导读:本文包含了胞外蛋白酶抑制剂论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:大鼠,肝再生,胞外蛋白酶抑制剂(expi),RNA干扰
胞外蛋白酶抑制剂论文文献综述
张明[1]（2010）在《胞外蛋白酶抑制剂基因expi对大鼠肝再生的作用研究》一文中研究指出胞外蛋白酶抑制剂基因expi编码的蛋白与蛋白酶活性的有关,并参与细胞的迁移和凋亡活动。本实验室的大鼠再生肝Rat Genome 230 2.0芯片检测结果表明,expi在大鼠2/3肝切除后6h起始表达,6-72h持续表达上调,并在30h达到表达高峰,是对照的33倍。但目前还没有人研究其在肝再生中的功能,而作为重要生命活动的肝再生也涉及蛋白质降解,细胞迁移和凋亡等生理生化活动,了解该基因在肝再生中的功能,有助于揭示肝再生分子机制。为此,本文挑选出基因expi,以Higgins等建立的大鼠2/3肝切除模型做为研究对象,利用大鼠尾静脉液压转基因技术,通过基因添加和RNA干涉的方法,研究expi在大鼠肝再生中的作用。根据expi的基因序列设计引物并克隆该基因,同时设计其两条RNA干涉片段,然后进行载体的构建。将上述测序正确的基因及其干涉片段连接到不同的载体上,构建叁套载体:一套是表达载体pEGFP-N1-expi,用于基因添加实验;另一套是干涉载体,包括pGenesil-1.0-E6和pGenesil-1.0-E147,用于干涉目的基因的实验;最后一套是检验载体,包括pGenesil-1.0-E6-expi,pGenesil-1.0-E147-expi和pGenesil-1.0-HK-expi,用于检验设计的两条干涉片段是否对靶基因产生干涉作用。将构建的叁条检验载体分别进行尾静脉液压转基因操作,通过观察转干涉检验载体的绿色荧光蛋白阳性细胞率(转染率)相较对照检验载体是否有明显减少,来判断设计的干涉片段是否对靶位点具有干涉作用。将表达载体和干涉载体分别进行液压转基因操作,分别在转基因后6、12、24、36、48、60、72和84h取材观察其绿色荧光蛋白阳性细胞率、通过统计分析得出各载体在大鼠肝脏组织中表达高峰的时间点,结合expi芯片检测结果,得出2/3肝切除后的最佳转基因时间。根据以上结果,利用2/3肝切除手术制备的大鼠肝再生模型和液压转基因技术展开expi对大鼠肝再生过程影响的研究。将制备好的转基因后的再生肝材料分别于2/3肝切除后72、120和168h取出,用荧光显微技术、统计学方法和常规组织学技术对死亡率、表达动力学、肝指数和组织形态结构等方面结果进行观察与分析。测序和电泳检测结果显示:基因expi克隆成功,其表达载体、干涉载体和检验载体构建成功。荧光观察结果表明,转检验载体pGenesil-1.0-E6-expi和pGenesil-1.0-E147-expi的绿色荧光蛋白阳性细胞率明显低于其对照载体pGenesil-1.0-HK-expi,这说明设计的两干涉片段对靶位点均具有干涉作用。转表达载体pEGFP-N1-expi和干涉载体pGenesil- 1.0-E6与pGenesil-1.0-E147后,统计分析阳性细胞率得出各载体在大鼠肝脏组织中表达高峰的时间点是转基因后12h,结合expi芯片检测结果,得出最佳转基因时间点是2/3肝切除后18h。肝指数检测结果表明,在进行expi基因添加时,肝指数高于对照;进行expi基因干涉时,肝指数则低于对照。总之,本文成功克隆了expi基因,并成功构建了其表达载体、干涉载体和检验载体,根据上述体内检测结果初步推测expi对大鼠肝再生有一定的影响,这为肝再生分子机理研究提供了资料。(本文来源于《河南师范大学》期刊2010-05-01）
席丽艳[2]（1989）在《培养基pH值和蛋白酶抑制剂对申克氏孢子丝菌胞外蛋白酶的活性及菌细胞生长的影响》一文中研究指出由申克氏孢子丝菌所致的感染较多见,主要引起慢性肉芽肿及溃疡。但此菌怎样侵入皮肤并致病尚不清楚。已知真菌感染如白念珠菌中菌细胞外蛋白酶的产生是入侵的重要因素。本病是否也与胞外蛋白酶的产生有关尚待证实。为此,作者以含白蛋白等不同成分的培养基培养本菌,获取了由酵母型细胞分泌的胞外蛋白酶纯品,并作了进一步研究。采用临床新分离株申克氏孢子丝菌经脑心浸汁培养基培养1周后,继续培养于适宜于2种蛋白酶(蛋白酶Ⅰ、Ⅱ)活性的3种不同 pH 的培养基中:(1)非缓冲培养基(pH5.0,均适宜于蛋白酶Ⅰ、Ⅱ的活性);(2)pH6.0的缓冲培养基(蛋白酶Ⅰ的最适 pH);(3)pH3.5的缓冲培养基(蛋白酶(本文来源于《国外医学.皮肤病学分册》期刊1989年06期）
胞外蛋白酶抑制剂论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
由申克氏孢子丝菌所致的感染较多见,主要引起慢性肉芽肿及溃疡。但此菌怎样侵入皮肤并致病尚不清楚。已知真菌感染如白念珠菌中菌细胞外蛋白酶的产生是入侵的重要因素。本病是否也与胞外蛋白酶的产生有关尚待证实。为此,作者以含白蛋白等不同成分的培养基培养本菌,获取了由酵母型细胞分泌的胞外蛋白酶纯品,并作了进一步研究。采用临床新分离株申克氏孢子丝菌经脑心浸汁培养基培养1周后,继续培养于适宜于2种蛋白酶(蛋白酶Ⅰ、Ⅱ)活性的3种不同 pH 的培养基中:(1)非缓冲培养基(pH5.0,均适宜于蛋白酶Ⅰ、Ⅱ的活性);(2)pH6.0的缓冲培养基(蛋白酶Ⅰ的最适 pH);(3)pH3.5的缓冲培养基(蛋白酶
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胞外蛋白酶抑制剂论文参考文献
[1].张明.胞外蛋白酶抑制剂基因expi对大鼠肝再生的作用研究[D].河南师范大学.2010
[2].席丽艳.培养基pH值和蛋白酶抑制剂对申克氏孢子丝菌胞外蛋白酶的活性及菌细胞生长的影响[J].国外医学.皮肤病学分册.1989
标签：大鼠; 肝再生; 胞外蛋白酶抑制剂(expi); RNA干扰;