王永维勾丽平刘洋
（重庆市涪陵中心血站408000）
【摘要】目的对同一新鲜冰冻血浆在去冷沉淀前后的总蛋白含量变化进行分析，探讨此类血液制是否适用于临床蛋白补充或作为行业质量标准制定的数据来源。方法用33袋新鲜冰冻血浆和将其制作去冷沉淀后的血浆，进行分别留取标本检测其中总蛋白含量。结果去冷沉淀冰冻血浆的总蛋白含量明显低于同源新鲜冰冻血浆（p＜0.001）。结论新鲜冰冻血浆在去冷沉淀后制备的冰冻血浆不适合临床作蛋白补充使用。
【关键词】新鲜冰冻血浆去冷沉淀血浆总蛋白含量
【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）08-0010-02
目前新鲜冰冻血浆去冷沉淀后的冰冻血浆主要用于血栓性血小板减少性紫癜[1]，但由于临床现在各类冰冻血浆产品的用量急剧增加，为了最大限度的满足临床，有的采供血机构便将新鲜冰冻血浆制备冷沉淀后的血浆作为普通冰冻血浆常规利用。质量抽检便执行普通冰冻血浆的要求，而普通冰冻血浆的质量控制指标中，只对血浆总蛋白的含量有要求[2]。所以，通过比较新鲜冰冻血浆在去冷沉淀前后的总蛋白含量，讨论去冷沉淀后的冰冻血浆是否适合临床作为补充蛋白使用；或者将检测结果作为数据来源，探讨此类冰冻血浆质量标准的重新制定。
1.检测设备
1.1加样设备：移液器1ul～1000ul，德国eppendorf公司。
1.2孵育设备：HHW21600型电子恒温水箱，上海科析试验仪器厂。
1.3检测设备：eppendorf6124型半自动生化分析仪，德国eppendorf公司。
2.检测试剂
2.1成品总蛋白检测试剂，四川迈克生物科技股份公司，批号：1011031
3.检测方法与结果
3.1操作步骤
3.1.1血浆的制备：将传染病指标检测合格的血液，采集后6小时内，按新鲜冰冻血浆的制备方法，离心、速冻成为新鲜冰冻血浆，将新鲜冰冻血浆放置于2℃～6℃冰箱中，待自然融化后取血浆作为去冷沉淀前新鲜冰冻血浆标本。再将袋中的血浆在2℃～6℃的条件下经4000r/min、15min离心，停机后轻轻取出。在分浆夹上将大部分血浆上层移至转移袋内,制成冰冻血浆，作为去冷沉淀后的冰冻血浆标本。
3.1.2将按以上方法制作的33例新鲜冰冻血浆、去冷沉淀后的普通冰冻血浆分别取样，按试剂说明书操作检测其中的总蛋白含量。
3.2检测结果与分析
3.2.1统计学处理
将两组血浆所测的总蛋白含量进行比较，求各组的均值与标准差，作配对t检验。并对制作前后蛋白含量的合格率、降低率统计比较，或指导质控标准的制定。
表1新鲜冰冻血浆去冷沉淀前后总蛋白含量检测结果
种类蛋白含量均值（g）合格率（%）SD值差值均值差值
SD值降低率（%）
新鲜冰冻血浆（n=33）50.0299.047.834.767.5510.36
去冷沉淀后冰冻血浆（n=33）44.3988.786.32
3.2.2结果：将结果作统计学分析p≤0.001，说明去冷沉淀前后的血浆中总蛋白含量有显著差异。去冷沉淀后的冰冻血浆平均总蛋白含量合格率为88.78%，制作前后的蛋白含量下降率为10.36%。
4.讨论
4.1从检查结果看，同一袋新鲜冰冻血浆在去冷沉淀前后的总蛋白含量有显著差异。而且，以《全血及成分血质量标准》（GB-16489）要求，总蛋白含量≥50g为合格，则去冷沉淀后的冰冻血浆总蛋白品平均含量为44g左右，也不符合质量要求。
4.2在制备冷沉淀时，新鲜冰冻血浆是在自然解冻条件下融化后分离，将剩余的血浆再冰冻制作为冰冻血浆，反复冻融是否会影响其中的蛋白质或其他临床输注质量，还需要大量的临床试验说明。
4.3在制作冷沉淀时，分离是采用的重离心，可能会随冷沉淀的分离而带走冰冻血浆中的一部分蛋白，导致去冷沉淀后冰冻血浆中的总蛋白含量下降率明显。
4.4目前采供血机构在对普通冰冻血浆进行质量抽检时，对该项目只要求75%的抽检结果落在质量控指标范围内，可以认为血液采集和制备过程受控[3]。从该批检测样本看，去冷沉淀后的血浆中蛋白含量合格率为88.78%，可以认为采集和制备过程是受控的，但与去冷沉淀前的同源血浆中蛋白含量合格率为99.04%的差别太大。如果将这类产品等同普通冰冻血浆应用于临床补充蛋白使用，可能会因蛋白含量不足而使输注量加大，才能满足受血者的需要，这样就会增加输血的风险。
4.5从此类产品的生产过程看，采集的全血在制备新鲜冰冻血浆时会损失一部份血浆，制备冷沉淀又会分一部份血浆，这样血液采集时只有按要求的上限采，否则会导致去冷沉淀后冰冻血浆的容量不足，或只能分为小包装血浆（如100ml）才能符合容量标准。这些措施要么影响献血者利益，要么就增加受血者的输血风险。
4.6笔者认为还应该调查本地区的献血者总体的血浆蛋白含量水平，制定相应的内控标准。如果此区域内总体水平较高，而按10%左右的下降率，在去冷沉淀后血浆中的蛋白含量还是能达到国家质量控制标准。如果此区域的总体水平本身就不高，再降低10%左右就达不到质控标准，或许就应该制定针对此类产品的质量标准。
如果为了节约血液而利用这类产品，就应该通过对产的成分、含量、临床应用效果和影响监测等情况数据分析后，确定其适用于临床的其他成分和含量控制标准，而不能直接等同普通冰冻血浆标识使用。[4]只有根据实际情况，制定合理的质量标准和有效使用标准，才能更大限度地节约血源和保证临床输血质量。
参考文献
[1]庄文，陈镇奇，林昂等，去冷沉淀血浆与普通血浆临床应用价值的比较[J]，临床输血与检验,2009，11（3）：224-226.
[2]中华人民共和国卫生部、中国国家标准化管理委员会，《全血及成分血质量要求》[S]2012版.
[3]中华人民共和国卫生部医政司，《血站技术操作规程》[S]2012版.
[4]刘晓洋，李小阳，去冷沉淀血浆与普浆的质量对比分析[J]，临床输血与检验，2012,2:158-160.