常见微生物感染的血清学检测
宋维艳(黑龙江省青冈县中医院黑龙江青冈151600)
【中图分类号】R446.11【文献标识码】B【文章编号】1672-5085(2008)21-0105-02
常见的微生物感染的血清学检测在临床上具有很重要的意义，我院自2005年1月至2007年12月检测的许多病例中，均证实辽一点，现报告如下：
1.甲型肝炎酶联免疫吸附试验
甲型肝炎的传染源主要为患者及带病毒者，病毒通过污染的手、水、食物及食具经口传染。甲型肝炎抗原为27mμm大小的病毒颗粒可采用ELISA法从患者粪便中测得。抗甲肝病毒抗体常出现于患者早期血清中，通常也是采用ELISA法检测。
1.1正常参考值阴性。
1.2临床意义ELISA检出粪便中甲型肝炎抗原的时间比免疫电镜早2天，在疾病恢复期，当电镜仍为阳性时，ELISA提早两天转为阴性。采用粪便悬液作为抗原，检测血清中抗-HAVIgM抗体时，ELISA滴度比免疫粘附血凝试验高2～10倍。早期单份血清抗-HAVIgM抗体ELISA效价显著升高，或双份血清抗-HAV抗体效价递增者即可确诊。正常人为阴性，S<2.1N，阳性S≥2.1N。
2.乙型肝炎三种抗原、抗体系统检测
乙型病毒性肝炎简称乙型肝炎，由乙型肝炎病毒感染引起的，是威胁人类健康最重要的传染病之一。现能分别测定血清中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）、乙型肝炎核心抗原（HBcAg）及抗-HBs、抗-HBe和抗-HBc抗体。
乙型肝炎病毒属于嗜肝病毒族，具有独特的基因结构。HBV是迄今为止所发现的感染人类最小的DNA病毒。电镜下乙肝患者血清中可发现三种形态的病毒颗粒，即直径为42nm的Dane颗粒；直径22nm的圆形颗粒，以及直径22nm，长度为50～230nm不等的管形颗粒；以球形颗粒含量最高，Dane颗粒最少。Dane颗粒即完整的病毒颗粒，有双层脂蛋白外膜包裹核心。核心由核壳蛋白包裹双链DNA分子。球形和管形颗粒则只含病毒外壳蛋白，无病毒核心成分。Dane颗粒是完整的乙型肝炎病毒，其外壳部分称HBsAg；核心部分称乙型肝炎核心抗原（HBcAg），小球形颗粒和管形颗粒由众多小球形颗粒集合而成，只含表面抗原，不具有感染性的核心部分，故能诱发对乙型肝炎感染有保护作用的抗表面抗原的抗体（Anti-HBs），核心抗原能产生抗核心抗原的抗体（Anti-HBc），此种抗体可存在于体内多年，检出此抗体，提示病毒尚在复制或曾受感染而已康复。此外，还有e抗原（HBeAg）和e抗体（Anti-Hbe）。HBeAg阳性血清常伴有DNA多聚酶升高，是乙型肝炎病毒的复制指标。E抗原持续阳性者，病程呈慢性化，肝脏受损越重，传染性较强，e抗体阳性者，肝脏病变较轻，预后较好，无传染性或传染性很小。
2.1临床意义
2.1.1乙型肝炎表面抗原及表面抗体HBsAg为乙肝患者血清首先出现的病毒标志物，可作为乙肝早期诊断和普查项目。HBsAg阳性与其他标志物联合检测可诊断HBsAg携带者、急性
乙型肝炎潜伏期、急性和慢性肝炎患者以及与HBV有关的肝硬化或肝癌。HBsAg阴性不能完全排除乙型肝炎。血清中同时出现HBsAg和抗-HBs可能是不同亚型重复感染，即原先存在的抗-HBs不能对另一型HBsAg起中和作用。无论急慢性肝炎和HBsAg携带者，只要在血中和其他体液中含有Dane颗粒，且有密切接触就有传染的可能性。如果单个HBsAg阳性者，则无传染性。抗-HBs阳性提示急性感染后康复，在发病后抗-HBs转为阳性或效价显著升高，亦有诊断乙型肝炎价值。临床上一般认为，抗-HBs是一种免疫保护性抗体，少数抗-HBs阳性感染者可以形成免疫复合物，但伴有高滴度抗-HBs者，不能排除肝脏有持续性HBV感染的可能。在接受抗-HBs阳性血液的受血者可出现短暂的抗-HBs阳性。接受HBV疫苗接种后，血中可检出抗-HBs阳性，接受乙肝疫苗接种能否检出抗-HBs，也是衡量乙肝疫苗质量的主要指标。抗-HBs和HBsAg同时阳性可见于暴发性肝炎和慢性活动性肝炎，此类病人为免疫功能低下或异亚型感染，如同时抗-HBc阳性则应注意预后和发展。
2.1.2乙型肝炎核心抗原和核心抗体HBcAg存在于肝细胞核内，血清中一般不能检出。HBcAg在HBV感染中占有重要地位。它能反映血清中Dane颗粒的存在及肝内HBV的复制，并可与其他的HBV血清学标志物起互相配合和互相补充的作用。核心抗体包括IgM和IgG两种，目前常指的抗-HBc为总抗体（包括IgG，IgM），感染HBV后，继血清中HBsAg阳转后，早期出现的标志物即为抗-HBc，抗-HBc常出现于症状未暴露前，且在肝炎的早期呈高滴度，但是使用某些免疫抑制剂或无丙种球蛋白血症患者血清中也有测不出抗-HBc，高滴度的抗-HBc具有传染性。正常人HBcAg阴性，S<2.1N（SPRIA）；抗-HBc血清阴性，S<0.5N（SPRIA）。
HBcAg阳性可以作为乙肝传染性活动性病变的标志，HBsAg，HBcAg，抗-HBc等指标是体内存在乙型肝炎病毒颗粒的间接标志，而HBcAg则是乙肝病毒存在的直接标志。血清HBcAg更能反映乙肝病毒的存在。血清HBcAg与HBV复制标志HBV-DNA呈正相关，可以反映HBV活动的复制程度。同时阳性结果也提示，HBcAg感染的肝细胞是细胞免疫效应攻击的靶细胞，肝细胞溶解后HBcAg可直接释放入血，故能直接反映肝细胞损害和病情进展的程度。同时该项目检测也可以反映药物的疗效。抗-HBc检测提高了HBV感染的检出率，在成人的HBV感染中，
70%呈自限性感染，表现为一过性HBsAg阳性，23%未检出HBsAg，但可以出现原发性抗-HBs和抗-HBc，抗-HBc高滴度为肝内HBV复制指标，低滴度为既往感染。抗-HBc是急性乙型肝炎的唯一标志，此时称为“窗口期”或“核心窗口”，高滴度的抗-HBc对乙肝的诊断极有诊断意义。对献血员的筛选，单纯测HBsAg是不够的，只有和抗-HBc同时检测，才能更好地筛选献血员。
2.1.3乙型肝炎e抗原和e抗体乙型肝炎e抗原是一种可溶性球蛋白，多存在于HBsAg阳性血清中，HBsAg阴性的标本中，很少有HBeAg阳性。体机在HBeAg刺激下产生e抗体，存在于恢复期病人血清中，无症状的HBsAg携带者可长期存在。正常人：HBeAg血清为阴性，S<2.1N（SPRIA），e抗体：血清为阴性，S<0.5N（SPRIA）。
HBeAg阳性是乙肝传染性的标志，HBsAg滴度愈高，HBeAg检出率也愈高。HBeAg和HBV复制成正比，也和肝脏损伤成正比，HBeAgDNA聚合酶和血中Dane颗粒三者之间也极有明显的平行关系，与HBV-DNA有显著相关性。HBeAg消失和抗-Hbe出现提示肝炎病情好转，抗-Hbe阳性可显示病情好转，但不能作为无传染性标志。
3.丙型肝炎病毒
丙型肝炎由丙型肝炎病毒感染引起，HCV为直径36～62nm的单链RNA病毒。HCV基因组是由10000个核苷组成，具有一个持续的开放读码框架。丙型肝炎主要经血液和血制品传播，病人于发病前两周，其血液即有传染性，并可持续携带病毒数年和数十年。丙型肝炎患者约占急性病毒性肝炎1/4，且较乙肝更易发展为慢性，继而发展为肝硬化和肝癌。检测血清中丙型肝炎病毒抗体对丙型肝炎有较高的诊断价值。
3.1正常参考值血清阴性：S<2.1N（ELISA，SPRIA）。
3.2临床意义抗-HCV检测对丙型肝炎特别是慢性丙型肝炎、肝硬化诊断有重要价值。对献血员的筛选，在筛选过程中发现ALT增高或抗-HBc增高者，抗-HCV阳性概率升高，用ALT和抗-HBc筛选献血员可使输血后非甲非乙型肝炎减少40%～50%，如再加上抗-HCV检测，则可减少80%～90%。抗-HCV检测还有助于丙型肝炎亚临床型或隐性感染者诊断。丙型肝炎病毒亚临床感染主要表现为单项ALT升高，但无症状和体征，而抗-HCV则为阳性。