导读:本文包含了细胞系模型论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:共培养模型,微核试验,人源性代谢酶系统
细胞系模型论文文献综述
蔡文建,张意,陈宵,李忠生,肖经纬[1]（2019）在《以微核试验为基础的体外细胞系共培养模型的构建》一文中研究指出目的考虑到动物种属的差异性,作为致癌性评估的筛选试验,国内外的致突变实验研究体系正在从细菌和动物体细胞、生殖细胞向人源性细胞过渡。作为体系的重要组成部分,代谢活化系统构建的特异性和可行性就成为研究的关键,为了满足体内复杂环境的真实代谢条件,本研究旨在构建人源性肝细胞系和肠细胞系共培养模型,并在此基础上进行微核试验,以探索所构建的肝肠细胞共培养体系在致突变研究中的应用。材料和方法选择肝细胞系HepG2细胞和肠细胞系Caco-2细胞建立共培养模。将Caco-2细胞接种在Transwell上层,HepG2细胞接种在六孔板底层,各自贴壁后将Transwell上层浸入六孔板中,应用MEM培养基作为共培养基。以OECD推荐的致突变实验结果评价参考化学物环磷酰胺(CP)、甲磺酸乙酯(EMS)为阳性物,CCK-8测定两种典型致突变物对HepG2细胞的半数抑制浓度。以半数抑制浓度为高剂量组,依次设置中、低剂量组和溶剂、空白对照组(CP为38、19和9.5μg·mL~(-1),EMS为1.3、0.65和0.325μg·mL~(-1))。共培养24 h后,对共培养细胞和单独培养的HepG2细胞进行染毒。24 h后共培养模型移去上层的Caco-2细胞,向下层的HepG2细胞和单独培养的HepG2细胞加入细胞松弛素B,进行胞质分裂阻滞微核试验,制片后进行盲法阅片,每个浓度组计数2000个双核细胞的微核率。结果不需要代谢活化的致突变物甲磺酸乙酯,单培养组的微核率分别为16‰、15‰、16‰,共培养组微核率分别为14‰、16‰、15‰),二者的微核率无明显差异(P>0.05)。CP共培养组微核率(21‰、18‰、16‰)明显高于单独培养组(微核率12‰、13‰、12‰),差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用HepG2细胞与Caco2细胞的共培养模型和单独培养的HepG2细胞进行微核试验的比对性研究表明,对需要代谢活化的典型致突变物,共培养模型的敏感性较单培养的HepG2细胞高,且该模型通过模拟人体内的多细胞环境和人源性代谢酶系统,可以为今后的致突变系统研究的建立提供有益的工作基础。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
李聪,张志强[2]（2019）在《胶质瘤细胞系U87裸鼠皮下与原位模型的建立与比较》一文中研究指出[目的 ]胶质母细胞瘤是颅内恶性程度最高的胶质瘤肿瘤,临床治疗是以手术为主辅以放化疗的综合治疗模式,但是患者预后仍欠佳。稳定而可靠的恶性胶质瘤动物模型是探索胶质瘤治疗途径的临床前研究的重要基础。裸鼠皮下模型或原位模型是肿瘤研究的常用动物模型,本试验通过胶质母细胞系U87分别建立裸鼠的皮下和原位模型,并初步观察这两种模型的特点。[方法 ]将裸鼠随机分为两组,收集处于对数期生长的U87细胞,皮下模型组分别取0.1ml肿瘤细(本文来源于《中国中西医结合学会神经外科专业委员会第六届学术大会暨广东省中西医结合学会神经外科专业委员会2019年学术年会及继续教育学习班论文汇编》期刊2019-08-16）
夏九成,龙廷,秦达念[3]（2019）在《NG108-15细胞系作为小鼠神经内分泌细胞模型的适合性》一文中研究指出目的探讨NG108-15细胞系作为小鼠神经内分泌细胞模型的适合性。方法培养NG108-15细胞,大鼠及小鼠的下丘脑原代,观察其7 d后细胞生长情况,利用大鼠和小鼠的多个与神经内分泌有关的基因序列设计了两组不同的引物对该细胞系的总RNA进行基因扩增分析,试图分析该细胞系在基因表达水平的差异,以确定该杂合细胞在神经内分泌相关研究中的适合性。结果 7 d后叁类细胞均有神经元的突触分化,但NG108-15细胞体积较大,成分散生长。大鼠和小鼠的原代培养细胞,则体积较小,细胞成簇生长,细胞间有明显的突触联系。荧光定量PCR显示,β-actin的扩增在两组细胞内扩增正常且无差异,说明两组细胞的起始模板量相等。但剩余的所有基因却只能在大鼠原代细胞中正常扩增,而在NG108-15细胞却扩增失败。所有基因均能在NG108-15细胞和小鼠原代细胞中进行扩增,且扩增效率无明显差异。所有来自小鼠的引物序列扩增正常,而来自大鼠的引物序列则除了内参基因β-actin扩增正常外,其他均扩增失败或扩增效率低下。结论在神经内分泌失调的研究中,该杂交瘤细胞更适合与小鼠动物的研究结果相对应。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2019年11期）
刘歌[4]（2019）在《基于人单核细胞系U937的抗流感药物筛选模型的建立及其应用》一文中研究指出严重的流感感染每年在全球范围导致290,000至650,000人死亡。这些死亡病例通常与流感诱导的过度炎症以及病理损伤高度相关。单纯的抗病毒治疗策略,只能在感染早期取得一定疗效,并不能缓解感染中后期由病毒诱导的炎性损伤。目前已有文献报道,在动物模型中单独使用免疫调理药物或者与抗病毒剂联合治疗能够有效控制由流感引发的炎性病理损伤。因此,开发具有抗炎症等免疫调理活性的新型抗流感药物是对现有流感治疗策略的有力补充。然而,在抗流感免疫治疗领域,由于流感引发炎症的病理机制非常复杂,尚未被完全揭示,相关药物研发进展缓慢,这也导致目前还未有能够通过临床试验、确认具有治疗效果的抗流感免疫调理药物面世。鉴于上述情况,目前迫切需要找到合适的筛选靶标并建立有效的筛选模型来发现更多具有潜在临床应用价值的抗流感免疫调理药物。因此,本研究的主要目的就是建立一个基于细胞的高通量抗流感药物筛选模型,以便达到既能筛选抗病毒药物又能筛选免疫调理药物的目的。本文的第一章是绪论部分,首先简要地介绍了流感病毒的结构种类、复制周期以及流感相关免疫信号通路等研究背景。随后,综述了流感引发的细胞因子风暴以及其中一些重要促炎因子的研究现状,最后回顾了当前针对流感的治疗策略和代表性药物。本文第二章的主要内容是建立一个基于人源单核细胞系U937的高通量抗流感药物筛选模型。我们筛选了7种与流感肺炎病理相关的人源细胞系,从中选择了支持病毒复制和促炎因子表达、且重要促炎细胞因子信噪比最高的人源单核细胞系U937来建立感染模型。通过测试一组具有已知抗病毒或免疫调节活性的化合物,证明了U937模型可以筛选针对流感的抗病毒药物和抗炎药物。接下来,通过优化条件,我们建立了一个基于U937细胞的高通量抗流感药物筛选模型,并验证了其高通量筛选时的表现。数据说明U937细胞模型是一个高效的抗流感药物筛选模型,可多靶标、高通量地筛选具有抗病毒或抗炎症活性的流感治疗药物。本文第叁章的主要内容是通过U937模型筛选一个FDA批准的成药库,鉴定并评价那些具有抗病毒或免疫调理活性的抗流感药物。首先,我们利用促炎因子CCL2和CXCL10作为靶标,筛选没有抗病毒活性的单纯免疫调理药物。通过初筛和复筛,我们得到了6种可同时抑制两种促炎因子的候选药物。随后,我们通过增加抗病毒指标,进一步筛选具有抗病毒活性的免疫调理药物。经过初筛和复筛,我们得到了6种可同时抑制病毒复制以及降低两种促炎因子表达的候选化合物。通过进一步的体外和体内的抗流感活性评价,最终发现安非他酮可有效保护致死剂量H1N1 PR8病毒感染的小鼠、减少体重下降程度、提高存活率。通过检测小鼠肺部病毒滴度和炎症病理变化,我们发现安非他酮不但可以降低肺部病毒的滴度,还能够抑制重要促炎因子的表达,并改善流感病毒感染导致的肺部炎症病理损伤。本文第四章的主要内容是使用U937细胞模型,筛选了宿主因子神经递质受体为靶标的小分子药物的抗病毒活性。通过筛选一个包含8种主要神经递质受体相关拮抗剂和激动剂的药物库,我们发现一些与肾上腺素能受体、组胺受体、多巴胺受体和五羟色胺受体相关的化合物更多被发现具有抗流感病毒活性,表明上述四种受体可能在流感感染中发挥了重要作用。同时,我们以流感神经氨酸酶活性来代表病毒复制水平,用于筛选具有抑制活性的抗病毒药物。我们发现了22种IC_(50)在20μM以下的抗病毒化合物,并对其中具有代表性的4种候选药物进行了体外和体内的抗病毒药效评价和初步机制研究。结果表明,这4种药物可在多细胞系上剂量依赖地抑制H1N1流感病毒,同时,还可有效抑制包括奥司他韦耐药株H1N1 H274Y、季节性流感毒株H3N2和IBV在内的叁种不同流感毒株。初步机制研究发现,这些药物主要作用于病毒复制的早期阶段,在病毒RNP入核前发挥其抗病毒作用。在体内研究中,我们发现β2肾上腺素受体激动剂异克舒令,可以有效保护致死性流感感染小鼠,其保护作用主要通过降低感染小鼠肺部病毒滴度来实现。综上所述,以流感神经氨酸酶水平作为抗病毒筛选指标,以促炎因子CCL2和CXCL10水平作为抗炎药物筛选指标,U937高通量细胞筛选模型可以用于高效筛选在体内外针对流感的具有抗病毒或抗炎活性的化合物。这一模型不但可以填补现有细胞模型不能用于流感抗炎症药物筛选以及动物模型不适合高通量筛选流感抗炎症药物的不足,还能为深入了解流感病理机制以及新型抗流感药物的研发提供强有力的支持。(本文来源于《中国科学院大学(中国科学院武汉病毒研究所)》期刊2019-06-01）
王雪飞[5]（2019）在《探索CuS-MnS_2纳米花对卵巢癌A2780细胞系及其动物模型的诊疗作用及机制》一文中研究指出研究背景:卵巢癌早期诊断率低、病死率高,严重危害女性健康,手术和化疗不能有效改善预后。随着纳米技术发展,近年来出现诊疗一体化概念,即利用纳米材料的成像功能辅助诊断、监测和指导治疗过程,利用其光热转换效能、联合近红外激光(NIR)照射,进行靶向性、可控、可视的光热治疗。目前具备诊疗一体化功能的纳米材料在妇产科领域报道较少,且诊疗一体化纳米材料还存在着诸多缺陷,亟需开发新的性能更优、集多种治疗效应于一体的诊疗剂。本研究旨在探索新型、高效的纳米材料对卵巢癌细胞及卵巢癌荷瘤小鼠的诊疗作用及机制,为卵巢癌临床诊疗提供新思路。研究目的:1.制备CuS-MnS2纳米花并进行表征验证;2.评估CuS-MnS2纳米花生物相容性:3.评估CuS-MnS2体内外MRI成像效果;4.评估CuS-MnS2+NIR对卵巢癌细胞及卵巢癌动物模型的光治疗效果;5.探索CuS-MnS2+NIR杀伤卵巢癌细胞的分子机制;研究方法:1.通过水热法制备CuS-MnS2纳米花,用X射线衍射仪观察其晶体结构,以透射电镜、扫描电镜、能谱仪观察其形态和尺寸、元素分布,利用分光光度计检测该纳米花的紫外-可见-近红外吸收光谱。采用808 nm近红外激光照射CuS-MnS2溶液,以IR热成像仪、热电偶温度计记录溶液热图像、加热曲线,评估其光热性能。2.以部分人正常细胞系和人肿瘤细胞系分别加入CuS-MnS2共培养,通过CCK-8试剂盒检测细胞存活率。以人红细胞悬液加入CuS-MnS2共孵育,根据溶血程度判断材料的红细胞毒性;3.将CuS-MnS2配制成不同浓度的琼脂糖溶液,在MRI成像仪检测其信号;对小鼠皮下接种卵巢癌细胞、制作卵巢癌模型后,在移植瘤内分别注射CuS-MnS2和PBS,行MRI成像并进行对比;4.将人卵巢癌细胞预培养后加入CuS-MnS2,随后NIR照射,评估细胞光热、光动力治疗效果。另制作小鼠卵巢癌模型,分别瘤内注射CuS-MnS2和PBS后,以NIR照射瘤体、检测升温幅度。取肿瘤组织行H&E染色,评估肿瘤细胞坏死情况;5.对人卵巢癌细胞行CuS-MnS2+NIR处理后,通过WB实验分别检测凋亡通路、抗凋亡通路及坏死通路相关蛋白表达水平。研究结果:1.我们制备的材料是CuS-MnS2纳米花,在近红外光区域有较强吸收,光热转换效率(η)高达67.5%,且光热稳定性良好,并具备细胞外光动力效应;2.当加入浓度高于0.5mg/mL的CuS-MnS2后培养,人卵巢癌细胞、人大细胞肺癌细胞存活率出现明显下降,而CuS-MnS2浓度上升至1.0 mg/mL时,人正常肝细胞、人非小细胞肺癌细胞存活率仍高于93%。不同浓度CuS-MnS2与红细胞悬液共孵育,低浓度下引起轻度溶血,浓度上升后反而溶血不明显。3.CuS-MnS2具有T1加权的MRI成像功能,信号强度与浓度成正比。卵巢癌荷瘤小鼠瘤体注射CuS-MnS2后,瘤体表现T1W1高信号。4.CuS-MnS2溶液浓度达0.5 mg/mL以上时,联合激光照射可导致明显的A2780细胞死亡,并有产胞内ROS效应。荷瘤小鼠实验中,CuS-MnS2+NIR可使瘤体温度迅速升高至55℃以上,而PBS+NIR小鼠瘤体温度只能达到约38℃。H&E染色后可见CuS-MnS2+NIR组小鼠的瘤体结构不完整,出现大片缺失、红染、明显细胞损伤;5.WB实验检测CuS-MnS2+NIR处理的细胞中凋亡通路相关蛋白表达下调,抗凋亡通路相关蛋白表达上调,坏死通路相关蛋白上调。结论:1.CuS-MnS2纳米花光热转换效率高、光热稳定性好,并存在光动力效应。2.CuS-MnS2对人正常细胞毒性低,对部分肿瘤细胞毒性相对较高。3.CuS-MnS2拥有T1加权MRI成像效果,信号强度呈浓度依赖性。4.CuS-MnS2对卵巢癌细胞同时具备光热治疗和光动力治疗效果,对卵巢癌皮下移植瘤小鼠在体肿瘤的光热治疗效果良好。5.CuS-MnS2+NIR抑制卵巢癌细胞的主要机制是激活细胞程序性坏死。(本文来源于《南方医科大学》期刊2019-05-24）
李俊儒,张凡,曹峰林,孙国勋[6]（2019）在《白血病细胞系K562分化模型的建立及不同分化时解偶联蛋白2表达的变化》一文中研究指出解偶联蛋白2(uncoupling protein2,UCP2)属于解偶联蛋白家族成员,参与机体的多种病理生理过程。白血病特征之一是细胞分化受阻,机制不清。应用氯化血红素(hemin)诱导白血病细胞系K562,联苯胺(Benzide)染色表明,细胞向红系分化;应用佛波酯(PMA)诱导白血病细胞系K562,CD41、CD51和CD61mRNA表达明显增高,表明细胞向巨核系分化。应用RT-Q-PCR及Westernblot检测,K562向红系分化时UCP2表达增高,向巨核系分化时UCP2表达降低,提示UCP2可能在白血病细胞分化过程中发挥作用。(本文来源于《中国优生与遗传杂志》期刊2019年03期）
吴相枝[7]（2019）在《新型人源永生化小胶质细胞系HM-SV40体外炎症反应模型的建立及优化研究》一文中研究指出随着我国逐渐步入老龄化社会,一系列老年病(如脑梗塞、脑出血、阿尔茨海默病、帕金森病等)的发病率逐年升高,患者人群也逐渐扩大。无论是脑卒中类的急性脑损伤还是阿尔茨海默病这类的慢性神经退行性疾病损伤,都与中枢神经系统炎症反应的过度(急性损伤)与持续(慢性损伤)激活密不可分。炎症反应是急慢性脑损伤病理生理学特征的重要组成部分。因此,有效调控中枢神经系统炎症反应是开发急慢性脑损伤治疗药物的重要方向。由于血脑屏障的存在,外周循环系统中的固有免疫相关细胞无法有效进入中枢神经系统。故此,胶质细胞,特别是小胶质细胞,成为了中枢神经系统炎症反应的主要参与者。多种鼠源永生化小胶质细胞系(如BV2)在过去很多年都是进行小胶质细胞炎症反应机理的重要研究工具。但近年来,本领域研究者逐渐发现,鼠源小胶质细胞与人小胶质细胞在基因表达谱、炎症反应强度、刺激因子选择性等方面存在显着差异。基于鼠源小胶质细胞的研究亦很难为转化医学产生有价值的候选药物分子。同时,由于人原代胶质细胞的获取困难、干细胞分化小胶质细胞的成本高企,鼠原代小胶质细胞与人源小胶质细胞逐渐变为本领域研究的首选工具。但当前研究方法仍较为粗放,人源小胶质细胞系研究较少,鼠原代小胶质细胞的培养技术已十几年未有更新,难以有效模拟体内状态。鉴于此,本项目的主要研究目的是:1)针对加拿大Abm Goods公司近期推出的新型人永生化小胶质细胞系HM-SV40建立并优化体外培养与炎症反应模型技术;2)将最新细胞培养技术、材料以及最新的多因子检测技术用于优化鼠原代小胶质细胞培养与炎症模型技术。第一部分,建立并优化了新型人源永生化小胶质细胞系HM-SV40的体外炎症模型。首先通过对HM-SV40细胞进行qPCR检测,确定其小胶质细胞特异性生物标记物(如TREM2)的表达;同时,表征结果也显示HM-SV40细胞表达小胶质细胞炎症反应相关的调控(LDLR)与激活(TLR)家族基因。为了建立该细胞系的炎症模型,我们首先采用经典的刺激分子(LPS、Poly(I:C)、PHA)对HM-SV40进行处理,qPCR和ELISA检测结果显示,上述经典的炎症刺激分子均不能成功激活该细胞。而后,我们对HM-SV40的激活条件进行了大量的摸索及优化,通过将鼠小胶质细胞与巨噬细胞炎症反应状态的条件培养基加入到HM-SV40的培养体系中,成功实现了对HM-SV40细胞的激活。借助诸如Luminex多因子液相芯片分析等手段,我们从上述条件培养基中逐渐缩小搜索范围,最终确定了TNF-α与IFN-γ可激活HM-SV40细胞,并从蛋白水平(多因子液相芯片分析)与基因转录组水平(RNA-sequencing)对HM-SV40细胞体外炎症模型进行了全面验证与表征。本部分研究为人源小胶质细胞炎症反应的建立,提供了一个新的思路。第二部分,我们分别采用震摇法和磁珠分选法获得大小鼠原代小胶质细胞,并成功建立炎症模型。经验证,而ApoE拟肽COG1410可显着抑制LPS的作用。进一步地,我们针对原代混合胶质细胞普遍存在的批间稳定性差等问题,对培养基成分、培养环境表面材料等因素进行了系统性优化。结果显示,生长于新的Matrigel材料包被的细胞培养板上的鼠原代胶质细胞,相较于传统方法培养的细胞更大程度的模拟了体内胶质细胞炎症反应的行为,并验证了小胶质细胞-星形胶质细胞间存在显着的协同作用。本部分研究为鼠原代胶质细胞培养与炎症模型研究提供了一套新的更优化的技术方法。第叁部分,以经典鼠源永生化小胶质细胞系BV-2炎症模型对目前在美国处于临床二期试验的载脂蛋白E(apoE)模拟多肽CN-105进行了初步研究。研究表明CN-105并不能抑制BV2细胞的炎症反应。第四部分,通过表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR),测定多种ApoE模拟多肽与LDLR相关受体1(LRP1)的配体结合区(LRP1-CR)的体外结合情况。结果显示,ApoE蛋白、模拟多肽COG1410均可与LRP1结合,但未检测到CN-105与任何LRP1-CR的结合信号。综上所述,本文所述研究主要对新型人源永生化小胶质细胞系HM-SV40与鼠原代胶质细胞的培养与炎症模型技术进行系统性开发与优化,为未来的神经系统体外炎症模型研究提供了一些新的指引。同时通过对ApoE模拟多肽CN-105的细胞学与生物物理学初步研究,对原ApoE模拟多肽假设提出了质疑。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2019-03-08）
刘晓彤,黄悦,刘旭丹,徐小磊,姜梦琪[8]（2018）在《应用原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果评价》一文中研究指出目的通过比较白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理对原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力、炎症因子与炎症通路表达水平变化的影响,为骨关节炎体外研究用细胞提供多重选择。方法免疫细胞化学法与甲苯胺蓝染色分别检测细胞中Ⅱ型胶原与蛋白多糖,鉴定所培养的原代细胞是否为软骨细胞。CCK-8法检测IL-1β(10ng/ml)处理24h、48h、72h对原代软骨细胞增殖活力的影响,IL-1β(1、10、20、40ng/ml)处理24h对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力的影响。IL-1β(10ng/ml)分别处理原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系细胞24h后,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)与基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达水平。Real-time PCR法检测核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA表达水平。结果所培养的原代细胞为原代软骨细胞。IL-1β(10ng/ml)处理可显着抑制原代软骨细胞增殖活力,但IL-1β(1、10、20、40 ng/ml)处理对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力无明显影响。IL-1β(10ng/ml)处理可使IL-6、MMP-13表达水平及NF-κB mRNA的表达量均显着增加。结论IL-1β作用下原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系均可表现出骨关节炎样炎症反应,二者均可用于骨关节炎的体外实验研究。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2018年05期）
胡皓,王敏,吴开春[9]（2018）在《人胃癌双标细胞系及鼠原位模型的高效构建》一文中研究指出目的建立一种高效胃癌原位模型。方法采用慢病毒感染方法构建稳定表达荧光素酶及GFP的双标细胞系SGC-7901/FLUC/GFP。将细胞悬液注射入造模小鼠胃浆膜下层,建模后第3天通过生物发光成像观测建模情况。2周后处死小鼠,通过HE及冰冻切片观察移植瘤形态。结果 SGC-7901/FLUC/GFP双标细胞系构建成功,该稳定转染细胞系高表达荧光素酶及GFP,细胞数目与荧光及生物发光信号呈线性正相关(R2=0.9667,r2=0.9110),可用于肿瘤在体观测。手术后第3天通过生物发光实验证实模型构建成功,肿瘤位于胃区生长。2周后通过HE及冰冻切片可见异型肿瘤细胞生长,符合胃癌组织学特征。结论成功建立了简便、安全、高效的大规模胃癌原位模型,该方法便于普及,可为胃癌研究提供宝贵的研究平台和实验工具。(本文来源于《胃肠病学和肝病学杂志》期刊2018年08期）
刘晓彤,黄悦,刘旭丹,刘莉[10]（2018）在《原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果比较》一文中研究指出目的通过比较白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)处理对原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力、炎症因子与炎症通路表达水平变化的影响,为骨关节炎体外研究用细胞提供多重选择。方法免疫细胞化学法与甲苯胺蓝染色分别检测细胞中Ⅱ型胶原与蛋白多糖,鉴定所培养的原代细胞是否为软骨细胞;CCK8法检测IL-1β(10 ng/mL)处理24 h、48h、72 h后对原代软骨细胞增殖活力的影响,IL-1β(1、10、20、40 ng/mL)处理24 h对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力的影响;使用IL-1β(10ng/mL)分别处理原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系细胞24 h,ELISA法检测细胞培养上清中白细胞介素6(Interleukin-6,IL-6)与基质金属蛋白酶-13(Matrix metalloproteinase-13,MMP-13)的表达水平;Real-time PCR法检测核因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)mRNA的表达水平。结果结果显示所培养的原代细胞为原代软骨细胞;IL-1β(10 ng/mL)处理可显着抑制原代软骨细胞增殖活力(P<0.05),但IL-1β(1、10、20、40 ng/mL)处理对SW1353软骨肉瘤细胞系增殖活力无明显影响(P>0.05);IL-1β(10 ng/mL)处理可使细胞培养上清中IL-6与MMP-13表达水平及NF-κB mRNA的表达量均显着增加(P<0.05)。结论 IL-1β作用下原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系均可表现出OA样炎症反应,二者均可用于OA的体外实验研究。(本文来源于《2018环境与健康学术会议--精准环境健康：跨学科合作的挑战论文汇编》期刊2018-08-13）
细胞系模型论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的 ]胶质母细胞瘤是颅内恶性程度最高的胶质瘤肿瘤,临床治疗是以手术为主辅以放化疗的综合治疗模式,但是患者预后仍欠佳。稳定而可靠的恶性胶质瘤动物模型是探索胶质瘤治疗途径的临床前研究的重要基础。裸鼠皮下模型或原位模型是肿瘤研究的常用动物模型,本试验通过胶质母细胞系U87分别建立裸鼠的皮下和原位模型,并初步观察这两种模型的特点。[方法 ]将裸鼠随机分为两组,收集处于对数期生长的U87细胞,皮下模型组分别取0.1ml肿瘤细
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞系模型论文参考文献
[1].蔡文建,张意,陈宵,李忠生,肖经纬.以微核试验为基础的体外细胞系共培养模型的构建[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
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[3].夏九成,龙廷,秦达念.NG108-15细胞系作为小鼠神经内分泌细胞模型的适合性[J].中国老年学杂志.2019
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[8].刘晓彤,黄悦,刘旭丹,徐小磊,姜梦琪.应用原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果评价[J].中国组织化学与细胞化学杂志.2018
[9].胡皓,王敏,吴开春.人胃癌双标细胞系及鼠原位模型的高效构建[J].胃肠病学和肝病学杂志.2018
[10].刘晓彤,黄悦,刘旭丹,刘莉.原代软骨细胞与SW1353软骨肉瘤细胞系建立体外骨关节炎模型的效果比较[C].2018环境与健康学术会议--精准环境健康：跨学科合作的挑战论文汇编.2018