本文主要研究内容
作者李翠丽（2019）在《高糖胁迫下产甘油假丝酵母细胞质膜抗逆应答机制的初步研究》一文中研究指出：产甘油假丝酵母（Candida glycerinogenes）具有抗逆性强、糖代谢迅速、目标产物转化率高等特点,特别是在500 g·L-1的高葡萄糖浓度下仍可维持很好的发酵性能,是一株可应用于节能环保浓醪发酵的渗透压工业酵母。酵母细胞质膜是其与外界环境进行物质能量交换和信号传递的重要场所,在胁迫压力下会发生一系列的动态应答,与此相关的理论机制可为指导实际生产提供重要的科学依据。本研究在建立了一种适合C.glycerinogenes质膜提取方法的基础上,对其高糖胁迫下质膜的组成和相关基因的全局转录应答机制展开研究,主要结果如下:（1）采用先制备原生质体、再低渗裂解获得粗膜提取物、最后双水相分离纯化细胞质膜的策略,优化了原生质体的制备方法和粗膜的两相分离纯化体系,得到一种适合于C.glycerinogenes的高效质膜提取方法,优化后质膜纯度平均可达65%以上。（2）研究发现,C.glycerinogenes在高浓度葡萄糖胁迫下,细胞质膜中的不饱和脂肪酸（特别是油酸）和麦角固醇的相对含量显著增加,而细胞质膜的流动性和通透性出现不同程度的降低。因此,C.glycerinogenes细胞质膜在高糖胁迫下通过增加油酸的含量来稳固细胞质膜的流动性,通过增加麦角固醇的含量来维持质膜稳态。（3）利用RNA-Seq测序技术考察高糖胁迫下C.glycerinogenes细胞质膜相关基因的全局转录应答情况,结果发现:获得了85个质膜相关差异显著表达基因,其中68个上调,17个下调;麦角固醇合成相关基因ERG6、ERG2、ERG3、ERG5、ERG4显著上调,这与麦角固醇含量增加的结果相符合;不饱和脂肪酸合成途径中大部分基因显著上调;1个葡萄糖转运蛋白基因的差异表达倍数最高（log2=9.55）;糖脂合成、MAPK途径、mTOR途径的差异基因均显著上调。此外,受HOG途径调控的甘油合成关键基因GPD1没有上调,而模式菌株酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）在高糖胁迫下更多依赖于胞内甘油的合成。综上说明C.glycerinogenes在高糖胁迫下更多依赖于细胞质膜和细胞生长相关基因的调控应答。（4）在RNA-Seq测序结果的基础上,利用RT-qPCR、基因过表达、异源表达和重组菌株的高糖耐受性测试等方法挖掘了6个高糖抗逆性能较好的C.glycerinogenes细胞质膜相关基因。它们分别是葡萄糖转运蛋白Cg2615（A0A1V2LT11）和Cg5001（A0A2U9R987）、推定的细胞色素P450基因Cg4756（A9YUC7）、被编码具有C-5甾醇去饱和酶活性的Cg3824（A0A099P0V3）、编码具有甘露糖基转移酶活性的Cg2914（A0A099P2M9）和推定的尿素跨膜转运蛋白Cg2071（A0A1Z8JUV2）。这6个基因均可提高S.cerevisiae的高糖耐受性,为工程菌株的改造提供了基因来源。
Abstract
chan gan you jia si jiao mu （Candida glycerinogenes）ju you kang ni xing jiang 、tang dai xie xun su 、mu biao chan wu zhuai hua lv gao deng te dian ,te bie shi zai 500 g·L-1de gao pu tao tang nong du xia reng ke wei chi hen hao de fa jiao xing neng ,shi yi zhu ke ying yong yu jie neng huan bao nong lao fa jiao de shen tou ya gong ye jiao mu 。jiao mu xi bao zhi mo shi ji yu wai jie huan jing jin hang wu zhi neng liang jiao huan he xin hao chuan di de chong yao chang suo ,zai xie pai ya li xia hui fa sheng yi ji lie de dong tai ying da ,yu ci xiang guan de li lun ji zhi ke wei zhi dao shi ji sheng chan di gong chong yao de ke xue yi ju 。ben yan jiu zai jian li le yi chong kuo ge C.glycerinogeneszhi mo di qu fang fa de ji chu shang ,dui ji gao tang xie pai xia zhi mo de zu cheng he xiang guan ji yin de quan ju zhuai lu ying da ji zhi zhan kai yan jiu ,zhu yao jie guo ru xia :（1）cai yong xian zhi bei yuan sheng zhi ti 、zai di shen lie jie huo de cu mo di qu wu 、zui hou shuang shui xiang fen li chun hua xi bao zhi mo de ce lve ,you hua le yuan sheng zhi ti de zhi bei fang fa he cu mo de liang xiang fen li chun hua ti ji ,de dao yi chong kuo ge yu C.glycerinogenesde gao xiao zhi mo di qu fang fa ,you hua hou zhi mo chun du ping jun ke da 65%yi shang 。（2）yan jiu fa xian ,C.glycerinogeneszai gao nong du pu tao tang xie pai xia ,xi bao zhi mo zhong de bu bao he zhi fang suan （te bie shi you suan ）he mai jiao gu chun de xiang dui han liang xian zhe zeng jia ,er xi bao zhi mo de liu dong xing he tong tou xing chu xian bu tong cheng du de jiang di 。yin ci ,C.glycerinogenesxi bao zhi mo zai gao tang xie pai xia tong guo zeng jia you suan de han liang lai wen gu xi bao zhi mo de liu dong xing ,tong guo zeng jia mai jiao gu chun de han liang lai wei chi zhi mo wen tai 。（3）li yong RNA-Seqce xu ji shu kao cha gao tang xie pai xia C.glycerinogenesxi bao zhi mo xiang guan ji yin de quan ju zhuai lu ying da qing kuang ,jie guo fa xian :huo de le 85ge zhi mo xiang guan cha yi xian zhe biao da ji yin ,ji zhong 68ge shang diao ,17ge xia diao ;mai jiao gu chun ge cheng xiang guan ji yin ERG6、ERG2、ERG3、ERG5、ERG4xian zhe shang diao ,zhe yu mai jiao gu chun han liang zeng jia de jie guo xiang fu ge ;bu bao he zhi fang suan ge cheng tu jing zhong da bu fen ji yin xian zhe shang diao ;1ge pu tao tang zhuai yun dan bai ji yin de cha yi biao da bei shu zui gao （log2=9.55）;tang zhi ge cheng 、MAPKtu jing 、mTORtu jing de cha yi ji yin jun xian zhe shang diao 。ci wai ,shou HOGtu jing diao kong de gan you ge cheng guan jian ji yin GPD1mei you shang diao ,er mo shi jun zhu niang jiu jiao mu （Saccharomyces cerevisiae）zai gao tang xie pai xia geng duo yi lai yu bao nei gan you de ge cheng 。zeng shang shui ming C.glycerinogeneszai gao tang xie pai xia geng duo yi lai yu xi bao zhi mo he xi bao sheng chang xiang guan ji yin de diao kong ying da 。（4）zai RNA-Seqce xu jie guo de ji chu shang ,li yong RT-qPCR、ji yin guo biao da 、yi yuan biao da he chong zu jun zhu de gao tang nai shou xing ce shi deng fang fa wa jue le 6ge gao tang kang ni xing neng jiao hao de C.glycerinogenesxi bao zhi mo xiang guan ji yin 。ta men fen bie shi pu tao tang zhuai yun dan bai Cg2615（A0A1V2LT11）he Cg5001（A0A2U9R987）、tui ding de xi bao se su P450ji yin Cg4756（A9YUC7）、bei bian ma ju you C-5zai chun qu bao he mei huo xing de Cg3824（A0A099P0V3）、bian ma ju you gan lou tang ji zhuai yi mei huo xing de Cg2914（A0A099P2M9）he tui ding de niao su kua mo zhuai yun dan bai Cg2071（A0A1Z8JUV2）。zhe 6ge ji yin jun ke di gao S.cerevisiaede gao tang nai shou xing ,wei gong cheng jun zhu de gai zao di gong le ji yin lai yuan 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自陕西理工大学的李翠丽，发表于刊物陕西理工大学2019-07-06论文，是一篇关于高糖论文,产甘油假丝酵母论文,质膜论文,抗逆应答论文,陕西理工大学2019-07-06论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自陕西理工大学2019-07-06论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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