吲哚叁醋酸酶论文-苗北平,张蕊石,孟庆国,王晓彬,孙焕吉

吲哚叁醋酸酶论文-苗北平,张蕊石,孟庆国,王晓彬,孙焕吉

导读:本文包含了吲哚叁醋酸酶论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:辣根过氧化物酶,吲哚叁醋酸酶,酶前药,乏氧,有氧状态,旁观者效应

吲哚叁醋酸酶论文文献综述

苗北平,张蕊石,孟庆国,王晓彬,孙焕吉[1](2009)在《辣根过氧化物酶/吲哚叁醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用》一文中研究指出目的研究adv5.oriP.HRP对鼻咽癌细胞靶向性转染和HRP/IAA对鼻咽癌细胞的杀伤作用。方法将adv5.oriP.HRP感染C666-1,KS1和CNE-2Z细胞,加入IAA,用MTT法评估细胞杀伤效果。建立乏氧有氧条件,检测HRP/IAA在乏氧状态下鼻咽癌细胞的杀伤能力及旁观者效应。结果adv5.oriP.HRP能靶向性在EBV阳性的鼻咽癌细胞内高效转染和表达。HRP/IAA对鼻咽癌细胞有强大的杀伤作用,在一定范围内杀伤能力随孵育时间和病毒载体及前药的浓度增高而增加。在乏氧状态下,HRP/IAA有同样的杀伤能力。当感染细胞占总细胞的10%左右时,65%的肿瘤细胞死亡,当比例达到20%时,90%以上的细胞死亡,显示HRP/IAA有很强的旁观者效应。结论adv5.oriP.HRP能在EBV病毒阳性的细胞内靶向性表达;HRP/IAA在乏氧和有氧状态下均有强大的杀伤能力和旁观者效应。adv5.oriP.HRP/IAA是理想的病毒介导的酶前药基因组合。(本文来源于《山东大学耳鼻喉眼学报》期刊2009年03期)

苗北平[2](2008)在《辣根过氧化物酶/吲哚叁醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用》一文中研究指出第一篇腺病毒载体构建及在EBV阳性鼻咽癌细胞中的靶向表达目的:构建理想的复制缺陷性腺病毒ad5.oriP.HRP,使其在EBV阳性的鼻咽癌细胞C666-1内可以靶向性转染及表达。方法:通过酶切质粒pEIG3获得一个897bp大小的SalⅠ-HindⅢ片断,其中含有EB病毒的家族重复序列(oriP-FR)和基础的CMV IE启动子。然后将酶切片断克隆入穿梭质粒pΔEIsp1A的SalⅠ-HindⅢ位置,制造出pΔEIsp1A/oriP。oriP-CMV启动子含有621bp的EB病毒的复制子,其中含有20个可与EBNA1(Epstein-Barr virus nuclear antigen 1)结合的位点,被克隆在70bp的CMVIE启动子的上游。将BamHI-HindⅢ间含有β-gal、HRP的片断克隆质粒入pΔEIsp1A/oriP的oriP-CMV下游构建成pΔEIsp1A/oriP-β-gal,pΔEIsp1A/oriP-HRP,将重组质粒常规筛选。将回收的pΔEIsp1A/oriP-β-gal或pΔEIsp1A/oriP-HRP片段取1ul补加ECBuffer至150ul,再加入质粒pJM17,处理后与293细胞孵育,置于37℃,5%CO_2培养箱培养,6h后换液,37℃培养,5天左右出现病毒空斑。常规鉴定、纯化,病毒滴定。并实验ad5.oriP.HRP,ad5.oriP.gal在C666-1,KS1和CNE-2Z的转染,PCR或Western Blot,检测ad5.oriP.HRP在相关细胞的转染及表达。结果:重组腺病毒ad5oriP.HRP感染的293细胞抽提DNA PCR鉴定在1229bp出现目的条带;ad5oriP.HRP感染EBV阳性C666-1细胞后,PCR扩增产物可见目的条带,而KS1和CNE-2Z未见目的产物。Western Blot分析在C666-1细胞52kD可见目的条带,而对照组未见;和空病毒ad5.null相比重组腺病毒ad5oriP在C666-1细胞内表达效率提高800倍。结论:重组腺病毒ad5oriP.HRP在EBV阳性的C666-1细胞内可高效、靶向性转染和表达。第二篇辣根过氧化物酶/吲哚叁醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用目的:研究adv5.oriP.HRP对鼻咽癌细胞靶向性转染和HRP/IAA在乏氧和有氧状态下对其杀伤作用;探讨HRP/IAA对裸鼠鼻咽癌模型的体内杀伤作用。方法:将adv5.oriP.HRP感染C666-1,KS1和CNE-2Z细胞,加入IAA,用MTT法评估细胞杀伤效果;建立乏氧有氧条件,检测HRP/IAA在乏氧状态下鼻咽癌细胞的杀伤能力;建立鼻咽癌裸鼠模型,瘤内注射HRP/IAA,计算瘤体的体积大小变化评估其体内治疗效果。结果:adv5.oriP.HRP能靶向性在EBV阳性的鼻咽癌细胞内高效转染和表达;HRP/IAA对鼻咽癌细胞有强大的杀伤作用,在一定范围内杀伤能力随孵育时间和病毒载体及前药的浓度增高而增加;在乏氧状态下,HRP/IAA有同样的杀伤能力;当感染细胞占总细胞的10%左右时,65%的肿瘤细胞死亡,当比例达到20%时,90%以上的细胞死亡。显示HRP/IAA有很强的旁观者效应。瘤内注射adv5.oriP.HRP和IAA可见明显的肿瘤缩小、消失,提示良好的体内抗肿瘤效果。结论:adv5.oriP.HRP能在EBV病毒阳性的细胞内靶向性表达;HRP/IAA在乏氧和有氧状态下均有强大的杀伤能力和旁观者效应并可有效杀伤裸鼠的鼻咽癌细胞而使肿瘤体积缩小和消失。adv5.oriP.HRP/IAA是理想的病毒介导的酶前药基因组合。(本文来源于《山东大学》期刊2008-10-16)

吲哚叁醋酸酶论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

第一篇腺病毒载体构建及在EBV阳性鼻咽癌细胞中的靶向表达目的:构建理想的复制缺陷性腺病毒ad5.oriP.HRP,使其在EBV阳性的鼻咽癌细胞C666-1内可以靶向性转染及表达。方法:通过酶切质粒pEIG3获得一个897bp大小的SalⅠ-HindⅢ片断,其中含有EB病毒的家族重复序列(oriP-FR)和基础的CMV IE启动子。然后将酶切片断克隆入穿梭质粒pΔEIsp1A的SalⅠ-HindⅢ位置,制造出pΔEIsp1A/oriP。oriP-CMV启动子含有621bp的EB病毒的复制子,其中含有20个可与EBNA1(Epstein-Barr virus nuclear antigen 1)结合的位点,被克隆在70bp的CMVIE启动子的上游。将BamHI-HindⅢ间含有β-gal、HRP的片断克隆质粒入pΔEIsp1A/oriP的oriP-CMV下游构建成pΔEIsp1A/oriP-β-gal,pΔEIsp1A/oriP-HRP,将重组质粒常规筛选。将回收的pΔEIsp1A/oriP-β-gal或pΔEIsp1A/oriP-HRP片段取1ul补加ECBuffer至150ul,再加入质粒pJM17,处理后与293细胞孵育,置于37℃,5%CO_2培养箱培养,6h后换液,37℃培养,5天左右出现病毒空斑。常规鉴定、纯化,病毒滴定。并实验ad5.oriP.HRP,ad5.oriP.gal在C666-1,KS1和CNE-2Z的转染,PCR或Western Blot,检测ad5.oriP.HRP在相关细胞的转染及表达。结果:重组腺病毒ad5oriP.HRP感染的293细胞抽提DNA PCR鉴定在1229bp出现目的条带;ad5oriP.HRP感染EBV阳性C666-1细胞后,PCR扩增产物可见目的条带,而KS1和CNE-2Z未见目的产物。Western Blot分析在C666-1细胞52kD可见目的条带,而对照组未见;和空病毒ad5.null相比重组腺病毒ad5oriP在C666-1细胞内表达效率提高800倍。结论:重组腺病毒ad5oriP.HRP在EBV阳性的C666-1细胞内可高效、靶向性转染和表达。第二篇辣根过氧化物酶/吲哚叁醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用目的:研究adv5.oriP.HRP对鼻咽癌细胞靶向性转染和HRP/IAA在乏氧和有氧状态下对其杀伤作用;探讨HRP/IAA对裸鼠鼻咽癌模型的体内杀伤作用。方法:将adv5.oriP.HRP感染C666-1,KS1和CNE-2Z细胞,加入IAA,用MTT法评估细胞杀伤效果;建立乏氧有氧条件,检测HRP/IAA在乏氧状态下鼻咽癌细胞的杀伤能力;建立鼻咽癌裸鼠模型,瘤内注射HRP/IAA,计算瘤体的体积大小变化评估其体内治疗效果。结果:adv5.oriP.HRP能靶向性在EBV阳性的鼻咽癌细胞内高效转染和表达;HRP/IAA对鼻咽癌细胞有强大的杀伤作用,在一定范围内杀伤能力随孵育时间和病毒载体及前药的浓度增高而增加;在乏氧状态下,HRP/IAA有同样的杀伤能力;当感染细胞占总细胞的10%左右时,65%的肿瘤细胞死亡,当比例达到20%时,90%以上的细胞死亡。显示HRP/IAA有很强的旁观者效应。瘤内注射adv5.oriP.HRP和IAA可见明显的肿瘤缩小、消失,提示良好的体内抗肿瘤效果。结论:adv5.oriP.HRP能在EBV病毒阳性的细胞内靶向性表达;HRP/IAA在乏氧和有氧状态下均有强大的杀伤能力和旁观者效应并可有效杀伤裸鼠的鼻咽癌细胞而使肿瘤体积缩小和消失。adv5.oriP.HRP/IAA是理想的病毒介导的酶前药基因组合。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

吲哚叁醋酸酶论文参考文献

[1].苗北平,张蕊石,孟庆国,王晓彬,孙焕吉.辣根过氧化物酶/吲哚叁醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用[J].山东大学耳鼻喉眼学报.2009

[2].苗北平.辣根过氧化物酶/吲哚叁醋酸酶前药对鼻咽癌细胞的杀伤作用[D].山东大学.2008

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