永生化大鼠肺泡型上皮细胞论文-孟庆印,阮永华,金克炜,唐莹,高倩

永生化大鼠肺泡型上皮细胞论文-孟庆印,阮永华,金克炜,唐莹,高倩

导读:本文包含了永生化大鼠肺泡型上皮细胞论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:肺泡Ⅱ型上皮,云锡矿粉,恶性转化

永生化大鼠肺泡型上皮细胞论文文献综述

孟庆印,阮永华,金克炜,唐莹,高倩[1](2011)在《云锡矿粉离体诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化》一文中研究指出目的建立本实验云锡矿粉(无氡)诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化模型,观察在诱导过程中不同阶段的细胞形态、超微结构和某些相关蛋白改变。方法高、低2个剂量(200和50 mg/L)矿粉对RLE-6TN细胞进行72 h染毒,隔代染毒至第10代,常规传代直至软琼脂克隆形成实验阳性;通过透射电镜、流式细胞术、免疫印迹技术及免疫细胞化学观察实验细胞的改变。结果染毒24 h细胞内见大量矿粉,板层小体变性减少,出现细胞凋亡;第25代高剂量组及第30代高低剂量组的细胞均可在软琼脂上形成细胞集落,空白对照组克隆形成实验阴性(P<0.01);第30代高剂量组细胞增殖指数(PI)高于空白对照组;高剂量组转化细胞p53(+)、MDM2(+)、FHIT(-);空白对照组p53(-)、MDM2(+)、FHIT(+)。结论云锡矿粉可引起离体培养的RLE-6TN细胞发生恶性转化。p53阳性表达及FHIT失表达可作为RLE-6TN细胞转化的参考指标。(本文来源于《中国职业医学》期刊2011年04期)

孟庆印[2](2008)在《云锡矿粉体外诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化》一文中研究指出目的与背景:云南个旧锡矿矿工为肺癌高发人群,其病因主要为矿粉、烟尘中的氡及其子体和砷、铅、镍、铬等多种因素的协调作用。本实验拟体外培养永生化的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,予以不同浓度的个旧矿粉进行诱导,建立体外转化模型,观察在诱导过程中不同阶段的细胞形态、超微结构和某些相关蛋白的改变,为研究个旧矿工肺癌的病因及发生发展规律提供实验依据。方法:通过透射电镜及免疫组化对永生化大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN进行鉴定;采用细胞毒性实验选择高低两个浓度(200μg/ml和50μg/ml)对细胞进行隔代染毒至第十代,常规传代直至软琼脂克隆形成实验阳性,实验中设置不加矿粉的空白对照组同步传代培养;通过透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞染毒24小时及未染毒的细胞超微结构改变;采用流式细胞术检测染毒前后细胞周期的改变、并利用免疫组织化学技术检测转化前后细胞内sp-b、p53、mdm2、FHIT等的表达改变。通过免疫印迹技术(western blot,WB)检测转化前后sp-c表达情况。结果:1.未染毒细胞在透射电镜下可见典型板层小体,细胞经WB检测SP-C表达呈阳性;染毒24小时细胞内见大量被吞噬的矿粉,板层小体变性、减少,粗面内质网增多,线粒体肿胀,常染色质增多,且出现细胞凋亡。2.第25代高浓度组细胞可在软琼脂上形成细胞集落,达到50个细胞的标准;第30代高低浓度组的细胞均可在软琼脂上形成较大细胞集落,空白对照组克隆形成实验阴性,实验组和对照组差别有显着性(P<0.01),且四个组细胞的克隆形成率差别无显着性(P>0.05)。3.经流式细胞术检测,第30代高浓度组细胞G_2/M期+S期所占细胞周期的比例增加,增殖指数(PI)明显高于空白对照组细胞;低浓度组细胞与空白对照组细胞增殖指数无显着差别。4.第35代氧化矿和硫化矿高低浓度组细胞中SP-B(-)、P53(+)、MDM2(+)、FHIT(-);空白对照组SP-B(+)、P53(-)、MDM2(-)、FHIT(+)。结论:1.云锡矿矿粉(氧化矿粉和硫化矿粉)可以引起体外培养的RLE-6TN细胞发生恶性转化。2.云锡矿粉体外诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化发生于高浓度组第25代及低浓度组第30代。3.云锡矿粉诱导恶性转化的RLE-6TN细胞表达P53及MDM2,而抑癌基因FHIT失表达(本文来源于《昆明医学院》期刊2008-05-01)

永生化大鼠肺泡型上皮细胞论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的与背景:云南个旧锡矿矿工为肺癌高发人群,其病因主要为矿粉、烟尘中的氡及其子体和砷、铅、镍、铬等多种因素的协调作用。本实验拟体外培养永生化的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞,予以不同浓度的个旧矿粉进行诱导,建立体外转化模型,观察在诱导过程中不同阶段的细胞形态、超微结构和某些相关蛋白的改变,为研究个旧矿工肺癌的病因及发生发展规律提供实验依据。方法:通过透射电镜及免疫组化对永生化大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN进行鉴定;采用细胞毒性实验选择高低两个浓度(200μg/ml和50μg/ml)对细胞进行隔代染毒至第十代,常规传代直至软琼脂克隆形成实验阳性,实验中设置不加矿粉的空白对照组同步传代培养;通过透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞染毒24小时及未染毒的细胞超微结构改变;采用流式细胞术检测染毒前后细胞周期的改变、并利用免疫组织化学技术检测转化前后细胞内sp-b、p53、mdm2、FHIT等的表达改变。通过免疫印迹技术(western blot,WB)检测转化前后sp-c表达情况。结果:1.未染毒细胞在透射电镜下可见典型板层小体,细胞经WB检测SP-C表达呈阳性;染毒24小时细胞内见大量被吞噬的矿粉,板层小体变性、减少,粗面内质网增多,线粒体肿胀,常染色质增多,且出现细胞凋亡。2.第25代高浓度组细胞可在软琼脂上形成细胞集落,达到50个细胞的标准;第30代高低浓度组的细胞均可在软琼脂上形成较大细胞集落,空白对照组克隆形成实验阴性,实验组和对照组差别有显着性(P<0.01),且四个组细胞的克隆形成率差别无显着性(P>0.05)。3.经流式细胞术检测,第30代高浓度组细胞G_2/M期+S期所占细胞周期的比例增加,增殖指数(PI)明显高于空白对照组细胞;低浓度组细胞与空白对照组细胞增殖指数无显着差别。4.第35代氧化矿和硫化矿高低浓度组细胞中SP-B(-)、P53(+)、MDM2(+)、FHIT(-);空白对照组SP-B(+)、P53(-)、MDM2(-)、FHIT(+)。结论:1.云锡矿矿粉(氧化矿粉和硫化矿粉)可以引起体外培养的RLE-6TN细胞发生恶性转化。2.云锡矿粉体外诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞恶性转化发生于高浓度组第25代及低浓度组第30代。3.云锡矿粉诱导恶性转化的RLE-6TN细胞表达P53及MDM2,而抑癌基因FHIT失表达

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

永生化大鼠肺泡型上皮细胞论文参考文献

[1].孟庆印,阮永华,金克炜,唐莹,高倩.云锡矿粉离体诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化[J].中国职业医学.2011

[2].孟庆印.云锡矿粉体外诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化[D].昆明医学院.2008

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