李玉娟:pSim6质粒与新型反选择kil系统联用在重组工程的应用论文

李玉娟:pSim6质粒与新型反选择kil系统联用在重组工程的应用论文

本文主要研究内容

作者李玉娟,陈如意,杨缅峰,陈伟(2019)在《pSim6质粒与新型反选择kil系统联用在重组工程的应用》一文中研究指出:基因工程中,无痕修饰是一种很受欢迎的基因组操作技术。反选择系统的严谨性决定了无痕修饰的效率。近期有文献报道了一种新型的反选择系统kil,该系统与质粒pSim6联用后反选择严谨性较pKD46质粒更高,预示着kil与pSim6质粒联用可以更高效地选择出重组子。据此,对大肠杆菌菌株W3110、MG1655和DH10B中的4个不同的非必需基因位点(lacI、dbpa、ack和glk)进行了分析,将不同长度的外源基因片段对预先插入这些位点的tet/kil进行基因替换。结果表明kil与pSim6质粒联用较其与pKD46质粒联用,重组效率均有显著提高,并且随着外源片段的增长,效果更明显。外源片段为1 000 bp时,kil与pSim6质粒联用是其与pKD46联用的1.2–2倍;外源片段为2 000 bp时,则是pKD46的2.2–5倍。综上,kil与pSim6联用具有更高的重组效率,更有利于大肠杆菌基因组的无痕修饰操作,这为大肠杆菌重组工程提供了更多的选择。

Abstract

ji yin gong cheng zhong ,mo hen xiu shi shi yi chong hen shou huan ying de ji yin zu cao zuo ji shu 。fan shua ze ji tong de yan jin xing jue ding le mo hen xiu shi de xiao lv 。jin ji you wen suo bao dao le yi chong xin xing de fan shua ze ji tong kil,gai ji tong yu zhi li pSim6lian yong hou fan shua ze yan jin xing jiao pKD46zhi li geng gao ,yu shi zhao kilyu pSim6zhi li lian yong ke yi geng gao xiao de shua ze chu chong zu zi 。ju ci ,dui da chang gan jun jun zhu W3110、MG1655he DH10Bzhong de 4ge bu tong de fei bi xu ji yin wei dian (lacI、dbpa、ackhe glk)jin hang le fen xi ,jiang bu tong chang du de wai yuan ji yin pian duan dui yu xian cha ru zhe xie wei dian de tet/kiljin hang ji yin ti huan 。jie guo biao ming kilyu pSim6zhi li lian yong jiao ji yu pKD46zhi li lian yong ,chong zu xiao lv jun you xian zhe di gao ,bing ju sui zhao wai yuan pian duan de zeng chang ,xiao guo geng ming xian 。wai yuan pian duan wei 1 000 bpshi ,kilyu pSim6zhi li lian yong shi ji yu pKD46lian yong de 1.2–2bei ;wai yuan pian duan wei 2 000 bpshi ,ze shi pKD46de 2.2–5bei 。zeng shang ,kilyu pSim6lian yong ju you geng gao de chong zu xiao lv ,geng you li yu da chang gan jun ji yin zu de mo hen xiu shi cao zuo ,zhe wei da chang gan jun chong zu gong cheng di gong le geng duo de shua ze 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自生物工程学报的李玉娟,陈如意,杨缅峰,陈伟,发表于刊物生物工程学报2019年09期论文,是一篇关于重组系统论文,选择反选择系统论文,无痕修饰论文,大肠杆菌论文,生物工程学报2019年09期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自生物工程学报2019年09期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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