导读:本文包含了桦褐孔菌多糖论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:桦褐孔菌多糖,弓形虫,小鼠脾淋巴细胞,NF-κB
桦褐孔菌多糖论文文献综述
桑锐,于逸凡,葛冰洁,王政,周鸿缘[1]（2019）在《桦褐孔菌多糖对弓形虫感染小鼠脾淋巴细胞NF-κB/p-38 MAPK通路调控作用的研究》一文中研究指出[目的]弓形虫病的传统药物主要为磺胺类、大环内酯类等抗生素药物,虽然见效快,但长期使用易产生耐药性,易复发,对宿主的毒副作用也较大,新型抗弓形虫药物的研究和开发已成为兽医学研究热点。桦褐孔菌是一种药用真菌,具有抗癌,抗炎,增强免疫力等作用,其提取成分桦褐孔菌多糖(IOP)亦具有抗虫功效。本文试探究IOP对弓形虫感染小鼠脾淋巴细胞NF-κB/p-38MAPK通路的调控作用,为进一步了解IOP抗弓形虫的药物作用靶点和分子机制提供理论依据。[方法]通过CCK-8法确定IOP低、中、高剂量组的药物浓度,将不同浓度IOP给药于弓形虫感染的小鼠脾淋巴细胞,ELISA法检测炎性因子IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量,RT-PCR法检测上述炎性因子及趋化因子MIP-1、MCP-1 mRNA表达量,Western Blot法检测NF-κB/p38 MAPK通路关键蛋白p-p65、p-IκBα、p-p38的表达。[结果] CCK-8细胞毒性检测结果显示IOP在0～100μg/mL范围内无明显毒性作用,以12.5、25、50μg/mL药物浓度为IOP低、中、高剂量组的给药浓度;ELISA与RT-PCR试验结果显示,IOP可以下调弓形虫感染所致小鼠脾淋巴细胞炎性因子IL-1β、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ的含量和mRNA表达量以及趋化因子MIP-1、MCP-1 mRNA表达量,Western Blot检测结果得出IOP可以抑制p-p65、p-IκBα、p-p38蛋白的过度表达。[结论]综上结果提示,IOP可以通过调控小鼠脾淋巴细胞NF-κB/p-38通路影响炎性因子和趋化因子的分泌,从而抑制弓形虫感染所致的过度炎症反应,具有一定的抗弓形虫作用。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13）
赵鹏,张雪梅,贾立军[2]（2019）在《桦褐孔菌多糖对感染牛源犬新孢子虫孕鼠胎盘激素和细胞因子调节功能的影响》一文中研究指出[目的]观察桦褐孔菌多糖(Polysaccharide from Inonotus oblipuus,PIO)对感染牛源犬新孢子虫孕鼠胎盘激素和细胞因子调节功能的影响。[方法]雌性BALB/c小鼠50只随机分成正常组、模型组、PIO低剂量组(PIO-100)、PIO中剂量组(PIO-200)、PIO高剂量组(PIO-300)。建立BABL/c孕鼠牛源犬新孢子虫感染模型,在攻虫第12、14、16、18天分批处死孕鼠,采集孕鼠血清,制备孕鼠胎盘细胞悬液,采用ELISA方法检测PIO对牛源犬新孢子虫感染孕鼠血清中CG、PL、E3及ACH等胎盘激素水平,以及孕鼠胎盘细胞悬液中CRH、TGF-β、IGF-2等细胞因子水平的影响。[结果]模型组四个时间点血清中CG、PL、E3及ACH水平,胎盘细胞悬液中CRH、TGF-β、IGF-2水平,与正常组比较差异显着;PIO高剂量组可以使感染孕鼠PL、E3、ACH、IGF-2水平显着上调,CRH、TGF-β、CG水平趋向正常。[结论]PIO可以一定程度上纠正因牛源犬新孢子虫感染引起的孕鼠胎盘激素和细胞因子分泌紊乱,从而降低流产及死胎的发生。(本文来源于《中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十五次学术讨论会论文集》期刊2019-10-13）
朱雯苹,陈明华,马骥,竺狄芳,沈雁[3]（2019）在《桦褐孔菌多糖治疗小鼠弓形虫感染的疗效》一文中研究指出目的观察免疫平衡调理剂(桦褐孔菌多糖)治疗小鼠弓形虫感染的疗效。方法雄性BALB/c小鼠40只,随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组以及对照组,每组10只。除对照组外,其余各组腹腔接种弓形虫速殖子,4 d后应用桦褐孔菌多糖治疗。对比各组小鼠免疫平衡调理剂治疗有效率、不良反应发生情况、肝功能指标以及T淋巴细胞水平。结果叁组治疗有效率比较差异有统计学意义(P=0.015),中等剂量组治疗有效率最高;各组小鼠肝功能指标ALT和AST水平比较差异有统计学意义(P<0.05),中剂量组小鼠ALT和AST水平最低;各组小鼠脾脏CD_4~+和CD_8~+细胞水平比较差异有统计学意义(P<0.05),中剂量组小鼠脾脏CD_4~+和CD_8~+细胞水平高于高剂量组和低剂量组;小鼠不良反应主要包括体温升高、肺炎、厌食和呕吐。结论免疫平衡调理剂桦褐孔菌多糖可改善免疫功能,治疗弓形虫感染有效,以中等剂量组疗效最为显着。(本文来源于《中华医院感染学杂志》期刊2019年17期）
张蕾,郝婧玮,宛春雷,柴军红,景云荣[4]（2019）在《桦褐孔菌多糖的优化提取及对小鼠高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝的影响》一文中研究指出通过正交试验优化桦褐孔菌(Phaeoporus obliquus J. Schroet)多糖的提取,并作用于高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝小鼠,来探讨桦褐孔菌多糖对小鼠高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝病的作用效果。通过正交试验优化桦褐孔菌多糖的提取,将多糖作用于高糖高脂诱导的非酒精性脂肪肝小鼠,用ELISA方法检测小鼠血清中的相关指标。结果表明,与正常组比较,模型组小鼠肝脏明显增大,肝指数明显升高(P<0.01),与模型组比较,优化提取的不同浓度桦褐孔菌多糖提取物使小鼠肝脏指数明显下降,对肝脏有不同程度的改善,空腹血糖值下降明显(P<0.01),高浓度给药组(120 mg/kg)使小鼠血清中TC、LDL-C、HDL-C及ALT水平下降较明显(P<0.01),但TG水平变化不大。病理切片结果显示,桦褐孔菌多糖提取物给药组小鼠肝细胞破坏程度有明显改善,高浓度给药组小鼠肝细胞排列更紧密,中央静脉受累情况有明显改善,说明桦褐孔菌多糖提取物对高糖高脂诱导的小鼠非酒精性脂肪肝有一定的治疗效果,其机制可能是与降低血脂有关。(本文来源于《湖北农业科学》期刊2019年14期）
侯国军,李俊峰,车楠,孟繁平,赵洪伟[5]（2019）在《桦褐孔菌多糖对H_2O_2诱导气道平滑肌细胞凋亡的影响研究》一文中研究指出目的 观察桦褐孔菌多糖(Polysaccharide from Inonotus obliquus,PIO)对H_2O_2诱导气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)凋亡的影响。方法 体外培养ASMCs细胞,MTT法检测PIO和H_2O_2对ASMCs细胞毒性作用,Hoechst33342染色观察PIO对H_2O_2诱导ASMCs凋亡的影响,流式细胞术检测细胞总活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,比色法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA),超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase, Caspase) 3、9的活性,Western blot方法检测细胞Bcl-2和Bax蛋白表达。结果 H_2O_2能明显诱导ASMCs细胞凋亡,PIO对ASMCs细胞没有毒性作用,PIO能明显降低H_2O_2诱导ASMCs细胞MDA和ROS生成,提高SOD和GSH水平。PIO能明显上调Bcl-2并下调Bax蛋白表达,降低Caspase3和9的活性,抑制H_2O_2诱导的ASMCs细胞凋亡。结论 PIO通过调节氧化应激水平抑制H_2O_2诱导的ASMCs细胞凋亡。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2019年06期）
曲超[6]（2019）在《桦褐孔菌多糖对AOM/DSS诱导的结肠炎相关结直肠癌模型小鼠的影响及其机制的初步探讨》一文中研究指出背景:桦褐孔菌多糖(Inonotuas Obliquus Polysaccharide,IOP)是从桦褐孔菌中提取的具有多种生物学活性的多糖,目前研究报道,IOP具有抗多种肿瘤的生物学效应。结肠炎相关性结直肠癌(Colitis-associated colorectal cancer,CAC)属于结直肠肿瘤中常见的一种,目前,已经从多学科、多方面得到了大量的支持证据证明结肠炎症是结直肠肿瘤发生的主要原因之一。NOD样蛋白受体3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)已经被证明与CAC发生发展有密切的关系,但是在CAC发展中的具体作用尚不明确。目的:明确IOP对CAC模型小鼠具有抗肿瘤的防治影响,并探究其作用机制是否与NLRP3炎症小体有关。方法:6-8周龄雄性Balb/C小鼠适应性饲养7天后,随机分为叁组。采用AOM和DSS共同处理,构建CAC实验动物模型。第一组为正常对照组,提前10天,用0.9%无菌生理盐水0.3 mL/只隔天灌胃,10天后,单次腹腔注射与第二组AOM平均体积相同的无菌生理盐水,提供新鲜饮用水直到实验结束。第二组为AOM/DSS+生理盐水模型组,简称模型组。提前10天,用0.9%无菌生理盐水0.3 mL灌胃,10天后,单次腹腔注射10 mg/kg的AOM,7天后,将新鲜饮用水换成2.5%DSS溶液饮用7天,继而换成新鲜饮用水饮用14天,此为一个循环。重复四个循环。第叁组为AOM/DSS+IOP实验组,简称为IOP组。提前10天,用150mg/kg/0.3mL/只的IOP溶液隔天灌胃,直到实验结束。AOM/DSS建模方案同第二组。第102天处死将小鼠全部处死。实验期间,每隔7天为节点,计算分析体重变化率,并记录实验期间小鼠存活只数。解剖分离小鼠结肠组织,测量结肠长度,肿瘤个数、肿瘤较长径、肿瘤的负荷。采用HE染色法处理小鼠结肠组织,于显微镜下观察。采用IHC染色法处理小鼠结肠组织,检测NLRP3、Caspase-1蛋白、炎性细胞因子IL-18、IL-1β、COX-2的表达情况。采用RT-PCR法检测小鼠结肠组织NLRP3,Caspase-1、ASC、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA水平。采用WB方法检测小鼠结肠组织 NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18、IL-1β、IL-6、TNF-α、COX-2 蛋白水平。数据采用GraphPad Prism7 软件进行统计学分析。结果:1.IOP影响AOM/DSS诱导的模型小鼠体重变化。在第45天,IOP组小鼠体重变化率均高于模型组(P<0.05);第66天,IOP组小鼠体重变化率均高于模型组(P<0.05)。另外,从第38天到第101天,IOP组的体重变化率始终高于模型组。2.I0P影响AOM/DSS诱导的模型小鼠生存率。模型组生存率为41.67%,IOP组生存率为66.67%,明显高于模型组(P<0.01)。3.IOP影响AOM/DSS诱导的模型小鼠的腺瘤的发生情况。模型组平均腺瘤数目为24±4个,平均体积在3.48±0.68 mm3,平均肿瘤负荷在59.09±4.13 mm;IOP组的平均腺瘤数目为14±3个(P<0.01),平均体积在1.50±0.46 mm3(P<0.01),平均肿瘤负荷在25.00±2.64 mm(P<0.01)。4.HE病理结果显示,模型组切片中,结肠上皮细胞紊乱,黏液层消失,无隐窝结构,无杯状细胞,大量的炎性细胞浸润,腺体结构有筛状结构且腺体增厚,核浆比例增加,核染色深。IOP组中,肠黏膜结构较为完整,黏液层局部存在,隐窝结构局部消失,少量杯状细胞,有较少炎症细胞浸润。5.IHC染色结果显示,IOP组结肠组织与模型组相比,NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达均升高,炎症介质COX-2表达降低。6.RT-PCR方法检测结肠组织中NLRP3炎症小体和相关细胞因子的表达,结果显示,与模型组的结肠组织相比,IOP组结肠组织的NLRP3(P<0.01)、ASC(P<0.05)、Caspase-1(P<0.01)、IL-18(P<0.01)、IL-1β(P<0.05)的 mRNA 表达均升高且具有统计学意义,炎症细胞因子IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.01)的mRNA表达均明显降低且具有统计学意义。7.WB方法检测结肠组织中NLRP3炎症小体和相关炎症细胞因子的表达,结果显示,IOP 组的 NLRP3(P<0.01)、ASC(P<0.01)、Caspase-1(P<0.01)、IL-18(P<0.01)、IL-1β(P<0.05)等蛋白水平的表达明显高于模型组,炎性细胞因子IL-6(P<0.01)、TNF-α(P<0.01)、COX-2(P<0.01)蛋白水平表达明显降低且低于模型组。结论:IOP对AOM/DSS诱导的CAC模型小鼠具有防治作用,其作用机制可能与激活炎症小体NLRP3及降低其相关炎性细胞因子有关。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-31）
郑金娟[7]（2019）在《基于NLRP3炎症小体信号通路的桦褐孔菌多糖对炎症细胞模型的影响及机制初探》一文中研究指出背景:桦褐孔菌是一种非常珍贵的具备抗氧化、抗肿瘤、预防高血糖和抑炎等功能的药用真菌,本实验室已证明桦褐孔菌多糖(Inonotus obliquus polysaccharides,IOP)可抑制脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞表达和分泌IL-6、TNF-α等细胞因子。NLRP3炎症小体活化后可引起炎症相关细胞因子的过度表达以及分泌,介导炎症的发生。当NLRP3炎症小体的活化被抑制,其参与的炎症相关疾病可能被改善。IOP的抗炎作用机制是否与NLRP3炎症小体通路有关,至今未见研究报道。目的:利甩LPS诱导的体外炎症细胞模型，明确IOP的抗炎机制是否与NLRP3炎症小体信号通路有关。方法:本研究选择IOP作为研究对象。首先,复苏RAW264.7细胞,分为正常组和四种浓度的药物组,药物浓度分别为20、40、80、160μg/mL,培养24h后,使用MTT法检测不同浓度的IOP对RAW264.7细胞的药物毒性,判断IOP的药物安全性。其次,使用LPS(lμg/mL)刺激RAW264.7细胞构建的体外炎症细胞模型。将细胞分为正常组(Normal)、模型组(LPS)以及实验组(LPS+IOP),进行以下实验。第一部分,IOP(40μg/mL)与LPS共同作用于RAW264.7细胞6 h/24h后分别提取细胞内RNA以及蛋白质,通过RT-PCR法检测TNF-αmRNA的表达以及WB法检测Phospho-NF-κB-p65、COX2蛋白水平表达量,判断IOP对LPS处理的炎症细胞模型炎症分子及通路的影响。第二部分,使用IOP与LPS共同作用于RAW264.7细胞6 h/24 h后,分别提取细胞内RNA以及蛋白质,通过RT-PCR法检测NLRP3炎症小体各组分及其下游IL-18和IL-1βmRNA的表达。利用WB法检测NLRP3炎症小体各组分及其下游IL-18和IL-1β的蛋白水平表达量的改变。同时,收集IOP与LPS共同作用于RAW264.7细胞24h后的细胞上清液,用ELISA法对上清液中IL-18和IL-1β蛋白水平进行进一步验证检测。判断NLRP3在炎症发生和处理中的作用。最后,进行验证实验,使用WB法检测基因转染后 β-actin 以及 NLRP3siRNA1、NLRP3siRNA2、NLRP3siRNA3 的沉默效果。将细胞分为阴性对照组(NC-siRNA)、模型组(LPS)、实验组(LPS+IOP)、基因沉默后LPS处理组(LPS+siRNA)组以及基因沉默后LPS+IOP处理组(LPS+IOP+siRNA)组。NLRP3基因沉默24 h后,再通过LPS作用于基因沉默后的细胞24 h,提取蛋白,通过WB技术对NLRP3炎症小体组成蛋白的进行检测。结果:MIT结果表明不同浓度的IOP对RAW264.7细胞的存活率差异无统计学意义即对细胞不具有药物毒性。RT-PCR结果显示,Normal组与LPS组相比,细胞内TNF-αmRNA表达增加(P<0.05),LPS+IOP组TNF-αmRNA表达与LPS组相比,明显下降(P<0.05)。同时,与LPS组相比,LPS+IOP组细胞内NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18 和 IL-1βmRNA 的表达明显下降(P<0.05)。WB 结果显示,相比于LPS组,LPS+IOP组细胞内COX2的蛋白表达明显减少(P<0.05);NF-κB-p65的磷酸化水平也明显被抑制(P<0.05)。此外,与Normal组相比,LPS组NLRP3炎症小体明显活化,其下游的促炎性细胞因子IL-18以及IL-1β的表达也明显升高,而IOP逆转了这种改变(P<0.05)。ELISA结果表明,LPS+IOP组促炎性细胞因子IL-18以及IL-1β在细胞培养上清液中的表达与LPS组相比有下降的趋势(P<0.05)。NLRP3基因沉默实验结果显示,与LPS组相比,LPS+siRNA组以及LPS+IOP+siRNA组明显抑制了 LPS引起的NLRP3、Caspase-1和ASC的表达升高(P<0.05),LPS+siRNA组与LPS+IOP+siRNA组相比没有统计学意义(P>0.05)。结论:IOP抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症,其机制可能是通过调节NF-κB核转录和NLRP3炎症小体的活化来实现。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-31）
张蕾,郝婧玮,宛春雷,柴军红,赵玥[8]（2019）在《桦褐孔菌多糖的提取工艺优化及对人肝癌细胞HepG2脂肪堆积的影响》一文中研究指出通过L_9(3~4)正交试验,通过MTT法选取桦褐孔菌多糖对HepG2细胞的安全浓度,检测不同浓度的桦褐孔菌多糖对胞内TG蛋白的影响,及桦褐孔菌多糖减轻细胞内脂质堆积的作用。结果表明,桦褐孔菌多糖最佳条件为1 g∶15 mL的料液比,在温度30℃下提取30 min,超声功率为480 W。桦褐孔菌多糖可明显减轻HepG2细胞内脂质堆积,显着降低细胞中TG的含量,其中600 mg/L桦褐孔菌多糖对TG的清除率达24.57%,脂滴数量明显减少。说明桦褐孔菌多糖具有良好的体外降脂活性,对脂肪肝有较好的预防效果。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年10期）
李金霞[9]（2019）在《桦褐孔菌多糖对弓形虫感染RAW264.7细胞信号通路调控作用的硏究》一文中研究指出桦褐孔菌多糖(IOP)是从传统中药桦褐孔菌当中提取、分离的多糖类成分,具有广泛的生物活性。本试验室前期研究表明,IOP具有显着的体内抗弓形虫和免疫增强等功能。但对于IOP的体外抗弓形虫机制研究尚不明确。因此,本试验将对IOP对于弓形虫速殖子体外感染的RAW264.7巨噬细胞中NF-κB和MAPK两个信号通路调控机制做研究。本试验将巨噬细胞RAW264.7作为试验对象,研究IOP对弓形虫感染的RAW264.7巨噬细胞中炎症因子表达水平及基因转录水平的影响。通过检测NF-κB以及MAPK信号途径中关键性蛋白的表达,从分子免疫水平探讨IOP的抗弓形虫免疫调控机制,为IOP的研发应用提供科学依据。首先,本试验首先采用MTT法确定IOP的安全试验剂量。试验结果显示,0～180μg/mL的IOP无明显的细胞毒性作用(P>0.05)。因此,本试验拟定IOP的高、中、低组中IOP的浓度分别为100μg/mL、50 μg/mL和25 μg/mL。ELISA法检测RAW264.7各组细胞培养液上清中相关炎症因子IL-1β、IL-4、IL-6、IFN-γ及TNF-α的表达调控水平。RT-PCR方法检测RAW264.7细胞相关炎症因子及趋化因子mRNA表达。激光共聚焦法检测IOP对NF-κB信号通路中细胞核转录因子AP-1(c-jun)和 N-NF-κB p65 活性的影响。Western-blot 方法测定 IOP 对 TLR2、TLR4 及 NF-κB信号转导通路关键蛋白 p-IKKα/β、p-IκκBα、C-NF-κB p65 及 N-NF-κB p65 以及 MAPK信号通路关键蛋白p-p38、p-JNK和p-ERK磷酸化表达水平的影响。ELISA结果显示,丨OP在一定程度上抑制相关炎症因子过度表达。给药组与模型组相比,细胞上清液中细胞因子IL-1β、IL-4、IL-6、IFN-γ和TNF-αα均呈现下降趋势。RT-PCR结果显示,IOP在一定程度上呈剂量依赖性的抑制弓形虫感染RAW264.7 细胞中 IL-1β、IL-6、TNF-α 及趋化因子 MIP-1α 和 MCP-1 mRNA 的过度表达。IOP可以在细胞转录水平上调控弓形虫感染的RAW264.7细胞中细胞因子及趋化因子mRNA表达,进而调控机体的免疫反应。本试验激光共聚焦结果显示,IOP能够剂量依赖性的抑制弓形虫感染的RAW264.7细胞中细胞核转录因子AP-1(c-jun)和N-NF-κB p65从细胞质解离向核内转移,从而发挥体外抗弓形虫的作用。Western-Blot结果显示,IOP能够剂量依赖性的上调弓形虫感染的RAW264.7细胞中C-NF-κB p65 的表达,下调 TLR2、TLR4、p-IKKα/β、p-IKBα、N-NF-κB p65 以及MAPK信号通路关键蛋白p-p38、p-JNK和p-ERK蛋白的过度表达(P<0.05或P<0.01)。结果表明,IOP能够调控NF-κB信号通路中IKKα/β、IκBα、p38、JNK和ERK的过度磷酸化水平及TLR2、TLR4表达并调控NF-κB p65从胞浆向核中移位,从而发挥其抗弓形虫免疫作用。综上试验结果表明,IOP在弓形虫感染的RAW264.7巨噬细胞中表现出抗弓形虫作用。IOP通过调控NF-κB和MAPK信号转导通路中信号因子的级联作用,调节细胞因子表达水平及mRNA表达和通路中关键蛋白表达,从而发挥其体外抗弓形虫作用。(本文来源于《延边大学》期刊2019-05-28）
任婷[10]（2019）在《桦褐孔菌多糖的提取工艺及抗衰老作用的实验研究》一文中研究指出目的:优化桦褐孔菌多糖的提取工艺,研究桦褐孔菌多糖对依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞衰老的保护作用及机制。方法:(1)水提醇沉法提取桦褐孔菌多糖成分。在单因素实验的基础上,采用Box-Behnken响应面法(BBD-RSM)优化桦褐孔菌多糖提取工艺,研究提取温度、提取时间、液料比等提取参数及交互作用对桦褐孔菌多糖得率的影响;?KTA explorer 100层析系统结合DEAE-纤维素离子交换层析和琼脂糖CL-6B凝胶过滤层析对桦褐孔菌多糖进行分级纯化。(2)建立体外抗氧化模型(DPPH自由基清除实验、ABTS总抗氧化能力测定实验和FRAP铁离子还原能力测定实验)对不同级分的桦褐孔菌多糖进行抗氧化活性筛选。(3)构建大鼠主动脉平滑肌细胞衰老模型,采用MTT法、形态学观察、衰老β-半乳糖苷酶染色法、DAPI染色法研究桦褐孔菌多糖对依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞衰老的保护作用。(4)采用ROS检测实验、线粒体膜电位检测实验研究桦褐孔菌多糖对依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞氧化应激的抑制作用。(5)采用qRT-PCR、Western blot方法分别在mRNA水平、蛋白质水平检测桦褐孔菌多糖对依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞衰老相关基因p53、p21和p16表达的影响。结果:(1)桦褐孔菌多糖的最佳提取条件为:提取温度100℃、提取时间2.39 h,液料比35.8:1 mL/g,最大得率为11.21%;分级纯化得到两种桦褐孔菌多糖,即中性多糖IOP-1和酸性多糖IOP-2。(2)体外抗氧化实验表明:IOP-1和IOP-2均具有体外抗氧化活性,包括DPPH自由基清除能力、ABTS总抗氧化能力和FRAP铁离子还原能力,IOP-1的体外抗氧化活性均强于IOP-2和阳性对照维生素E。在0.025~1.6 mg/mL浓度范围内,IOP-1在浓度为0.2 mg/mL时对DPPH自由基清除率达到83.39±0.03%,强于1.6 mg/mL浓度下的IOP-2和维生素E的DPPH自由基清除率73.74±0.04%和39.15±0.03%(p<0.05);IOP-1在浓度为0.4 mg/mL时的ABTS总抗氧化能力为1.39±0.08 mmoL/g,强于IOP-2和维生素E在1.6 mg/mL浓度下的总抗氧化能力1.08±0.07 mmoL/g和0.38±0.12 mmoL/g(p<0.05);在1.6 mg/mL浓度下,IOP-1的铁离子还原能力为1.15±0.10 mmoL/g,强于同样浓度下的IOP-2和维生素E的铁离子还原能力0.75±0.07 mmoL/g和0.22±0.04 mmoL/g(p<0.05)。(3)IOP-1具有促进大鼠主动脉平滑肌细胞增殖的作用,可抑制依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞增殖阻滞,提高细胞活力,并抑制依托泊苷诱导的A10细胞衰老形态学变化、衰老β-半乳糖苷酶活性和衰老相关异染色质聚集。(4)IOP-1通过抑制由依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞ROS的生成和线粒体膜电位的下降而抑制氧化应激。(5)IOP-1通过抑制由依托泊苷诱导的衰老相关基因p53、p21和p16的表达而保护大鼠主动脉平滑肌细胞衰老。结论:明确了桦褐孔菌多糖的最佳提取工艺;筛选了具有体外抗氧化活性的桦褐孔菌中性多糖组分IOP-1;IOP-1抑制依托泊苷诱导的大鼠主动脉平滑肌细胞衰老表型,并通过抑制ROS生成和平衡线粒体膜电位抑制氧化应激,其分子机制为调控经典衰老相关信号通路p53-p21、p16-pRb中衰老相关基因p53、p21以及p16的高表达。(本文来源于《北华大学》期刊2019-05-27）
桦褐孔菌多糖论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
[目的]观察桦褐孔菌多糖(Polysaccharide from Inonotus oblipuus,PIO)对感染牛源犬新孢子虫孕鼠胎盘激素和细胞因子调节功能的影响。[方法]雌性BALB/c小鼠50只随机分成正常组、模型组、PIO低剂量组(PIO-100)、PIO中剂量组(PIO-200)、PIO高剂量组(PIO-300)。建立BABL/c孕鼠牛源犬新孢子虫感染模型,在攻虫第12、14、16、18天分批处死孕鼠,采集孕鼠血清,制备孕鼠胎盘细胞悬液,采用ELISA方法检测PIO对牛源犬新孢子虫感染孕鼠血清中CG、PL、E3及ACH等胎盘激素水平,以及孕鼠胎盘细胞悬液中CRH、TGF-β、IGF-2等细胞因子水平的影响。[结果]模型组四个时间点血清中CG、PL、E3及ACH水平,胎盘细胞悬液中CRH、TGF-β、IGF-2水平,与正常组比较差异显着;PIO高剂量组可以使感染孕鼠PL、E3、ACH、IGF-2水平显着上调,CRH、TGF-β、CG水平趋向正常。[结论]PIO可以一定程度上纠正因牛源犬新孢子虫感染引起的孕鼠胎盘激素和细胞因子分泌紊乱,从而降低流产及死胎的发生。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
桦褐孔菌多糖论文参考文献
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