,D组Bcl-2水平较C组进一步下降,而cleaved caspase3水平较C组进一步增高(均P<0.01)。结论:LPS/D-GalN诱导的ALF模型小鼠肝脏自噬水平明显下降,urantide预处理对ALF肝内自噬水平无影响。LPS能激活KC内炎症信号分子TRAF6,促使ROS产生,诱导KC自噬和凋亡水平的增高;而urantide预处理能抑制LPS引起的KC内TRAF6的增高和ROS的产生,同时抑制KC自噬的增高,促进KC的凋亡。因此,本研究表明UII/UT系统介导的ALF肝损伤效应与肝内抑制的自噬水平无关,但与KC自噬的增强和凋亡的抑制有关。(本文来源于《南京医科大学》期刊2018-05-01）
王凤林[4]（2017）在《基于茵陈蒿汤及大承气汤的清下法对急性内毒素性肝损伤大鼠肝细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的:探讨以茵陈蒿汤联合大承气汤为基础的清下法对急性内毒素肝损伤大鼠肝细胞凋亡的影响。方法:方法:采用内毒素(LPS)加D-氨基半乳糖(D-GalN)造成大鼠急性内毒素性肝损伤模型,并予以清下中药进行干预,检测造模后各组大鼠肝功能及凝血酶原时间、肝组织病理改变、通过Tunel检测各组大鼠肝细胞凋亡指数,RT-PCR法检测Bcl-2、Bax及Caspase3mRNA表达。结果:结果:清下法可明显降低内毒素性肝损伤大鼠血ALT、AST、TBIL水平,与模型组比较有显着差异(P<0.01,0.05),模型组大鼠Bax、Caspase3mRNA表达量明显高于对照组及清下组(P<0.05),Bcl-2mRNA达量则较对照组及清下组明显降低(P<0.05)。结论:结论:清下法可明显改善内毒素性肝损伤大鼠肝功能及肝组织病理、降低肝细胞凋亡率,通过降低Bax、caspase3mRNA表达,上调Bcl-2mRNA表达,调节Bcl-2/Bax之间的平衡达到抑制肝细胞凋亡的目的。(本文来源于《2017年第五次世界中西医结合大会论文摘要集（上册）》期刊2017-12-06）
刘云志,李会方,李君茹,周嘉,卢晓[5]（2017）在《n-3多不饱和脂肪酸促进肝细胞凋亡加剧APAP诱导的急性肝损伤》一文中研究指出研究背景:对乙酰氨基酚(APAP)是临床常用的解热镇痛药,以常规剂量服用时,APAP可经肝脏代谢随尿液排出,但过量的APAP其代谢产物会在肝脏聚集,并诱导急性肝损伤。近年来的研究表明,n-3多不饱和脂肪酸具有影响免疫细胞分化,促进细胞凋亡,自噬等作用,其对APAP诱导的急性肝损伤的影响尚不明了。目的:本研究旨在探讨n-3多不饱和脂肪酸对APAP诱导的急性肝损伤的影响及其机制。方法:大剂量APAP分别注射WT小鼠及Fat-1转基因小鼠,分时间点收集外周血及肝脏标本,并分离小鼠肝细胞。通过检测血清ALT及肝脏病理,TUNEL染色反应小鼠肝脏损伤情况;以ELISA检测血清IL-6,IL-10水平;qpcr检测肝脏内IL-6,IL-10,BCL-2,Bax表达情况;Western blot检测信号通路的变化。结果:经大剂量APAP注射后,Fat-1小鼠呈现比WT小鼠更严重的肝脏病理损伤,并且血清中分泌更高的ALT水平,TUNEL染色结果亦显示APAP注射Fat-1小鼠肝细胞凋亡更严重。WT小鼠的血清IL-6和IL-10水平显着高于Fat-1小鼠,并且WT小鼠肝细胞的pSTAT3,pAKT,Bcl-2表达水平均在高于Fat-1小鼠,同时,促凋亡的Bax水平低于Fat-1小鼠。结论:n-3多不饱和脂肪酸可能通过抑制IL-6的表达及其下游STAT3,AKT的磷酸化,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达并诱导促凋亡蛋白Bax的表达,从而加剧肝细胞凋亡进而加重APAP诱导的急性肝损伤。(本文来源于《第十二届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2017-10-26）
李素婷,王琳,许倩,杜超[6]（2016）在《山楂叶总黄酮对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响》一文中研究指出目的研究山楂叶总黄酮(FMCL)对急性酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法 60只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、FMCL大、小剂量组。采用56%(V/V)北京二锅头白酒灌胃制备急性肝损伤模型,同时按剂量每天给予FMCL(80、40 mg/kg)干预,连续灌胃14 d后处死小鼠缺口末端标记(TUNEL)法检测肝细胞凋亡情况,Western印迹法定量检测肝细胞Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果与模型组比较,FMCL明显降低酒精性肝损伤小鼠肝细胞凋亡指数,TUNEL染色阳性细胞数明显下降(P<0.01);与正常组比较,模型组小鼠肝组织Bcl-2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达明显升高(P<0.01),给予FMCL保护后,Bcl-2蛋白表达升高,Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2/Bax比值高于模型组(P<0.01)。结论 FMCL通过上调抗凋亡基因Bcl-2的表达、下调促凋亡基因Bax的表达,抑制酒精诱导的肝细胞凋亡,对急性酒精性肝损伤起到保护作用。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2016年14期）
万春平,祁燕,张兴宗,李小丝,郑喜[7]（2015）在《扶正养肝方对急性免疫性肝损伤抗肝细胞凋亡及凋亡相关分子表达的研究》一文中研究指出目的探讨扶正养肝方对急性免疫性肝损伤抗肝细胞凋亡及分子机制,为其临床应用及院内制剂的开发奠定基础。方法 40只昆明种小鼠,随机分为4组,即正常对照组、病理模型组、联苯双酯滴丸组、扶正养肝方组。建立刀豆蛋白(Concanavalin,Con A)诱导免疫性肝损伤模型,检测各组小鼠血清AST水平,石蜡切片HE染色测定肝脏病理损伤程度。TUNEL法检测肝细胞凋亡,实时荧光定量PCR法检测肝损伤模型小鼠Fas和Survivin mRNA表达水平。结果扶正养肝方药物干预显着降低血清AST水平(P<0.05),改善小鼠肝脏病理损伤程度,抑制肝损伤模型小鼠肝细胞凋亡(P<0.05)。同时,扶正养肝方干预后显着下调Fas mRNA表达水平(P<0.01),然而对Survivin mRNA基因表达水平无明显影响(P>0.05)。结论扶正养肝方对急性免疫性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与下调Fas mRNA基因表达,抑制肝细胞凋亡有关。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2015年12期）
左爱仁[8]（2015）在《根皮素和根皮素异烟酰基腙防治急性肝损伤活性及诱导人肝癌细胞凋亡机理研究》一文中研究指出急性肝损伤是一种极其常见的肝脏疾病,目前有效的临床预防和治疗方法是口服抗氧化剂和合理的药物支持治疗。急性肝损伤诱导因素主要有自由基、病毒、酒精、药物和免疫等原因,而自由基氧化损伤通常是急性肝损伤的一种主要病因。研究表明人体内活性氧(ROS)和自由基含量太高,容易引起肝细胞膜破坏和DNA损伤,进而导致急性肝损伤。因而,广泛筛选安全有效的高活性抗氧化剂,研究其生物效应和作用机制,进而指导临床合理用药,具有重要的科学意义和应用前景。根皮素是具有二氢查尔酮类结构的黄酮类化合物,存在于苹果、梨等果皮及根皮中以及多种蔬菜汁液中。已有研究表明,根皮素具有很好的抗氧化、抑制酪氨酸酶和抗癌活性等生物活性。具体如根皮素可抗氧化,淡化色斑,使皮肤增白,其效果优于曲酸和熊果苷等,是目前化妆品中常用的美白剂;同时,根皮素还具有抗肿瘤、降血糖、保护血管等活性。但是,由于根皮素在自然状态下很容易氧化变质,这极大地限制了它的应用范围和活性发挥。对其适度修饰,希望在增加其稳定性同时,能保存或提高其抗氧化和抑制酪氨酸酶活性能力,无疑是一项很有意义的工作。根皮素异烟酰基腙的合成和相关活性研究便是基于这一思路进行的。目前有关根皮素抗氧化和抑制酪氨酸酶活性的研究较多,但研究根皮素及其化学修饰物根皮素异烟酰基腙预防和治疗急性肝损伤和抗癌作用机制的工作未见报道,基于此,本论文从这一方面展开了相关研究。基于本实验室的前期工作积累,本论文以槲皮素为参照物,研究了根皮素、根皮素异烟酰基腙(本实验室合成和结构表征)的抗氧化和抑制酪氨酸酶活性;分别采用常用的D-氨基半乳糖、硫代乙酰胺和对乙酰氨基苯酚造模,研究了根皮素和根皮素异烟酰基腙对小鼠急性肝损伤的保护作用。采用MTT法、流式细胞仪测定法、凝胶电泳法、蛋白印迹杂交和实时荧光定量PCR法,初步探索了根皮素和根皮素异烟酰基腙调控人肝癌BEL-7402细胞增殖和凋亡作用机制。研究结果表明,就采用的抗氧化模型而言,根皮素和根皮素异烟酰基腙均具有良好的抗氧化活性,而且根皮素异烟酰基腙活性明显优于根皮素,甚至优于阳性对照物槲皮素。而对于抑制酪氨酸酶二酚酶活性实验而言,根皮素活性优于根皮素异烟酰基腙。就研究的肝损伤模型而言,根皮素异烟酰基腙抗氧化肝损伤活性明显优于根皮素,甚至优于阳性对照物槲皮素。关于调控人肝癌bel-7402细胞增殖和凋亡作用机制实验,结果表明,根皮素和根皮素异烟酰基腙对bel-7402细胞具有细胞毒性和诱导细胞凋亡作用。诱导bel-7402细胞凋亡的途径,主要包括p53信号通路,bcl-2家族线粒体信号通路和由htert控制的端粒稳定性。综上所述,根皮素和根皮素异烟酰基腙是良好的抗氧化剂和酪氨酸酶二酚酶活性抑制剂,具有防治急性肝损伤的活性,对人肝癌bel-7402细胞具有细胞毒性和诱导细胞凋亡作用,是值得进一步研究的防治急性肝损伤的新型候选药物。第一章:绪论首先介绍了根皮素,酰腙化合物和酪氨酸酶的研究现状。然后介绍了急性肝损伤的病因、损伤机理,天然药物抗急性肝损伤的研究进展。再介绍了人肝癌凋亡机理研究进展,主要包括目前研究较多的各种信号转导通路和中药黄酮类化合物诱导细胞凋亡的研究进展。第二章:研究了槲皮素、根皮素、根皮素异烟酰基腙、水飞蓟宾抗氧化活性。研究方法包括清除dpph自由基、清除abts自由基,抑制体外肝脏线粒体脂质过氧化活性,和抗氧化保护超螺旋pbr322质粒dna。研究结果表明,根皮素异烟酰基腙、槲皮素、根皮素、水飞蓟宾具有明显的清除自由基和抑制脂质过氧化活性,呈浓度依赖性效应,活性顺序依次为根皮素异烟酰基腙>槲皮素>根皮素>水飞蓟宾。根皮素异烟酰基腙的体系终浓度ic50分别为2.5μmol/l、2.27μmol/l、2.08μmol/l。槲皮素的体系终浓度ic50分别为4.0μmol/l、3.64μmol/l、6.67μmol/l。根皮素的体系终浓度ic50分别为10.0μmol/l、4.54μmol/l、12.50μmol/l。水飞蓟宾的体系终浓度ic50分别为125.0μmol/l、7.10μmol/l、104.16μmol/l。研究表明,根皮素异烟酰基腙、槲皮素和根皮素可以减少aaph诱导的超螺旋pbr322质粒dna破坏程度,而且呈现明显的剂量效应。抑制活性的排列顺序为根皮素异烟酰基腙>槲皮素>根皮素。总之,研究结果表明,就采用的抗氧化模型而言,根皮素和根皮素异烟酰基腙均具有良好的抗氧化活性,其中根皮素异烟酰基腙活性优于根皮素,甚至优于阳性对照物槲皮素。第叁章:研究了根皮素和根皮素异烟酰基腙抑制酪氨酸酶活性。以l-dopa为底物测定槲皮素、根皮素、根皮素异烟酰基腙抑制酪氨酸酶二酚酶活性的ic50值,抑制的类型,并测定相应的抑制常数kI和kIS。试验结果显示,槲皮素、根皮素、根皮素异烟酰基腙抑制酪氨酸酶二酚酶活力的ic50值分别为25μmol/l,37.5μmol/l和50μmol/L(n=5,P<0.05)。活性顺序为槲皮素>根皮素>根皮素异烟酰基腙。根皮素和根皮素异烟酰基腙对酶活力的抑制作用表现为可逆抑制作用,而且为混合型可逆抑制,根皮素KI为23.5μmol/L,KIS为129.0μmol/L,根皮素异烟酰基腙KI为57.5μmol/L,KIS为187.1μmol/L。研究结果表明,根皮素和根皮素异烟酰基腙具有很好的抑制酪氨酸酶二酚酶活性,是混合型可逆抑制,而且根皮素活性优于根皮素异烟酰基腙。第四章:研究了槲皮素、根皮素和根皮素异烟酰基腙对小鼠急性肝损伤的保护作用。本试验分别采用D-氨基半乳糖、硫代乙酰胺和对乙酰氨基苯酚造模,诱导小鼠急性肝损伤,再研究槲皮素、根皮素和根皮素异烟酰基腙对小鼠急性肝损伤的保护作用,通过血清学(ALT、AST、γ-GT、ALP和血清总胆红素)、组织学方法,研究药物对肝脏的生化反应和组织病理变化的影响。试验结果表明,药物处理组小鼠血清ALT、AST、γ-GT、ALP和血清总胆红素明显降低(P<0.05),而且降低幅度呈现剂量依赖性。活性顺序为根皮素异烟酰基腙>槲皮素>根皮素。预处理了根皮素、槲皮素和根皮素异烟酰基腙的小鼠肝组织病理学病变,得到了明显改善。研究结果表明,槲皮素、根皮素和根皮素异烟酰基腙对小鼠急性肝损伤有显着的保护作用,而且根皮素异烟酰基腙活性明显优于根皮素,甚至优于阳性对照物槲皮素。第五章:探索了根皮素和根皮素异烟酰基腙诱导人肝癌细胞凋亡的分子机理。本研究通过MTT法、流式细胞仪测定法、凝胶电泳法、蛋白印迹杂交和实时荧光定量PCR法,探索根皮素和根皮素异烟酰基腙诱导人肝癌细胞凋亡的分子机制。总结机理,主要包括:抑制细胞增殖;作用于细胞周期的G0/G1期,阻滞细胞增殖,并促进细胞凋亡;降解基因组DNA;减少hTERT、p53和Bcl-2蛋白的表达量,增加Bax蛋白的表达量,减少hTERT基因的mRNA的表达量。结果表明,根皮素和根皮素异烟酰基腙对BEL-7402细胞能产生细胞毒性和诱导细胞凋亡。参与BEL-7402细胞凋亡的途径,包括内在和外在的凋亡途径,即p53的信号通路,Bcl-2家族线粒体信号通路和由hTERT控制的端粒稳定性。实验结果揭示了根皮素和根皮素异烟酰基腙诱导人肝癌细胞凋亡的部分分子机制,为根皮素和根皮素异烟酰基腙用作人类肝癌预防和化疗药物,奠定了实验基础。(本文来源于《南昌大学》期刊2015-12-01）
邱媛媛,王伟恒,胡江峰,沈思,朱梁[9]（2015）在《年龄因素对急性酒精性肝损伤和肝细胞凋亡的影响》一文中研究指出目的:研究年龄因素对急性酒精性肝损伤和肝细胞凋亡的影响.方法:月龄为1、6、18 mo的SD大鼠每组各15只,随机分成实验组(n=10)和对照组(n=5),实验组每只大鼠以15 g/kg 400 mL/L乙醇一次性灌胃,对照组以等比例生理盐水一次性灌胃.灌胃48 h后取大鼠血液和肝脏组织分别行肝功能和ELISA检测肝脏炎症因子表达及TUNEL检测肝细胞凋亡情况.并进一步研究酒精刺激后肝细胞中Bcl-2、Bax、Caspase3等在凋亡通路中的表达情况,研究年龄因素对急性酒精性肝损伤和肝细胞凋亡的影响及可能机制.结果:对照组内,不同年龄组间肝功能、炎症指标无明显差异,月龄为1mo和6mo组肝细胞凋亡率无明显差异,18mo组高于其他两组.实验组内不同年龄组的肝功能、炎症因子表达和肝细胞凋亡率均显着高于对照组.且不同年龄组间不尽相同:实验组6mo的炎症因子表达高于其他组.而实验组内月龄为1mo的大鼠细胞凋亡率最高,6 mo次之,18mo较低.进一步研究显示Bcl-2、Bax、Caspase3在不同年龄实验组中表达不同,但同凋亡结果相一致.结论:生理状态下,肝功能、炎症因子与年龄大多无显着相关性,肝细胞凋亡率在老年时有所增加.急性过量饮酒可引起肝脏损伤和凋亡,且损伤程度和凋亡与年龄呈相关性:月龄为6 mo组肝脏损伤较重,而1mo组凋亡率更高.这可能与不同年龄大鼠在酒精刺激下肝脏炎症细胞的激活量及肝细胞凋亡通路的激活不同有关.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2015年32期）
李琰[10]（2015）在《渥曼青霉素对LPS/D-GalN诱导急性肝损伤中肝组织坏死、凋亡及自噬的影响》一文中研究指出目的众所周知,肠道是大体最大的“储菌所”,在人体肠道内寄生着500-1000种共计100万亿个细菌(这些细菌影响着人的消化能力和免疫功能,对人体的健康非常重要)。其中的革兰氏阴性菌死亡的时候会释放内毒素,因此肠道也是人体最大的“内毒素库”。由肠源性内毒素引发的急性肝损伤是临床上导致肝脏功能衰竭的常见原因之一。LPS作为内毒素的主要成分,通过腹腔注射到小鼠体内,能够很好的模拟肠源性内毒素发生感染的过程,而D-GalN能够特异性的消耗肝脏内的UTP,从而抑制相应的核酸、蛋白质等物质的合成,最终导致肝细胞的损伤甚至死亡。LPS与D-GalN的联合注射能够特异性的造成肝脏的暴发性衰竭,是研究急性肝损伤的很好的动物模型。自噬是一种在所有真核细胞中都稳定存在的,以一种双分子膜包裹着细胞质成分成为自噬体,随后这些结构和溶酶体融合,递送的“货物”被降解和回收的过程,是对发育、分化、生存以及稳态起重要作用的胞内途径。在过去的十多年中,其在人类疾病中的作用被广泛关注。最近数据表明自噬参与多种肝脏疾病的发生。然而关于自噬在急性肝损伤中的作用的报道却很少而且结果也不一致。渥曼青霉素是一种自绳状青霉中分离出来的抗真菌类抗生素,它没有抗细菌能力,只特异性地作用于真菌。很多文献报道渥曼青霉素能够在体内外抑制自噬。本课题的目的是拟探讨LPS/D-GalN诱导急性肝损伤中肝组织坏死、凋亡及自噬的改变及采用渥曼青霉素预处理对LPS/D-GalN诱导急性肝损伤中肝组织坏死、凋亡及自噬的影响。通过本研究的完成,不仅可以进一步阐明LPS/D-GalN诱导小鼠发生急性肝损伤的分子机制,还可以为开发临床上治疗肠源性内毒素引发的急性肝损伤的药物提供借鉴价值。方法一、脂多糖/D半乳糖胺诱导小鼠的急性肝损伤情况利用脂多糖/D-半乳糖胺腹腔注射到野生型C57BL/6小鼠体内,建立小鼠的急性肝损伤内毒素诱导模型,在诱导3小时以及5小时后处死小鼠,收集血清、肝组织进行后续指标的测定。1.利用医用全自动生化分析仪器对各小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)的水平进行检测。2.采用苏木素伊红(HE)染色方法对肝组织切片进行病理学检测,并利用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定(TUNEL)检测肝组织的凋亡情况。3.采用免疫组织化学染色(immunohistochemistry, IHC)和免疫蛋白印迹(western blot)方法检测肝组织中caspase-3的活化水平。二、脂多糖/D半乳糖胺诱导急性肝损伤过程中肝组织自噬水平的变化1.采用免疫蛋白印迹方法检测肝脏自噬标志物LC3B-II的表达水平变化。2.采用免疫组织荧光染色方法检测肝脏中自噬小体形成的变化情况。叁、脂多糖/D-半乳糖胺诱导急性肝损伤过程中炎性细胞因子的分泌情况1.利用BD公司开发的基于流式细胞仪的液相蛋白定量技术(BDTMCytometric Bead Array (CBA) System)对血清中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-10等炎性细胞因子的含量进行检测,另采用酶联免疫吸附方法对血清中IL-1p的含量进行检测。2.采用RT-PCR方法对肝脏组织中以上各种炎性细胞因子(Tnfa、Mcp1、I11β、 I16、I110)的mRNA表达水平进行检测。四、渥曼青霉素预处理对小鼠急性肝损伤以及肝组织中炎性细胞因子分泌的影响在注射脂多糖/D-半乳糖胺前1小时,将渥曼青霉素以同样的方式注射到小鼠体内,然后再注射脂多糖/D-半乳糖胺诱导肝损伤,然后在诱导5小时后,处死小鼠,收集血清、肝组织再进行后续相关指标的测定。1.测定小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量,统计分析渥曼青霉素对小鼠肝脏功能的影响。2.苏木素伊红染色检测肝脏组织的病理学损伤,并同样进行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定,来探究渥曼青霉素对肝细胞坏死和凋亡的影响。3.免疫组织化学染色和免疫蛋白印迹检测分析肝组织中caspase-3活化水平受渥曼青霉素的影响。4. RT-PCR检测肝脏中以上各种炎性细胞因子的mRNA水平变化,以明确渥曼青霉素对肝组织中炎性细胞因子分泌的影响。五、渥曼青霉素预处理对肝组织自噬水平的影响1.免疫蛋白印迹检测自噬标志物LC3B-Ⅱ的表达变化,以探究渥曼青霉素对肝脏中自噬水平的影响。2.免疫组织荧光染色检测分析渥曼青霉素对肝脏中自噬小体形成的影响。六、渥曼青霉素预处理对肝组织中MAPI及NF-κB信号通路活化的影响1.采用免疫蛋白印迹方法对肝脏内MAPK通路中ERK、JNK、p38的活化情况即磷酸化水平进行检测。2.采用免疫蛋白印迹方法对肝脏内NF-κB通路中p65的活化情况即磷酸化水平进行检测。结果一、脂多糖/D-半乳糖胺能诱导小鼠的急性肝损伤,造成肝组织的坏死和凋亡1.小鼠血清中的谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量,在被诱导肝损伤3小时后并没有变化,但在诱导5小时后明显升高。2.小鼠的肝组织,在被诱导损伤3小时后开始出现少量的炎性细胞浸润和充血,而在诱导5小时后出现大量的炎性细胞浸润并伴有严重的充血。3.肝脏内TUNEL阳性细胞,在被诱导损伤3小时后有少量出现,但在诱导5小时后明显增多；另外caspase-3在被诱导3小时后没有活化,但在诱导5小时后明显活化。二、在脂多糖/D-半乳糖胺导致小鼠急性肝损伤过程中肝组织中的自噬水平升高1.小鼠肝脏内LC3B-Ⅱ的表达在被诱导损伤3小时后没有变化,但在诱导5小时后明显升高。2.肝脏内自噬小体在被诱导损伤3小时后就已经开始形成,在诱导5小时后,形成明显增多。叁、在脂多糖/D-半乳糖胺诱导的小鼠急性肝损伤中炎性细胞因子分泌增加1.小鼠血清中TNF-α、MCP-1、IL-6、IL-10等炎性细胞因子的水平在被诱导肝损伤3小时以及5小时后均明显升高。2.小鼠肝脏中Tnfa、Mcp1、I11β、I116、110等炎性细胞因子的mRNA表达水平在被诱导损伤3小时以及5小时后也均明显增加。四、渥曼青霉素预处理能够减轻脂多糖/D-半乳糖胺诱导的小鼠急性肝损伤过程中肝脏的损伤程度,抑制炎性细胞因子的分泌1.相比于渥曼青霉素未处理组,渥曼青霉素预处理组小鼠的血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量明显降低。2.相比于渥曼青霉素未处理组,渥曼青霉素预处理组小鼠肝脏内充血和炎性细胞浸润明显减少,病理学损伤明显改善。3.相比于渥曼青霉素未处理组,渥曼青霉素预处理组小鼠肝脏内凋亡细胞数量明显减少,caspase-3的活化水平明显降低。4.相比于渥曼青霉素未处理组,渥曼青霉素预处理组小鼠肝脏内除Mcp 1之外的Tnfa、I11β、I16、I110等炎性细胞因子的mRNA的水平明显降低。五、渥曼青霉素预处理能够抑制脂多糖/D-半乳糖胺诱导的小鼠急性肝损伤过程中肝组织自噬水平的升高1.相比于渥曼青霉素未处理组,渥曼青霉素预处理组小鼠肝组织中自噬水平的升高明显被抑制,回归未诱导肝损伤之前的本底水平。2.相比于渥曼青霉素未处理组,渥曼青霉素预处理组小鼠肝组织中自噬小体的形成也明显减少。六、预注射渥曼青霉素能够抑制脂多糖/D-半乳糖胺诱导的小鼠急性肝损伤过程中肝组织内MAPK和NF-κB通路的活化1.相比于未预注射渥曼青霉素组,预注射渥曼青霉素组小鼠肝组织内pJNK、p38活化水平没有变化,但pERK活化水平受到抑制。2.相比于未预注射渥曼青霉素组,预注射渥曼青霉素组小鼠肝组织内p65的活化水平受到抑制。结论及意义以上实验结果说明在脂多糖/D-半乳糖胺诱导的小鼠急性肝损伤过程中,脂多糖/D-半乳糖胺不仅能通过诱导Tnfa等炎性细胞因子的分泌导致肝组织的坏死和凋亡,还能导致自噬水平的升高。然而,渥曼青霉素预处理可抑制自噬,与此同时,渥曼青霉素还能降低炎性细胞因子的水平,减轻肝组织的坏死和凋亡,并最终减轻肝脏的损伤程度。但因为渥漫青霉素并非自噬的特异性抑制剂,我们并不能确定是否是由于渥曼青霉素抑制了自噬从而使得肝组织坏死、凋亡以及肝损伤减轻的。我们的研究结果首次发现了渥曼青霉素能够在体内有效的减轻脂多糖/D-半乳糖胺诱导的小鼠的急性肝损伤,这为临床上研发治疗肠源性内毒素诱导的急性肝损伤的药物提供了重要的借鉴意义；另外我们还发现自噬在该过程中有可能起着重要的作用,这对进一步探究肠源性内毒素诱导的急性肝损伤的发病机理、探寻新的治疗方法均具有重要的理论意义和潜在的应用意义。(本文来源于《山东大学》期刊2015-05-12）
急性凋亡性肝损伤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:评估血浆输注对脂多糖半乳糖诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。创新点:在小鼠急性肝损伤模型中证明血浆输注对肝损伤的保护作用,且此作用与p53介导的肝细胞凋亡相关。方法:将40只清洁型ICR雄性小鼠随机分为4组(n=10每组):(1)对照组;(2)血浆(plamsa)组。收集血清和肝组织样本,用天门冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒检测血清中AST和ALT水平;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝组织中白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化;肝组织进行苏木精-伊红染色法(HE)和网状纤维染色,显微镜下观察肝组织病理学变化;用免疫印迹法(WB)检测凋亡相关蛋白的变化。在腹腔注射后32小时内对小鼠进行存活分结论:能够显着诱导小鼠的急性肝损伤,包括增加血清中AST和ALT水平;中心小叶坏死和炎性细胞的组织病理学变化和炎症上(TNF-α和IL-6)。当血浆输注后,这些变化被缓解。结果显示,血浆输注显着降低小鼠死亡率,降低AST、ALT和炎症因子如TNF-α和IL-6的水平。Cleaved Caspase-3、BAX和p53的表达下调,Bcl-2上调,表明血浆可以减少诱导的细胞凋亡。血浆输注对诱导的急性肝损伤的保护机制与通过p53诱导的凋亡途径和炎症因子减少相关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
急性凋亡性肝损伤论文参考文献
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