本文主要研究内容
作者乌月汗（2019）在《人脂肪干细胞（ADSCs）的分离培养及多向分化潜能研究》一文中研究指出：本研究在标准化cGMP条件下从人体脂肪组织分离获得脂肪干细胞(Adipose-derived Stem Cells,ADSCs),并在无血清培养条件下大规模扩增培养,并对获得的细胞质量进行标准化鉴定及功能验证。建立无分化、大规模扩增培养,预期形成一套国际标准培养体系。在密闭运输脂肪抽吸物至实验室,实验中采用酶消化法及差速离心方法分离得到基质血管分离段(Stromal Vascular Fraction,SVF),差速贴壁方法纯化ADSCs,并在所配制的无血清培养基中扩增培养。采用流式检测鉴定脂肪干细胞(ADSCs)表面标记物。取第三代ADSCs细胞培养于6孔板之内,用含有脂肪分化、成骨分化和软骨分化诱导剂的培养基中分别进行诱导分化2-3周时间,并分别用2%油红染色剂、茜素红染色剂及用阿利新蓝冰醋酸染色剂分别染色鉴定其细胞分化状况。在实验中我们分离纯化所得到的细胞在无血清培养条件下稳定培养至10代以上时并无出现分化现象,细胞形态呈细、短、小梭形、细胞饱满、大小均一且漩涡状生长。细胞培养密度为5000/cm~2时,倍增时间为20-25 h,细胞直径范围在16-20μm时细胞生长活力强,无衰老现象。而流式实验结果显示ADSCs细胞的表型特征非常一致,90%以上ADSCs具有间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)表面标记物CD90,CD105,CD44,CD73,CD146,CD166及CD29。ADSCs还与成纤维细胞和周细胞共同的细胞表面抗原,ADSCs低表达造血系干细胞标记物(CD45,HLA-DR)和内皮标记物(CD31)。脂肪干细胞免疫表型统一,表明得到高纯度脂肪干细胞,并具备MSC表型特征。ADSCs定向诱导分化实验结果显示,细胞在含有脂肪细胞、成骨细胞及成软骨细胞分化诱导剂的培养基中成功分化为所预期的目的细胞。我们成功分离纯化ADSCs并建立了原代培养体系,所得到的ADSCs细胞具有良好的形态学特征与优异的免疫表型。ADSCs具备定向分化为成脂肪、成骨及成软骨细胞的分化潜能。
Abstract
ben yan jiu zai biao zhun hua cGMPtiao jian xia cong ren ti zhi fang zu zhi fen li huo de zhi fang gan xi bao (Adipose-derived Stem Cells,ADSCs),bing zai mo xie qing pei yang tiao jian xia da gui mo kuo zeng pei yang ,bing dui huo de de xi bao zhi liang jin hang biao zhun hua jian ding ji gong neng yan zheng 。jian li mo fen hua 、da gui mo kuo zeng pei yang ,yu ji xing cheng yi tao guo ji biao zhun pei yang ti ji 。zai mi bi yun shu zhi fang chou xi wu zhi shi yan shi ,shi yan zhong cai yong mei xiao hua fa ji cha su li xin fang fa fen li de dao ji zhi xie guan fen li duan (Stromal Vascular Fraction,SVF),cha su tie bi fang fa chun hua ADSCs,bing zai suo pei zhi de mo xie qing pei yang ji zhong kuo zeng pei yang 。cai yong liu shi jian ce jian ding zhi fang gan xi bao (ADSCs)biao mian biao ji wu 。qu di san dai ADSCsxi bao pei yang yu 6kong ban zhi nei ,yong han you zhi fang fen hua 、cheng gu fen hua he ruan gu fen hua you dao ji de pei yang ji zhong fen bie jin hang you dao fen hua 2-3zhou shi jian ,bing fen bie yong 2%you gong ran se ji 、qian su gong ran se ji ji yong a li xin lan bing cu suan ran se ji fen bie ran se jian ding ji xi bao fen hua zhuang kuang 。zai shi yan zhong wo men fen li chun hua suo de dao de xi bao zai mo xie qing pei yang tiao jian xia wen ding pei yang zhi 10dai yi shang shi bing mo chu xian fen hua xian xiang ,xi bao xing tai cheng xi 、duan 、xiao suo xing 、xi bao bao man 、da xiao jun yi ju xuan guo zhuang sheng chang 。xi bao pei yang mi du wei 5000/cm~2shi ,bei zeng shi jian wei 20-25 h,xi bao zhi jing fan wei zai 16-20μmshi xi bao sheng chang huo li jiang ,mo cui lao xian xiang 。er liu shi shi yan jie guo xian shi ADSCsxi bao de biao xing te zheng fei chang yi zhi ,90%yi shang ADSCsju you jian chong zhi gan xi bao (Mesenchymal Stem Cells,MSCs)biao mian biao ji wu CD90,CD105,CD44,CD73,CD146,CD166ji CD29。ADSCshai yu cheng qian wei xi bao he zhou xi bao gong tong de xi bao biao mian kang yuan ,ADSCsdi biao da zao xie ji gan xi bao biao ji wu (CD45,HLA-DR)he nei pi biao ji wu (CD31)。zhi fang gan xi bao mian yi biao xing tong yi ,biao ming de dao gao chun du zhi fang gan xi bao ,bing ju bei MSCbiao xing te zheng 。ADSCsding xiang you dao fen hua shi yan jie guo xian shi ,xi bao zai han you zhi fang xi bao 、cheng gu xi bao ji cheng ruan gu xi bao fen hua you dao ji de pei yang ji zhong cheng gong fen hua wei suo yu ji de mu de xi bao 。wo men cheng gong fen li chun hua ADSCsbing jian li le yuan dai pei yang ti ji ,suo de dao de ADSCsxi bao ju you liang hao de xing tai xue te zheng yu you yi de mian yi biao xing 。ADSCsju bei ding xiang fen hua wei cheng zhi fang 、cheng gu ji cheng ruan gu xi bao de fen hua qian neng 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自内蒙古大学的乌月汗，发表于刊物内蒙古大学2019-08-13论文，是一篇关于脂肪干细胞论文,原代培养体系论文,免疫表型论文,分化潜能论文,内蒙古大学2019-08-13论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自内蒙古大学2019-08-13论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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