本文主要研究内容
作者李若兰（2019）在《MiR-3031通过靶基因POU2F3调控奶山羊乳腺发育的研究》一文中研究指出：microRNAs是一类短的,高度保守的非编码RNA,可调节基因的表达。MiR-3031作为一个功能性miRNA,参与调节奶山羊乳腺发育和泌乳等多种重要的生物学过程。本试验旨在研究POU2F3和miR-3031在奶山羊乳腺上皮细胞中的靶向关系及其功能,为奶山羊乳腺发育和泌乳提供理论依据。通过RT-qPCR,Western blot和构建双荧光素酶报告载体验证miR-3031与POU2F3的靶向调节作用。生物信息学分析表明,POU2F3的3’UTR区包含miR-3031的结合位点。同时,miR-3031降低了PsiCHECKTM2-POU2F3 3’UTR-wt的双荧光素酶活性。RT-qPCR和Western blot结果显示,与对照组NC相比,miR-3031 mimics显著降低POU2F3的mRNA和蛋白水平的表达;结果表明POU2F3是miR-3031的靶基因。转染miR-3031 24h、48h后CCK8检测miR-3031对奶山羊乳腺上皮细胞活力的影响。结果显示,miR-3031 mimic显著提高奶山羊乳腺上皮细胞的活力。转染siPOU2F3 24h后EDU检测奶山羊乳腺上皮细胞增殖的情况,结果显示,干扰POU2F3显著促进奶山羊乳腺上皮细胞的增殖。将siPOU2F3和si-NC转染到乳腺上皮细胞中,进一步研究POU2F3对奶山羊乳腺上皮细胞凋亡的作用机理。流式结果表明,siPOU2F3显著抑制奶山羊乳腺上皮细胞凋亡。同时,siPOU2F3显著抑制Bcl-2和Bax蛋白的表达,上调Bcl-2/Bax的比率;同时,检测AKT和mTOR的磷酸化水平。结果表明,siPOU2F3显著上调了AKT、mTOR的磷酸化水平和PTEN的蛋白水平以及显著下调PI3K蛋白的表达。综上所述,miR-3031靶向POU2F3通过AKT/mTOR信号通路促进奶山羊乳腺上皮细胞增殖,抑制凋亡。
Abstract
microRNAsshi yi lei duan de ,gao du bao shou de fei bian ma RNA,ke diao jie ji yin de biao da 。MiR-3031zuo wei yi ge gong neng xing miRNA,can yu diao jie nai shan yang ru xian fa yo he bi ru deng duo chong chong yao de sheng wu xue guo cheng 。ben shi yan zhi zai yan jiu POU2F3he miR-3031zai nai shan yang ru xian shang pi xi bao zhong de ba xiang guan ji ji ji gong neng ,wei nai shan yang ru xian fa yo he bi ru di gong li lun yi ju 。tong guo RT-qPCR,Western blothe gou jian shuang ying guang su mei bao gao zai ti yan zheng miR-3031yu POU2F3de ba xiang diao jie zuo yong 。sheng wu xin xi xue fen xi biao ming ,POU2F3de 3’UTRou bao han miR-3031de jie ge wei dian 。tong shi ,miR-3031jiang di le PsiCHECKTM2-POU2F3 3’UTR-wtde shuang ying guang su mei huo xing 。RT-qPCRhe Western blotjie guo xian shi ,yu dui zhao zu NCxiang bi ,miR-3031 mimicsxian zhe jiang di POU2F3de mRNAhe dan bai shui ping de biao da ;jie guo biao ming POU2F3shi miR-3031de ba ji yin 。zhuai ran miR-3031 24h、48hhou CCK8jian ce miR-3031dui nai shan yang ru xian shang pi xi bao huo li de ying xiang 。jie guo xian shi ,miR-3031 mimicxian zhe di gao nai shan yang ru xian shang pi xi bao de huo li 。zhuai ran siPOU2F3 24hhou EDUjian ce nai shan yang ru xian shang pi xi bao zeng shi de qing kuang ,jie guo xian shi ,gan rao POU2F3xian zhe cu jin nai shan yang ru xian shang pi xi bao de zeng shi 。jiang siPOU2F3he si-NCzhuai ran dao ru xian shang pi xi bao zhong ,jin yi bu yan jiu POU2F3dui nai shan yang ru xian shang pi xi bao diao wang de zuo yong ji li 。liu shi jie guo biao ming ,siPOU2F3xian zhe yi zhi nai shan yang ru xian shang pi xi bao diao wang 。tong shi ,siPOU2F3xian zhe yi zhi Bcl-2he Baxdan bai de biao da ,shang diao Bcl-2/Baxde bi lv ;tong shi ,jian ce AKThe mTORde lin suan hua shui ping 。jie guo biao ming ,siPOU2F3xian zhe shang diao le AKT、mTORde lin suan hua shui ping he PTENde dan bai shui ping yi ji xian zhe xia diao PI3Kdan bai de biao da 。zeng shang suo shu ,miR-3031ba xiang POU2F3tong guo AKT/mTORxin hao tong lu cu jin nai shan yang ru xian shang pi xi bao zeng shi ,yi zhi diao wang 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自西北农林科技大学的李若兰，发表于刊物西北农林科技大学2019-07-11论文，是一篇关于奶山羊论文,基因表达论文,上皮细胞论文,调节论文,西北农林科技大学2019-07-11论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自西北农林科技大学2019-07-11论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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