本文主要研究内容
作者霍志家,周晓榕,谭瑶,庞保平,单艳敏,张卓然（2019）在《温度胁迫下沙葱萤叶甲小热激蛋白基因GdHsp20.6的克隆及表达分析（英文）》一文中研究指出：为明确小热激蛋白在沙葱萤叶甲Galeruca daurica应对温度胁迫中的作用,采用PCR方法克隆沙葱萤叶甲小热激蛋白基因Hsp20(GdHsp20.6)完整的开放阅读框(open reading frame,ORF)序列,应用在线软件对GdHsp20.6基因进行生物信息学分析,通过原核表达技术诱导表达及纯化其编码蛋白,并通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术分析不同温度胁迫下GdHsp20.6基因的表达量。结果显示,GdHsp20.6基因ORF序列长度为543 bp,编码180个氨基酸,预测分子量为20.6 kD,无跨膜区和信号肽。GdHsp20.6氨基酸序列有高度保守的α-结构域。GdHsp20.6氨基酸序列与其它鞘翅目昆虫的Hsp20氨基酸序列有较高的一致性,其中与花绒寄甲Dastarcus helophoroides的Hsp20.99氨基酸序列的一致性最高,为63%。GdHsp20.6基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)细胞系中成功表达,经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)诱导后GdHsp20.6蛋白成功表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和Western-blot分析表明融合蛋白大小与预测大小一致,并纯化获得了纯度较高的目的蛋白GdHsp20.6。低温(-10～5℃)和高温(35～40℃)处理1 h以及处理后25℃恢复30 min均能诱导GdHsp20.6基因表达上调,并且0℃处理30～120 min也能诱导GdHsp20.6基因表达上调。表明GdHsp20.6基因在沙葱萤叶甲应对低温和高温胁迫中可能起着重要作用。
Abstract
wei ming que xiao re ji dan bai zai sha cong ying xie jia Galeruca dauricaying dui wen du xie pai zhong de zuo yong ,cai yong PCRfang fa ke long sha cong ying xie jia xiao re ji dan bai ji yin Hsp20(GdHsp20.6)wan zheng de kai fang yue dou kuang (open reading frame,ORF)xu lie ,ying yong zai xian ruan jian dui GdHsp20.6ji yin jin hang sheng wu xin xi xue fen xi ,tong guo yuan he biao da ji shu you dao biao da ji chun hua ji bian ma dan bai ,bing tong guo shi shi ying guang ding liang PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)ji shu fen xi bu tong wen du xie pai xia GdHsp20.6ji yin de biao da liang 。jie guo xian shi ,GdHsp20.6ji yin ORFxu lie chang du wei 543 bp,bian ma 180ge an ji suan ,yu ce fen zi liang wei 20.6 kD,mo kua mo ou he xin hao tai 。GdHsp20.6an ji suan xu lie you gao du bao shou de α-jie gou yu 。GdHsp20.6an ji suan xu lie yu ji ta qiao chi mu kun chong de Hsp20an ji suan xu lie you jiao gao de yi zhi xing ,ji zhong yu hua rong ji jia Dastarcus helophoroidesde Hsp20.99an ji suan xu lie de yi zhi xing zui gao ,wei 63%。GdHsp20.6ji yin zai da chang gan jun Escherichia coli BL21(DE3)xi bao ji zhong cheng gong biao da ,jing yi bing ji -β-D-liu dai bi nan ban ru tang gan (isopropyl-β-d-thiogalactoside,IPTG)you dao hou GdHsp20.6dan bai cheng gong biao da ,shi er wan ji liu suan na -ju bing xi xian an ning jiao dian yong (sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)he Western-blotfen xi biao ming rong ge dan bai da xiao yu yu ce da xiao yi zhi ,bing chun hua huo de le chun du jiao gao de mu de dan bai GdHsp20.6。di wen (-10～5℃)he gao wen (35～40℃)chu li 1 hyi ji chu li hou 25℃hui fu 30 minjun neng you dao GdHsp20.6ji yin biao da shang diao ,bing ju 0℃chu li 30～120 minye neng you dao GdHsp20.6ji yin biao da shang diao 。biao ming GdHsp20.6ji yin zai sha cong ying xie jia ying dui di wen he gao wen xie pai zhong ke neng qi zhao chong yao zuo yong 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自植物保护学报的霍志家,周晓榕,谭瑶,庞保平,单艳敏,张卓然，发表于刊物植物保护学报2019年04期论文，是一篇关于沙葱萤叶甲论文,小热激蛋白论文,温度胁迫论文,表达谱论文,分析论文,植物保护学报2019年04期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自植物保护学报2019年04期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。