导读:本文包含了溶酶体凋亡途径论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:急性B淋巴细胞白血病,17-DMAG,自噬-溶酶体途径,Hsc70
溶酶体凋亡途径论文文献综述
马秀娟[1]（2019）在《Hsp90抑制剂17-DMAG通过自噬-溶酶体途径诱导急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的机制研究》一文中研究指出目的:急性B淋巴细胞白血病(B acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)是儿童最常见的血液恶性肿瘤。目前的治疗方式以传统化疗为主,但由于化疗药物具有严重的毒副反应以及化疗耐药的出现,靶向治疗现已经成为B-ALL治疗的研究热点。在我们对B-ALL患儿差异蛋白组学的前期研究中,发现高危组患儿中热休克蛋白90(Heat shock protein 90,Hsp90)的表达明显高于低危组,有研究报道Hsp90在急性白血病中的高度表达与病情进展及预后密切相关。Hsp90抑制剂因其对肿瘤细胞具有高度的选择特异性而成为肿瘤治疗的研究热点。17-DMAG(Alvespimycin)为一种亲溶酶体的Hsp90抑制剂,在成人晚期实体瘤、淋巴瘤、急性髓细胞白血病和慢性淋巴细胞白血病中已经进入临床I期试验,但在B-ALL的治疗研究中少有报道,其作用机理也尚不明确,故而我们选用17-DMAG作为B-ALL治疗的候选药物进行研究。随着对白血病发病机制的深入研究,调节自噬-溶酶体降解途径的进程成为当前白血病治疗研究的一个突破点。在本论文的研究中,我们选用Hsp90抑制剂17-DMAG,探讨其对B-ALL细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨17-DMAG通过调节自噬-溶酶体降解系统诱导细胞凋亡的潜在机制。研究方法:1、细胞增殖检测(MTS):B-ALL体外细胞株Nalm6和Reh在不同浓度的17-DMAG(0.01,0.1,1,10,100μM)处理24h、48h、72h后,采用MTS法检测细胞的增殖情况。2、细胞凋亡检测:不同浓度的17-DMAG(1μM、10μM)处理白血病细胞后,应用流式细胞术分析细胞的凋亡情况(Annexin V-FITC/PI双染法)。3、自噬水平检测:B-ALL细胞株Nalm6和Reh经17-DMAG(1μM)处理后,检测细胞巨自噬水平及分子伴侣介导的自噬(CMA)水平。蛋白免疫印迹法检测巨自噬标志物LC3B II及P62的表达量变化,同时检测分子伴侣介导自噬的伴侣分子Hsc70与受体Lamp2a的表达水平。活细胞自噬体染色检测细胞自噬体的数量。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)分析Hsc70及Lamp2a的mRNA表达水平。4、溶酶体数量及功能检测:17-DMAG(1μM)处理B-ALL Nalm6和Reh细胞(2h、12h、24h)后进行溶酶体染色(Lyso-Brite),荧光显微镜下观察17-DMAG对细胞溶酶体数量的影响。蛋白免疫印迹法检测17-DMAG处理细胞后溶酶体内酸性水解酶cathepsin D的蛋白表达水平。5、细胞转染:在Nalm6与Reh细胞中,通过对siRNA敲减Hsc70表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及共聚焦显微镜显像分析Hsc70与溶酶体酸性水解酶cathepsin D基因和蛋白的表达量变化。蛋白免疫印迹法检测泛素-蛋白酶体降解进程阻断后,17-DMAG对细胞溶酶体酸性水解酶cathepsin D蛋白表达的影响。结果:1、17-DMAG抑制白血病细胞增殖:17-DMAG以时间剂量依赖性的方式抑制B-ALL细胞株Nalm6和Reh细胞的增殖。2、17-DMAG诱导白血病细胞凋亡:17-DMAG诱导Nalm6和Reh细胞凋亡,凋亡率与药物剂量呈正相关(P<0.01)。3、17-DMAG阻滞白血病细胞自噬流:17-DMAG处理细胞早期(0h-4h)巨自噬呈低水平状态,随着处理时间的延长LC3B II与P62蛋白表达同步增加,提示处理晚期(4h-24h)自噬流受阻。自噬体数量于17-DMAG处理早期(2h)无明显改变,晚期(24h)显着增加。CMA的伴侣分子Hsc70基因和蛋白表达上调并随处理时间的延长逐步增加,24h时达到表达高峰(P<0.01)。但同时期未检测到CMA受体Lamp2a的基因及蛋白表达上调,提示CMA水平不变。4、17-DMAG抑制溶酶体降解功能:溶酶体染色显示17-DMAG处理后无明显变化,提示17-DMAG诱导自噬体堆积,而未引发溶酶体数量改变。蛋白免疫印迹法检测到溶酶体内酸性水解酶cathepsin D经17-DMAG处理后表达下调,进一步表明溶酶体内降解功能存在障碍。5、17-DMAG诱导Hsc70高表达,下调cathepsin D表达:在mRNA表达水平上,17-DMAG诱导的Hsc70高表达同时下调了Nalm6细胞cathepsin D的表达(P<0.05),但Reh细胞未受影响。Hsc70敲减后及敲减后给予17-DMAG处理不改变cathepsin D表达;蛋白水平上,17-DMAG诱导Hsc70高表达同时下调Nalm6(P<0.01)和Reh细胞(P<0.05)cathepsin D表达。应用蛋白免疫印迹法,我们检测到泛素-蛋白酶体降解进程被抑制后,17-DMAG引发的cathepsin D表达下调有所恢复,表明Hsc70诱导高表达后增加了对cathepsin D的蛋白降解,提示在两株细胞中Hsc70均参与cathepsin D翻译后的调控。结论:本研究在细胞水平上证实了17-DMAG可诱导B-ALL细胞株凋亡。17-DMAG在药物发挥效应早期抑制B-ALL细胞巨自噬水平,晚期通过诱导溶酶体内酸性水解酶cathepsin D降解导致自噬流受阻,引发细胞凋亡;17-DMAG诱导Hsc70高表达参与溶酶体酸性水解酶cathepsin D经泛素-蛋白酶体降解的过程。(本文来源于《中国医科大学》期刊2019-02-01）
李磊,赵连梅,崔雯萱,戴素丽,彭克楠[2]（2016）在《香加皮杠柳苷通过溶酶体途径诱导胃癌MGC-803细胞凋亡》一文中研究指出目的探讨香加皮杠柳苷(periplocin extracted from cortex periplocae,CPP)是否通过溶酶体途径诱导胃癌细胞凋亡。方法 200、100、50 ng/ml香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24和48 h后,MTS法检测细胞的增殖情况,用TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测不同浓度香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24 h后Caspase-3和Caspase-9的表达情况,吖啶橙染色检测溶酶体释放情况,免疫荧光法检测组织蛋白酶B(Cathepsin B)的表达变化情况。结果与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24、48 h后,均具有增殖抑制作用,24 h增殖率分别为[(66.43±1.67)%、(55.39±3.63)%、(37.06±0.57)%vs.(100.14±8.49)%,P均<0.05],48 h增殖率分别为[(38.16±3.26)%、(32.00±1.83)%、(24.75±1.57)%vs.(100.33±8.98)%,P均<0.05]。与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24 h后,细胞凋亡率显着增加,凋亡率为[(28.56±6.96)%、(33.70±4.60)%、(60.42±4.48)%vs.(2.23±1.03)%,P均<0.05],Caspase-3的活性裂解片段和Caspase-9表达量升高,溶酶体膜的完整性被破坏,Cathepsin B由溶酶体释放到细胞质中。结论香加皮杠柳苷可通过溶酶体途径诱导胃癌细胞凋亡。(本文来源于《肿瘤防治研究》期刊2016年05期）
李磊,戴素丽,彭克楠,崔雯萱,赵连梅[3]（2015）在《香加皮杠柳苷通过溶酶体凋亡途径诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡》一文中研究指出目的香加皮杠柳苷(periploein extracted from cortex periplocase,CPP)是否通过溶酶体途径诱导胃癌细胞凋亡。方法 200、100、50ng/ml香加皮杠柳苷作用于SGC-7901细胞24h和48h后,MTS[3-(4,5-dimethylthiazol-zyl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazoliuzolium,inner salt]法检测细胞的增殖情况,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(terminal dexynucleotidyl transferase(TdT)-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡,Western blotting检测不同浓度香加皮杠柳苷作用于SGC-7901细胞24h后caspase-3和caspase-9的表达情况,吖啶橙染色检测溶酶体释放情况,免疫荧光法检测组织蛋白酶B(CathepsinB)的表达变化情况。结果与0ng/ml组相比,50、100、200ng/ml香加皮杠柳苷作用于SGC-7901细胞24h、48h后,均具有增殖抑制作用,24h增殖率分别为[(76.743.46)%、(62.072.33)%、(54.673.23)%vs(100.003.77)%,均P<0.05],48h增殖率分别为[(41.552.90)%、(37.002.17)%、(28.892.47)%vs(100.005.60)%,均P<O.05]。与Ong/ml组相比,50、100、200n g/ml香加皮杠柳苷作用于SGC-7901细胞24h后,细胞凋亡率显着增加,凋亡率为[(11.363.78)%、(26.834.52)%、(47.193.76)%vs(1.561.26)%],Caspase-3和Caspase-9的活性裂解片段表达量升高,溶酶体膜的完整性被破坏,CathepsinB溶酶体释放到胞浆。结论香加皮杠柳苷可通过溶酶体途径诱导胃癌细胞凋亡。(本文来源于《2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议摘要汇编》期刊2015-04-24）
李敏,廖明[4]（2015）在《溶酶体参与细胞凋亡的主要途径及其机制》一文中研究指出溶酶体是一种膜性细胞器,存在于所有原生动物和多细胞动物的细胞中.研究表明溶酶体代谢途径与细胞凋亡紧密相关.本文综述了溶酶体结构、溶酶体膜通透化与细胞凋亡、溶酶体参与细胞凋亡的主要途径,以及本项目组研究的肝星状细胞凋亡的溶酶体途径.(本文来源于《世界华人消化杂志》期刊2015年04期）
莫非,胡晶莹,甘愉,赵仰星,朱明洁[5]（2011）在《五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡》一文中研究指出目的探索五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡机制。方法吖啶橙染色检测溶酶体膜完整性,胞浆蛋白免疫印迹法检测凋亡途径蛋白变化,Annexin V结合实验和CCK-8法检测不同抑制剂对细胞凋亡和存活的影响。结果凋亡细胞的溶酶体膜渗漏,溶酶体释放蛋白酶Cathepsin D和Cathepsin B至胞浆。天冬氨酸蛋白酶Cathepsin D抑制剂对五行汤诱导的细胞凋亡无影响;半胱氨酸蛋白酶Cathepsin B、L、S抑制剂可明显减少细胞凋亡(P<0.05),且对细胞的保护作用呈浓度依赖性。结论五行汤经钙离子/溶酶体途径介导SGC-7901细胞凋亡。(本文来源于《世界临床药物》期刊2011年05期）
卫涛涛,杨福愉[6]（2008）在《胰凝乳蛋白酶不仅是消化酶，它还分布于肝脏溶酶体并可通过线粒体途径介导细胞凋亡》一文中研究指出细胞凋亡是一种在进化中高度保守的细胞死亡方式,参与多种生命事件。线粒体是细胞凋亡过程中最重要的感受器和放大器之一,而溶酶体可通过释放内含的蛋白酶激活细胞凋亡的线粒体途径;Bid 蛋白则是联接从溶酶体释放的蛋白酶与改蛮(本文来源于《第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会论文摘要集》期刊2008-05-01）
苗琦,孙阳,卫涛涛,闫玲,张旭家[7]（2007）在《溶酶体胰凝乳蛋白酶B通过线粒体途径参与细胞凋亡》一文中研究指出溶酶体内含大量的非特异性水解酶,可以使细胞发生自体吞噬,甚至吞噬周围的细胞,因此与细胞坏死密切相关。近年的研究发现,溶酶体中的某些蛋白酶(如组织蛋白酶)可以在特定凋亡信号的作用下从溶酶体中释放出来,并通过线粒体途径引发细胞凋亡。(本文来源于《第九次全国暨2007海内外生物膜学术研讨会论文摘要集》期刊2007-10-01）
苗琦,闫玲,翟大勇,韩学海,杨福愉[8]（2002）在《诱导细胞凋亡的溶酶体—线粒体途径?》一文中研究指出细胞凋亡是由基因控制的有序的生理过程。线粒体是较早发现的与凋亡相关的细胞器,它可以释放细胞色素c等多种因子参与到凋亡途径中。Bcl-2家族中的Bid蛋白被酶切后产生的C片段转移至线粒体是细胞色素c释放的关键步骤。继线粒体之后,溶酶体是否参与细胞凋亡是一个颇富争议但缺乏实验证据的论题,与之相应的溶酶体参与调控(本文来源于《第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集》期刊2002-05-01）
溶酶体凋亡途径论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨香加皮杠柳苷(periplocin extracted from cortex periplocae,CPP)是否通过溶酶体途径诱导胃癌细胞凋亡。方法 200、100、50 ng/ml香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24和48 h后,MTS法检测细胞的增殖情况,用TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测不同浓度香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24 h后Caspase-3和Caspase-9的表达情况,吖啶橙染色检测溶酶体释放情况,免疫荧光法检测组织蛋白酶B(Cathepsin B)的表达变化情况。结果与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24、48 h后,均具有增殖抑制作用,24 h增殖率分别为[(66.43±1.67)%、(55.39±3.63)%、(37.06±0.57)%vs.(100.14±8.49)%,P均<0.05],48 h增殖率分别为[(38.16±3.26)%、(32.00±1.83)%、(24.75±1.57)%vs.(100.33±8.98)%,P均<0.05]。与空白对照组相比,50、100、200 ng/ml香加皮杠柳苷作用于MGC-803细胞24 h后,细胞凋亡率显着增加,凋亡率为[(28.56±6.96)%、(33.70±4.60)%、(60.42±4.48)%vs.(2.23±1.03)%,P均<0.05],Caspase-3的活性裂解片段和Caspase-9表达量升高,溶酶体膜的完整性被破坏,Cathepsin B由溶酶体释放到细胞质中。结论香加皮杠柳苷可通过溶酶体途径诱导胃癌细胞凋亡。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
溶酶体凋亡途径论文参考文献
[1].马秀娟.Hsp90抑制剂17-DMAG通过自噬-溶酶体途径诱导急性淋巴细胞白血病细胞凋亡的机制研究[D].中国医科大学.2019
[2].李磊,赵连梅,崔雯萱,戴素丽,彭克楠.香加皮杠柳苷通过溶酶体途径诱导胃癌MGC-803细胞凋亡[J].肿瘤防治研究.2016
[3].李磊,戴素丽,彭克楠,崔雯萱,赵连梅.香加皮杠柳苷通过溶酶体凋亡途径诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡[C].2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议摘要汇编.2015
[4].李敏,廖明.溶酶体参与细胞凋亡的主要途径及其机制[J].世界华人消化杂志.2015
[5].莫非,胡晶莹,甘愉,赵仰星,朱明洁.五行汤经钙离子/溶酶体途径介导的SGC-7901细胞凋亡[J].世界临床药物.2011
[6].卫涛涛,杨福愉.胰凝乳蛋白酶不仅是消化酶，它还分布于肝脏溶酶体并可通过线粒体途径介导细胞凋亡[C].第九届全国酶学学术讨论会暨邹承鲁诞辰85周年纪念会论文摘要集.2008
[7].苗琦,孙阳,卫涛涛,闫玲,张旭家.溶酶体胰凝乳蛋白酶B通过线粒体途径参与细胞凋亡[C].第九次全国暨2007海内外生物膜学术研讨会论文摘要集.2007
[8].苗琦,闫玲,翟大勇,韩学海,杨福愉.诱导细胞凋亡的溶酶体—线粒体途径?[C].第九次全国生物物理大会学术会议论文摘要集.2002
标签：急性B淋巴细胞白血病; 17-DMAG; 自噬-溶酶体途径; Hsc70;