本文主要研究内容
作者张伟,刘秀霞,杨艳坤,白仲虎（2019）在《利用内源元件在谷氨酸棒杆菌中分泌表达木聚糖酶》一文中研究指出：以来自于谷氨酸棒杆菌内源AH6启动子和5′UTR及其前38 bp结合合适的Shine-Dalgarno (SD)序列,构建双顺反子表达载体对木聚糖酶进行表达。为了能够实现分泌表达,选取了来自谷氨酸棒杆菌的两种分泌途径的信号肽,分别为Tat型的CgR0949及Sec型的CspB信号肽。在实现分泌表达之后,对其进行5 L发酵罐的扩大培养以提高分泌量。并对纯化的木聚糖酶进行了部分酶学性质的研究,包括最适催化pH及酸碱耐受性;最适催化温度及热稳定性。结果表明:在上述表达体系中,以CgR0949为信号肽木聚糖酶不能分泌到胞外;木聚糖酶能在CspB信号肽的引导下分泌到胞外,分泌表达量为486.2 U/mL。木聚糖酶的分泌量在5 L发酵罐水平上达到1 648.7 U/mL,是摇瓶培养的3.4倍。该木聚糖酶的最适反应pH为4.5,最适温度为45℃;在pH 4–11范围内4℃处理24 h酶活保持在80%以上;在50℃前处理15 min酶活保持在95%以上,超过60℃则酶活迅速下降至20%及其以下。上述结果表明,谷氨酸棒杆菌内源元件能有效用于木聚糖酶的分泌表达,扩大培养能进一步提升木聚糖酶的分泌量。该双顺反子表达体系能为外源蛋白在谷氨酸棒杆菌中的分泌表达提供一种可用的工具。此外,通过酶学性质的研究可进一步提高木聚糖酶的催化效率。
Abstract
yi lai zi yu gu an suan bang gan jun nei yuan AH6qi dong zi he 5′UTRji ji qian 38 bpjie ge ge kuo de Shine-Dalgarno (SD)xu lie ,gou jian shuang shun fan zi biao da zai ti dui mu ju tang mei jin hang biao da 。wei le neng gou shi xian fen bi biao da ,shua qu le lai zi gu an suan bang gan jun de liang chong fen bi tu jing de xin hao tai ,fen bie wei Tatxing de CgR0949ji Secxing de CspBxin hao tai 。zai shi xian fen bi biao da zhi hou ,dui ji jin hang 5 Lfa jiao guan de kuo da pei yang yi di gao fen bi liang 。bing dui chun hua de mu ju tang mei jin hang le bu fen mei xue xing zhi de yan jiu ,bao gua zui kuo cui hua pHji suan jian nai shou xing ;zui kuo cui hua wen du ji re wen ding xing 。jie guo biao ming :zai shang shu biao da ti ji zhong ,yi CgR0949wei xin hao tai mu ju tang mei bu neng fen bi dao bao wai ;mu ju tang mei neng zai CspBxin hao tai de yin dao xia fen bi dao bao wai ,fen bi biao da liang wei 486.2 U/mL。mu ju tang mei de fen bi liang zai 5 Lfa jiao guan shui ping shang da dao 1 648.7 U/mL,shi yao ping pei yang de 3.4bei 。gai mu ju tang mei de zui kuo fan ying pHwei 4.5,zui kuo wen du wei 45℃;zai pH 4–11fan wei nei 4℃chu li 24 hmei huo bao chi zai 80%yi shang ;zai 50℃qian chu li 15 minmei huo bao chi zai 95%yi shang ,chao guo 60℃ze mei huo xun su xia jiang zhi 20%ji ji yi xia 。shang shu jie guo biao ming ,gu an suan bang gan jun nei yuan yuan jian neng you xiao yong yu mu ju tang mei de fen bi biao da ,kuo da pei yang neng jin yi bu di sheng mu ju tang mei de fen bi liang 。gai shuang shun fan zi biao da ti ji neng wei wai yuan dan bai zai gu an suan bang gan jun zhong de fen bi biao da di gong yi chong ke yong de gong ju 。ci wai ,tong guo mei xue xing zhi de yan jiu ke jin yi bu di gao mu ju tang mei de cui hua xiao lv 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自生物工程学报的张伟,刘秀霞,杨艳坤,白仲虎，发表于刊物生物工程学报2019年03期论文，是一篇关于谷氨酸棒杆菌论文,木聚糖酶论文,双顺反子论文,分泌表达论文,生物工程学报2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自生物工程学报2019年03期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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