导读:本文包含了白喉毒素受体论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:听神经病,动物模型,白喉毒素,螺旋神经节细胞
白喉毒素受体论文文献综述
潘豪来[1]（2017）在《SGN特异性表达白喉毒素受体小鼠耳蜗功能及形态学研究》一文中研究指出目的:观察白喉毒素(diphtheria toxin,DT)处理后螺旋神经节细胞(spiral ganglion neuron,SGN)特异性表达白喉毒素受体(DT receptor,DTR)小鼠的耳蜗功能及形态学改变,尤其关注毛细胞带状体(ribbon)突触的病理、生理学改变。方法:采用健康SGN特异性表达环化重组酶(Cyclization Recombination Enzyme,Cre)和Cre诱导依赖性纯合DTR小鼠杂交产生子代,以SGN表达DTR的小鼠作为实验组,以SGN不表达DTR的小鼠作为对照组,腹腔注射DT。分别于注射后1、3、7、30天对小鼠进行ABR、CAP、调幅信号CAP响应测试,测试完成后行耳蜗毛细胞(hair cell,HC)、SGN以及ribbon突触的形态学观察。结果:DT注射后两组小鼠ABR阈值及HC计数均无改变。实验组动物CAP幅值、调幅信号CAP响应低于对照组(p<0.05);SGN平均损失达45%,听神经纤维发生脱髓鞘改变;注射后第3天内毛细胞ribbon突触前后膜发生明显分离;第7天部分突触前后膜重连,突触数目平均减少30%,持续至注射后第30天。结论:DT注射后实验组小鼠存在SGN、ribbon突触的损伤而HC无明显改变,神经同步放电功能受损而听觉敏感性无明显改变,似可作为人类听神经病的可选动物模型。(本文来源于《上海交通大学》期刊2017-05-01）
蔺扬[2]（2009）在《人脑胶质瘤白喉毒素受体表达水平与其病理级别相关性的探讨》一文中研究指出前言人脑胶质瘤是一种恶性度高的中枢神经系统疾病,术后的化疗是目前治疗胶质瘤必要手段之一。但由于胶质瘤毛细血管形成的血肿瘤屏障的存在,选择性地转运化疗药物到达脑肿瘤组织一直是一个难题。近年来国内外研究表明,经脑毛细血管内皮细胞上的内源性受体介导的药物转运可能是脑内药物转运最有效的方法之一。白喉毒素受体(diphtheria toxin receptor,DTR),也称作肝素结合表皮生长因子的膜结合前体(pro heparinbinding-epidermal growth factor,proHB-EGF),是一个含有206个氨基酸的跨膜蛋白,它可以与白喉毒素特异性结合,通过受体介导的内吞作用使其进入细胞。DTR在平滑肌细胞,血管内皮细胞,血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)上均有表达。在疾病,如中风、脑肿瘤的条件下,DTR在BBB中的表达大幅度上调;已经有实验表明,DTR蛋白在许多肿瘤组织中高表达,但在人脑胶质瘤中是否也有表达并未见文献报道。研究表明,白喉毒素的无毒突变体—CRM197,能够作为一种安全有效的人类疫苗而使用。在对白喉毒素敏感的豚鼠的研究中发现,DTR在豚鼠的脑血管内皮细胞和胶质细胞中表达,并检测到CRM197载体蛋白可以安全有效地转运大分子的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP,40kD)通过BBB,这充分证实它可以作为一种安全有效的载体,介导大分子物质经DTR进行跨细胞转运。上述结果使我们相信,DTR介导的跨细胞转运可能成为一种更安全有效的脑内大分子药物的选择性转运途径,从而达到治疗肿瘤的目的。本研究采用脑胶质瘤患者术后肿瘤组织标本,通过测定脑胶质瘤组织中DTR的表达水平,与其病理级别相比较,分析脑胶质瘤DTR的表达水平与其病理级别的相关性,为DTR介导的药物转运方法应用于临床上脑肿瘤的化疗提供实验依据。材料和方法一、实验材料(一)标本2007年7月到2008年7月间,从中国医科大学附属第一医院神经外科手术切除的脑胶质瘤中,获得32例新鲜的组织标本。同时收集3例脑挫裂伤手术获得的正常脑组织标本作为对照组。32例患者中,男18例(56%),女14例(44%)。年龄在25到76之间,平均年龄47岁。手术切除的新鲜组织标本立即于液氮中速冻后,置于-70℃超低温冰箱中保存。所有关于人体的实验均符合赫尔辛基宣言,并取得了患者的知情同意。(二)主要试剂羊抗人DTR/proHB-EGF多克隆抗体,小鼠抗β-actin单克隆抗体和增强化学发光法(enhanced chemiluminescence,ECL)试剂盒均购于美国SANTA CRUZBIOTECHNOLOGY公司;辣根酶标记的山羊抗小鼠IgG,辣根酶标记的兔抗山羊IgG和二氨基联苯胺(DAB)染色试剂盒均购于北京中杉生物技术有限公司;免疫组化链霉亲和素—过氧化物酶(SP)试剂盒由福州迈新生物技术开发公司提供。(叁)主要仪器匀浆机;电子分析天平;恒温震荡水浴箱;台式低温冷冻离心机;紫外分光光度计;通用电泳仪;转印仪;-70℃超低温冰箱;恒温冰冻切片机;液氮罐。二、实验方法(一)H＆E(hematoxylin and eosin,H＆E)染色根据H＆E染色结果按照WHO中枢神经系统肿瘤的分类标准(2000)对人脑胶质瘤进行病理诊断和分级,每个病理级别为一组。(二)Western Blot法测定DTR在各病理级别中的表达水平,分析人脑胶质痛中DTR表达水平与其病理级别间的相关性。(叁)免疫组化SP法测定不同病理级别中DTR表达与分布,分析人脑胶质瘤中DTR的表达水平与其病理级别间的相关性。(四)图像分析Western Blot结果用Chemi Imager 5500 V2.03软件扫描,用捷达图像分析系统v3.3软件定量分析显色带的整合光密度值(Integrated Density Value,IDV)。免疫组化结果用Motic Images Advanced 3.2实时图象分析系统采集照片并目标平均光密度值(Average Optical Density,AOD)进行半定量分析。(五)统计学处理计量资料结果用(?)±s表示,实验数据采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析,组间多重比较采用单因素方差分析的最小有意义差(the least significantdifference,LSD)法。采用相关分析和一元线性回归对人脑胶质瘤DTR表达水平与其病理级别进行相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。实验结果一、H＆E染色进行人脑胶质瘤的病理诊断与分级根据WHO中枢神经系统肿瘤的分类标准(2000),32例人脑胶质瘤中,Ⅰ级10例,Ⅱ级12例,Ⅲ级10例,Ⅳ级0例。每个病理级别为一组,共叁组。3例脑挫裂伤手术获得的正常脑组织标本作为对照组。二、Western Blot法测定DTR的表达水平测定的DTR的表达水平取其IDV值与对应β-actin的IDV值的比值。DTR在肿瘤细胞中表达,而在对照组中不表达。在各病理级别的脑胶质瘤中,DTR与对应的β-actin的IDV值之比分别为0.1070±0.0265,0.1592±0.0322和0.2730±0.0425;两两组间比较,P=0.000,差异均有统计学意义,且Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ级;DTR的表达水平与其病理级别的相关分析,r=0.877,P=0.000,呈显着正相关;进行回归分析,直线回归方程为Y=0.083X+0.0127。叁、免疫组化法测定DTR的分布与表达水平免疫组化SP法检测结果显示,对照组中DTR呈阴性表达,而每一级别人脑胶质瘤细胞均有免疫反应棕色阳性颗粒分布,着色部位在细胞膜和细胞质,细胞核无着色。在各病理级别人脑胶质瘤中,DTR的OD值分别为0.1923±0.0203,0.2084±0.0211,0.2455±0.0384,Ⅰ、Ⅱ级组间比较,P=0.008,Ⅰ、Ⅲ级和Ⅱ、Ⅲ级组间比较,P=0.000,差异均有统计学意义,且Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ级;脑胶质瘤中DTR表达水平与其病理级别做相关分析,r=0.609,P=0.000,呈显着正相关;进行回归分析,直线回归方程为Y=0.026X+0.164。讨论我们利用人脑胶质瘤组织首次证明了在不同病理级别的脑胶质瘤中,DTR的表达水平存在差异,且Ⅰ级<Ⅱ级<Ⅲ级,并与其病理级别呈显着正相关关系。DTR,也称作proHB-EGF,是属于表皮生长因子超家族的肝素结合表皮生长因子(heparinbinding-epidermal growth factor,HB-EGF)的膜结合前体,它可以经由蛋白水解分裂为有76-87氨基酸残基的可溶性肝素结合表皮生长因子(solubleHB-EGF,sHB-EGF)。免疫组化结果显示,在人脑胶质瘤细胞中,HB-EGF主要是以DTR形式表达的。体外的人脑胶质瘤细胞中,DTR的表达是由bEGF、EGF或TGF-α诱发的,而体内的人脑胶质瘤细胞产生TGF-A和bEGF,这些现象提高了肿瘤衍生的多种生长因子相互调控他们的信号转导路径的可能性,以及在刺激神经胶质瘤细胞生长中发挥了很重要的作用。同时,这些生长因子交叉反应也可能引起胶质瘤中DTR的过量表达。随着人脑胶质瘤细胞成几何级数生长和病理级别的升高,这一作用可能被放大,从而使DTR的表达随着病理级别的升高而增加。DTR在人血管内皮细胞上表达,可以介导与抗该受体的单克隆抗体连接的外源性药物,经胞吞胞吐作用转运到脑组织中。同时我们的研究发现,DTR在人脑胶质瘤细胞中高表达,提示该药物可以进一步特异地作用于脑胶质瘤细胞。以白喉毒素的无毒突变体CRM197为载体,经DTR介导的药物转运不用破坏BBB的屏障特性,就可以通过内皮细胞进入脑,提示DTR介导的药物转运途径可能成为一种新的中枢神经系统药物转运方式用来靶向的治疗人脑胶质瘤。我们的研究发现,脑胶质瘤中DTR的表达水平与其病理级别呈显着正相关,且线性回归方程有统计学意义。据此可以推测,病理级别高的脑胶质瘤患者,因为其DTR的表达水平较高,所以由DT及其类似物CRM197介导的药物转运的效应可能更加显着,从而可能取得良好的疗效。结论1、不同病理级别的人脑胶质瘤组织中,DTR的表达水平存在差异,且Ⅰ级<Ⅱ级<Ⅲ级.2、人脑胶质瘤组织中,DTR的表达水平与其病理级别呈显着正相关关系。(本文来源于《中国医科大学》期刊2009-04-01）
白喉毒素受体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
前言人脑胶质瘤是一种恶性度高的中枢神经系统疾病,术后的化疗是目前治疗胶质瘤必要手段之一。但由于胶质瘤毛细血管形成的血肿瘤屏障的存在,选择性地转运化疗药物到达脑肿瘤组织一直是一个难题。近年来国内外研究表明,经脑毛细血管内皮细胞上的内源性受体介导的药物转运可能是脑内药物转运最有效的方法之一。白喉毒素受体(diphtheria toxin receptor,DTR),也称作肝素结合表皮生长因子的膜结合前体(pro heparinbinding-epidermal growth factor,proHB-EGF),是一个含有206个氨基酸的跨膜蛋白,它可以与白喉毒素特异性结合,通过受体介导的内吞作用使其进入细胞。DTR在平滑肌细胞,血管内皮细胞,血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)上均有表达。在疾病,如中风、脑肿瘤的条件下,DTR在BBB中的表达大幅度上调;已经有实验表明,DTR蛋白在许多肿瘤组织中高表达,但在人脑胶质瘤中是否也有表达并未见文献报道。研究表明,白喉毒素的无毒突变体—CRM197,能够作为一种安全有效的人类疫苗而使用。在对白喉毒素敏感的豚鼠的研究中发现,DTR在豚鼠的脑血管内皮细胞和胶质细胞中表达,并检测到CRM197载体蛋白可以安全有效地转运大分子的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP,40kD)通过BBB,这充分证实它可以作为一种安全有效的载体,介导大分子物质经DTR进行跨细胞转运。上述结果使我们相信,DTR介导的跨细胞转运可能成为一种更安全有效的脑内大分子药物的选择性转运途径,从而达到治疗肿瘤的目的。本研究采用脑胶质瘤患者术后肿瘤组织标本,通过测定脑胶质瘤组织中DTR的表达水平,与其病理级别相比较,分析脑胶质瘤DTR的表达水平与其病理级别的相关性,为DTR介导的药物转运方法应用于临床上脑肿瘤的化疗提供实验依据。材料和方法一、实验材料(一)标本2007年7月到2008年7月间,从中国医科大学附属第一医院神经外科手术切除的脑胶质瘤中,获得32例新鲜的组织标本。同时收集3例脑挫裂伤手术获得的正常脑组织标本作为对照组。32例患者中,男18例(56%),女14例(44%)。年龄在25到76之间,平均年龄47岁。手术切除的新鲜组织标本立即于液氮中速冻后,置于-70℃超低温冰箱中保存。所有关于人体的实验均符合赫尔辛基宣言,并取得了患者的知情同意。(二)主要试剂羊抗人DTR/proHB-EGF多克隆抗体,小鼠抗β-actin单克隆抗体和增强化学发光法(enhanced chemiluminescence,ECL)试剂盒均购于美国SANTA CRUZBIOTECHNOLOGY公司;辣根酶标记的山羊抗小鼠IgG,辣根酶标记的兔抗山羊IgG和二氨基联苯胺(DAB)染色试剂盒均购于北京中杉生物技术有限公司;免疫组化链霉亲和素—过氧化物酶(SP)试剂盒由福州迈新生物技术开发公司提供。(叁)主要仪器匀浆机;电子分析天平;恒温震荡水浴箱;台式低温冷冻离心机;紫外分光光度计;通用电泳仪;转印仪;-70℃超低温冰箱;恒温冰冻切片机;液氮罐。二、实验方法(一)H＆E(hematoxylin and eosin,H＆E)染色根据H＆E染色结果按照WHO中枢神经系统肿瘤的分类标准(2000)对人脑胶质瘤进行病理诊断和分级,每个病理级别为一组。(二)Western Blot法测定DTR在各病理级别中的表达水平,分析人脑胶质痛中DTR表达水平与其病理级别间的相关性。(叁)免疫组化SP法测定不同病理级别中DTR表达与分布,分析人脑胶质瘤中DTR的表达水平与其病理级别间的相关性。(四)图像分析Western Blot结果用Chemi Imager 5500 V2.03软件扫描,用捷达图像分析系统v3.3软件定量分析显色带的整合光密度值(Integrated Density Value,IDV)。免疫组化结果用Motic Images Advanced 3.2实时图象分析系统采集照片并目标平均光密度值(Average Optical Density,AOD)进行半定量分析。(五)统计学处理计量资料结果用(?)±s表示,实验数据采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析,组间多重比较采用单因素方差分析的最小有意义差(the least significantdifference,LSD)法。采用相关分析和一元线性回归对人脑胶质瘤DTR表达水平与其病理级别进行相关性分析。P<0.05为差异有统计学意义。实验结果一、H＆E染色进行人脑胶质瘤的病理诊断与分级根据WHO中枢神经系统肿瘤的分类标准(2000),32例人脑胶质瘤中,Ⅰ级10例,Ⅱ级12例,Ⅲ级10例,Ⅳ级0例。每个病理级别为一组,共叁组。3例脑挫裂伤手术获得的正常脑组织标本作为对照组。二、Western Blot法测定DTR的表达水平测定的DTR的表达水平取其IDV值与对应β-actin的IDV值的比值。DTR在肿瘤细胞中表达,而在对照组中不表达。在各病理级别的脑胶质瘤中,DTR与对应的β-actin的IDV值之比分别为0.1070±0.0265,0.1592±0.0322和0.2730±0.0425;两两组间比较,P=0.000,差异均有统计学意义,且Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ级;DTR的表达水平与其病理级别的相关分析,r=0.877,P=0.000,呈显着正相关;进行回归分析,直线回归方程为Y=0.083X+0.0127。叁、免疫组化法测定DTR的分布与表达水平免疫组化SP法检测结果显示,对照组中DTR呈阴性表达,而每一级别人脑胶质瘤细胞均有免疫反应棕色阳性颗粒分布,着色部位在细胞膜和细胞质,细胞核无着色。在各病理级别人脑胶质瘤中,DTR的OD值分别为0.1923±0.0203,0.2084±0.0211,0.2455±0.0384,Ⅰ、Ⅱ级组间比较,P=0.008,Ⅰ、Ⅲ级和Ⅱ、Ⅲ级组间比较,P=0.000,差异均有统计学意义,且Ⅰ<Ⅱ<Ⅲ级;脑胶质瘤中DTR表达水平与其病理级别做相关分析,r=0.609,P=0.000,呈显着正相关;进行回归分析,直线回归方程为Y=0.026X+0.164。讨论我们利用人脑胶质瘤组织首次证明了在不同病理级别的脑胶质瘤中,DTR的表达水平存在差异,且Ⅰ级<Ⅱ级<Ⅲ级,并与其病理级别呈显着正相关关系。DTR,也称作proHB-EGF,是属于表皮生长因子超家族的肝素结合表皮生长因子(heparinbinding-epidermal growth factor,HB-EGF)的膜结合前体,它可以经由蛋白水解分裂为有76-87氨基酸残基的可溶性肝素结合表皮生长因子(solubleHB-EGF,sHB-EGF)。免疫组化结果显示,在人脑胶质瘤细胞中,HB-EGF主要是以DTR形式表达的。体外的人脑胶质瘤细胞中,DTR的表达是由bEGF、EGF或TGF-α诱发的,而体内的人脑胶质瘤细胞产生TGF-A和bEGF,这些现象提高了肿瘤衍生的多种生长因子相互调控他们的信号转导路径的可能性,以及在刺激神经胶质瘤细胞生长中发挥了很重要的作用。同时,这些生长因子交叉反应也可能引起胶质瘤中DTR的过量表达。随着人脑胶质瘤细胞成几何级数生长和病理级别的升高,这一作用可能被放大,从而使DTR的表达随着病理级别的升高而增加。DTR在人血管内皮细胞上表达,可以介导与抗该受体的单克隆抗体连接的外源性药物,经胞吞胞吐作用转运到脑组织中。同时我们的研究发现,DTR在人脑胶质瘤细胞中高表达,提示该药物可以进一步特异地作用于脑胶质瘤细胞。以白喉毒素的无毒突变体CRM197为载体,经DTR介导的药物转运不用破坏BBB的屏障特性,就可以通过内皮细胞进入脑,提示DTR介导的药物转运途径可能成为一种新的中枢神经系统药物转运方式用来靶向的治疗人脑胶质瘤。我们的研究发现,脑胶质瘤中DTR的表达水平与其病理级别呈显着正相关,且线性回归方程有统计学意义。据此可以推测,病理级别高的脑胶质瘤患者,因为其DTR的表达水平较高,所以由DT及其类似物CRM197介导的药物转运的效应可能更加显着,从而可能取得良好的疗效。结论1、不同病理级别的人脑胶质瘤组织中,DTR的表达水平存在差异,且Ⅰ级<Ⅱ级<Ⅲ级.2、人脑胶质瘤组织中,DTR的表达水平与其病理级别呈显着正相关关系。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
白喉毒素受体论文参考文献
[1].潘豪来.SGN特异性表达白喉毒素受体小鼠耳蜗功能及形态学研究[D].上海交通大学.2017
[2].蔺扬.人脑胶质瘤白喉毒素受体表达水平与其病理级别相关性的探讨[D].中国医科大学.2009